Сотрудники лабораторий для выявления в крови количества лейкоцитов чаще всего используют камеру Горяева. Подсчет лейкоцитов в камере Горяева является менее точным методом, чем определение лейкоцитов при помощи электронных аппаратов. Величина ошибки составляет ±7 %.
Как осуществляется подсчет
- В пробирку вливают 0,4 миллилитра жидкости разводящей, а также 0,02 миллилитра крови капиллярной. Готовое разведение считают равным 1:20.
- В качестве разводящей жидкости как правило используют 3-х или же 5-ти %-ный раствор уксусной кислоты. Ее предварительно подкрашивают метиленовым синим, который при реакции окрашивает ядра лейкоцитов.
- До начала заполнения камеры Горяева пробирку как можно тщательнее встряхивают. Заполнение камеры производится так же, как и для подсчета эритроцитов.
Особенности расчета
По количеству лейкоциты значительно уступают эритроцитам, именно по этой причине расчет производится в 100 больших квадратах. В 100 квадратах просчитано а лейкоцитов.
При объеме малого квадрата в 14 000 миллиметров кубических и разведении крови в 20 раз расчет количества лейкоцитов производится следующим образом: 4000х20, а после этого делится на 1600. Получается 1/2 х а.
Чтобы получить показатель уровня лейкоцитов в 1 мкл рассчитанный показатель нужно поделить на 2 и добавить еще два нуля.
Отклонение лейкоцитов от уровня свидетельствует о лейкоцитозе и лейкопении, и требует незамедлительного подробного обследования, так как велика вероятность наличия туберкулеза, пневмонии, сепсиса, брюшного тифа, лучевой болезни.
Принцип . Подсчет лейкоцитов при микроскопии в определенном числе квадратов счетной камеры и расчет их количества в 1 л крови с учетом разведения крови и объема счетной камеры.
Реактив : 3–5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный для окраски ядер лейкоцитов несколькими каплями раствора метиленового синего. Раствор имеет голубой цвет, может длительно храниться.
Ход определения . В сухую пробирку наливают 0,4 мл раствора уксусной кислоты. Из пальца набирают 0,02 мл крови (можно использовать стабилизированную антикоагулянтом венозную кровь). Вытирают кончик пипетки, затем выдувают из нее кровь на дно пробирки, перемешивают, повторно набирая и выдувая смесь крови и реактива (пипетируя). Маркируют пробирку и оставляют ее до момента подсчета. Хранить смесь крови с раствором уксусной кислоты рекомендуется не более 2–4 ч.
Кровь, разведенную в пробирке уксусной кислотой, тщательно перемешивают и заполняют ею счетную камеру. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении на 1 мин для оседания лейкоцитов. Не меняя горизонтального положения камеры, помещают ее на столик микроскопа и при малом увеличении (окуляр 10×, объектив 8×) подсчитывают лейкоциты в 100 больших квадратах, что соответствует 1600 малым.
Для большей точности лейкоциты считают по всей сетке в больших квадратах, не разделенных на малые квадраты и полосы, начиная с верхнего левого угла сетки. Для лучшего контрастирования затемняют поле зрения, опуская конденсор и закрывая диафрагму. Считают клетки, расположенные внутри квадрата и лежащие на любых двух линиях, чтобы дважды не подсчитывать одну и ту же клетку.
Расчет числа лейкоцитов проводят по формуле:
где X - число лейкоцитов в 1 мкл крови; а - число лейкоцитов в 100 больших квадратах; 20 - разведение крови; 100 - число больших квадратов; 250 - коэффициент пересчета на 1 мкл, так как объем одного большого квадрата равен 1/250 мкл (сторона квадрата - 1/5 мм, высота - 1/10 мм).
На практике для расчета количества лейкоцитов в 1 мкл крови их число в 100 больших квадратах умножают на 50, а в 1 л - полученную величину умножают на 106.
Примечание . При подсчете лейкоцитов неизбежна ошибка в 6–8 % случаев.
Причины ошибок .
- При большом количестве нормоцитов в периферической крови их засчитывают в число лейкоцитов (и лейкоциты, и нормоциты - ядросодержащие клетки). Для того чтобы правильно установить количество лейкоцитов, из общего числа ядросодержащих клеток крови следует вычесть количество нормоцитов.
- Остальные ошибки аналогичны тем, которые возникают при подсчете в счетной камере количества эритроцитов.
Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:
- Смесители для эритроцитов и лейкоцитов.
- Пробирки типа серологических.
- Пипетки на 1 и 5 мл.
- Капилляры к гемометру Сали.
- Стеклянные палочки.
- Глазные пипетки.
- Счетные камеры Горяева со шлифованными стеклами к ним.
- Микроскопы.
- Колбочки с чистой водой.
- Поваренная соль.
- Сулема.
- Сернокислый натрий.
- Ледяная уксусная кислота.
- 96° этиловый спирт.
- Генцианвиолет (метиленовая синька).
- Набор для взятия крови из пальца.
Взятие крови в смесители для подсчета эритроцитов и лейкоцитов
Для подсчета количества эритроцитов и лейкоцитов необходимы следующие реактивы:
- 3% раствор хлористого натрия (NaCl) : 3 г хлористого натрия помещают в колбочку на 100 мл и доливают дистиллированной водой до метки 100 мл.
- Реактив Гайема: к 0,5 г сулемы, 1 г хлористого и 5 г сернокислого натрия приливают 200 мл дистиллированной воды. Оба реактива сохраняют эритроциты.
- 3% раствор уксусной кислоты - 3 мл ледяной уксусной кислоты помещают в цилиндр на 100 мл и доливают дистиллированной водой до метки. Реактив подкрашивают 1% водным раствором генцианвиолета из расчета 5-6 капель краски на 10 мл 3% уксусной кислоты.
Кровь для подсчета эритроцитов и лейкоцитов берут в специальные смесители или в пробирки.
На чистый и сухой смеситель для эритроцитов надевают резиновую трубочку со стеклянным мундштуком, после чего в него насасывают кровь, без пузырьков воздуха, точно до метки 0,5, затем этим же смесителем набирают 3% раствор хлористого натрия или реактив Гайема точно до метки 101, не допуская появления пузырьков воздуха. При этом кровь разводится в 200 раз. Со смесителя снимают резиновую трубочку, захватывают его между пальцами, несколько раз встряхивают, прокалывают им бумажку, на которой указана фамилия больного, и кладут его на стол в горизонтальном положении.
В чистый сухой смеситель для лейкоцитов таким же способом, как и в смеситель для эритроцитов, насасывают кровь до метки 0,5, после чего тем же смесителем набирают 3% раствор уксусной кислоты до метки 11. При этом кровь разводится в 20 раз. Затем со смесителя снимают резиновую трубочку, несколько раз встряхивают его, прокалывают им бумажку, на которой указана фамилия больного, и кладут на стол в горизонтальном положении.
Взятие крови в пробирки для подсчета эритроцитов и лейкоцитов по Н. М. Николаеву
Для каждого взятия крови берут две нумерованные пробирки, серологическую и агглютинационную. В серологическую пробирку помещают 4 мл 3% раствора хлористого натрия или реактива Гайема, а в агглютинационную - 0,4 мл 3 % раствора уксусной кислоты. В каждую пробирку вносят по 0,02 мл крови, взятой капилляром от гемометра, и тотчас же смешивают содержимое пробирок, вращая их между ладонями.
В серологической пробирке (для эритроцитов) получают разведение крови в 200 раз, а в агглютинационной (для лейкоцитов) - в 20 раз.
Изучение счетной камеры Горяева и заполнение ее кровью для подсчета эритроцитов и лейкоцитов
Количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывают в специальных счетных камерах. Для этой цели пользуются счетной камерой Горяева, которая представляет собой стекло с нанесенными на него двумя сетками. Сетки отделены одна от другой углублениями и делятся разграничительными линиями на 225 квадратов. Площадь сетки 9 мм2, высота, создающаяся при притирании шлифованного покровного стекла в камере, 0,1 мм, объем 0,9 мм3. Перед заполнением камеры кровью ее моют водой и насухо вытирают.
К сухой поверхности камеры притирают шлифованное покровное стекло, плавно продвигая его по ней взад и вперед до появления цветных колец Ньютона в местах соприкосновения покровного стекла со стеклом камеры. Затем кровь в смесителе встряхивают в течение 1-2 минут, после чего из смесителя выпускают на ватку 1-2 капли крови, следующую каплю помещают перед шлифованным покровным стеклом. При нанесении капли крови надо следить за тем, чтобы в пространство над сеткой камеры не попал воздух и чтобы не было избытка жидкости. Одну сетку заполняют для подсчета эритроцитов, вторую - для подсчета лейкоцитов.
Для заполнения камеры Горяева кровью, взятой по способу Н. М. Николаева (пробирочный метод), поступают следующим образом. К счетной камере притирают шлифованное стекло. Из каждой пробирки, предварительно встряхнув ее, с помощью стеклянной палочки с оплавленным концом берут по одной капле жидкости и заполняют ими раздельно обе сетки камеры, для чего каплю помещают перед щелью, образующейся между шлифованным стеклом и счетной камерой, в результате чего жидкость заполняет пространство над сетками.
Подсчёт эритроцитов и лейкоцитов в счетной камере Горяева
Количество эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева подсчитывают с помощью микроскопа. Для этого заполненную разведенной кровью камеру Горяева помещают на предметный столик микроскопа и под малым увеличением (окуляр 15 X или 10Х, объектив 8Х), с опущенным конденсором находят сетку камеры. К подсчету форменных элементов приступают через 2-3 минуты после заполнения камеры кровью.
Эритроциты подсчитывают в пяти квадратах, каждый из которых разделен на 16 маленьких квадратиков. Подсчет начинают с левого верхнего квадрата, а затем продвигают камеру по диагонали сверху вниз. Во избежание повторного подсчета одних и тех же эритроцитов руководствуются следующим правилом: все эритроциты внутри квадратика и на разграничительных линиях подсчитывают только тогда, когда они большей своей половиной заходят внутрь квадратика; клетки, пересеченные разграничительной чертой пополам, подсчитывают лишь на двух сторонах из четырех сторон квадрата (на левой и верхней); клетки, выходящие большей своей половиной за пределы разграничительных линий, совсем не считают.
Результаты подсчета эритроцитов по каждому из пяти больших квадратов записывают и суммируют. Для расчета количества эритроцитов пользуются следующей формулой:
где х — количество эритроцитов в 1 мм3 крови; а — сумма эритроцитов, подсчитанных в пяти квадратах; б — разведение крови в 200 раз; в — количество сосчитанных маленьких квадратиков — 80.
Для упрощения расчета к количеству подсчитанных эритроцитов приписывают четыре нуля.
В норме количество эритроцитов от 4 500 000 до 5 000 000 в 1 мм3 крови.
Лейкоциты подсчитывают в 100 больших квадратах. При подсчете их руководствуются теми же правилами, которые указаны для эритроцитов, а затем производят расчет по приведенной выше формуле, в которой цифра разведения равна 20, а количество подсчитанных квадратов — 1600.
Для простоты расчета количество подсчитанных лейкоцитов умножают на 50 или делят на 2 и приписывают два пуля.
В норме количество лейкоцитов от 5000 до 8000 в 1 мм3 крови.
Чистка смесителей. После подсчета лейкоцитов смесители моют следующим образом: резиновой грушей удаляют остатки крови, после чего их многократно промывают дистиллированной водой, спиртом и просушивают эфиром или в сушильном шкафу. Показателем чистоты смесителей служит свободное передвижение бусинки при встряхивании смесителя.
В последнее время для подсчета эритроцитов и лейкоцитов пользуются целоскопом отечественного производства СФЭК-62, который позволяет быстро и точно определить количество форменных элементов в 1 мм3 крови.
Техника его использования подробно изложена в инструкции, приложенной к прибору.
Вычисление цветного показателя (цветной коэффициент)
Цветной показатель выражает среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. В норме цветной коэффициент равняется 1,0 при 100% гемоглобина и 5 000 000 эритроцитов в 1 мм3 крови. Его рассчитывают исходя из следующей пропорции: найденное количество гемоглобина (в единицах) так относится к его нормальному количеству, как найденное количество эритроцитов к их нормальному числу.
Например, если найденный гемоглобин равен 88 ед., а количество эритроцитов 4 8000 000 в 1 мм3, то цветной показатель равен 0,91.
При количестве эритроцитов меньше 1 000 000 делить надо на две первые цифры подсчитанного числа эритроцитов. Цветной показатель в норме равен 0,9-1,1.
Определение содержания гемоглобина в одном эритроците (СГЭ)
В последнее время наряду с цветным показателем рассчитывают более достоверную абсолютную величину — содержание гемоглобина в одном эритроците - СГЭ. При расчете этого показателя весовое количество гемоглобина выражают в очень мелких единицах — микромикрограммах (мкмкг), или, что правильнее — пикограммах (пг).
СГЭ получают умножением количества гемоглобина в грамм-процентах на 10 и делением на число эритроцитов в миллионах.
Лабораторная камера Горяева , названная в честь русского врача, профессора Казанского университета Горяева Н.К., является специальным монолитным предметным стеклом, предназначенным для подсчета количества клеток в заданном объеме жидкости. Кроме того, используя камеру Горяева можно определить увеличение микроскопа. Камеры Горяева широко применяются в области клинических и биомедицинских исследований.
Популярные области применение камеры Горяева:
- Подсчет форменных элементов крови
- Подсчет эритроцитов
- Подсчет лейкоцитов
- Подсчет ретикулоцитов
- И т.п.
- Подсчет форменных элементов мочи
- Исследование эякулята – оценка количественных и качественных параметров сперматозодиов
- Вычисление концентрации спор в вакцине
- Подсчет ооцист в препарате
- И т.п.
Камеры Горяева выпускаются в двух модификациях: двухсеточные (двухкамерные) и четырехсеточные (четырехкамерные). В определении цены камеры Горяева важную роль играет качество шлифовки стекла, метод нанесения сетки – лазерная гравировка или же вакуумное напыление.
Что собой представляет камера Горяева? Камера Горяева есть не что иное, как прозрачное монолитное предметное стекло поперечными прорезями и нанесенной специальным образом микроскопической сеткой. В случае двухкамерной камеры Горяева мы имеем четыре прорези, образующие три поперечно расположенных площадки, при этом средняя площадка разделена продольной прорезью на две одинаковых камеры, на каждой из поверхности площадки которых нанесена сетка. В случае же четырехкамерной камеры Горяева мы получаем предметное стекло с пятью прорезями, образующих четыре площадки, при этом две внутренние дополнительно разделены продольной прорезью для получения четырех камер с нанесенной микроскопической сеткой на поверхности площадок.
Рассмотрим более подробно особенности сетки . Специальная сетка наносится на внутренние площадки, расположенные ниже соседних боковых площадок на 0.1мм. Боковые площадки предназначены для притирания покровного стекла до появления Ньютоновских колец. Как правило, используют специальное покровное стекло для камеры Горяева с закругленными краями. После притирания покровного стекла создается камера, закрытая с двух боковых сторон, а с двух других остаются щели (так называемые, капиллярные пространства), через которые и заполняют камеру. Что конкретно представляет собой сетка? Микроскопическая сетка камеры Горяева расчерчена на большие и маленькие квадраты, сгруппированные различными способами. Сетка Горяева содержит 225 больших квадратов (15 рядов по 15 больших квадратов в каждом), разграфленных вертикально, горизонтально, крест-накрест и неразграфленных. При этом размеры малых делений клетки сетки составляют 0.05мм, а больших – 0.2мм. Важно, что малый квадрат со стороной 0.05мм во всех сетках является постоянной величиной. Не трудно рассчитать, что площадь малого квадрата равна 0.0025 мм2, а большого квадрата – 0.04мм2. Тогда получаем, что объем жидкости над квадратом, образованным большими делениями сетки Горяева, составляет 0.004 микролитра.
Подсчитав количество форменных элементов (ФЭ) над большим квадратом, можно подсчитать плотность данного типа клеток в суспензии по формуле:
где X - количество ФЭ/мл, M- количество ФЭ над большим квадратом.
При работе с камерой Горяева важно следить, чтобы ее рабочие поверхности оставались сухими и чистыми. Кроме того, при подсчете форменных элементов нельзя допускать наличие воздушных пузырей на сетке камеры, так как они могут мешать точности подсчета.
После работы с камерами Горяева следует выполнить их дезинфекцию одним из допустимых способов:
- Погружение в 70%-ный раствор этилового спирта на 30 минут
- Погружение в 4%-ный раствор формалина на 60 минут при комнатной температуре.
Приведем примеры применения камеры Горяева и некоторые формулы.
Практическое применение камеры Горяева
Прежде чем приступить к проведению лабораторных исследований, рекомендуется тщательно протереть камеру Горяева небольшим кусочком чистого бинта, слегка смоченного в спирте. Мы не советуем использовать для этих целей вату, так как она может оставить волокна. Таким же образом следует обработать и покровное стекло для камеры Горяева. Учтите, что при использовании низкокачественного спирта на поверхностях может образоваться осадок, тем или иным образом мешающий проведению исследований. Чтобы избежать появления связанных с этим явлением нежелательных эффектов, рекомендуется дополнительно протереть камеру и покровное стекло чистым марлевым шариком без спирта. Притирание покровного стекла к камере должно быть выполнено очень тщательно до появления на месте контакта радужных колец (так называемых, цветных колец Ньютона) с обоих краев. Для лучшего притирания можно воспользоваться одной хитростью и слегка выдохнуть воздух на камеру и покровное стекло, так чтобы небольшое количество влаги сконденсировалось на поверхностях стекол, что обеспечит лучший контакт.
При отсутствии специальных покровных стекол, прилагающихся к камере Горяева, можно использовать обычные стандартные покровные стекла.
Помимо целевого использования камеры Горяева для подсчета форменных элементов крови и т.п., данное стекло может расцениваться как своеобразный эталон для определения увеличения микроскопа. Для этого следует воспользоваться следующей формулой:
где X – это увеличение микроскопа; p1 – положение левой границы клетки камеры Горяева; p2 – положение правой границы клетки или группы клеток; N – количество клеток между измеряемыми границами; a - размер клетки камеры Горяева (равен 0,05 мм).
Камера Горяева также используется для подсчёта количества клеток в культуре.
Для подсчета клеточных элементов в жидкостях, содержащих их в меньших концентрациях, используются аналогичные по конструкции камеры Фукса-Розенталя и Нажотта , имеющие большую глубину – 0.2 мм и 0.5 мм соответственно. Эти же камеры используются в альгологии для количественного учета фитопланктона. Часто камера Фукса-Розенталя используется для подсчета форменных элементов спинномозговой жидкости. В отличие от камеры Горяева, большие квадраты сетки Фукс-Розенталя не разграфлены и сгруппированы по 16 квадратов, причем каждая такая группа ограничена тройными линиями.
Подсчет форменных элементов крови
Наиболее часто камеры Горяева используются именно для определения форменных элементов крови при проведении лабораторных исследований. Так для подсчета эритроцитов кровь необходимо развести в 200 раз, лейкоцитов – в 20 раз. Количество форменных элементов (ФЭ) в 1мкл крови определяют по формуле:
где N – искомое количество ФЭ в 1 мкл крови; m – число ФЭ в определенном количестве малых квадратов; q – количество малых квадратов сетки камеры Горяева, в которых подсчитывались ФЭ, s – степень разведения крови.
Формула для подсчета эритроцитов
Для подсчета эритроцитов используются 5 больших или 80 малых квадратов сетки, расположенных по диагонали. Таким образом, получаем следующую формулу:
N=m*4000*200/(5*16)=m*10000
Формула для подсчета лейкоцитов
Для подсчета лейкоцитов можно использовать один из трех методов:
1. Лейкоциты считают в 64 больших (пустых) квадратах
N=m*4000*20/(64*16)=m*78,125≈m*78
2. Лейкоциты считают по всей сетке в 169 больших квадратах (рекомендуется для образцов крови с выраженной лейкопенией)
N=m*4000*20/(169*16)≈m*29,6
3. Лейкоциты считают в 100 больших квадратах (64 пустых + 36 разграфленных квадратов по периметру сетки)
N=m*4000*20/(100*16)=m*50
Таблица нормальных значений:
Подсчет форменных элементов в мочевом осадке
Для определения ФЭ в мочевом осадке при анализах мочи по Нечипоренко, Аддис-Каковскому, Амбурже осуществляется по всей сетке Горяева и рассчитывается по формуле:
где N – число ФЭ в 1 мкл осадка; m – число ФЭ, подсчитанных по всей сетке; 0.676 – объем камеры Горяева (мкл)
Для работы необходим ы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, счетная камера Горяева, смеситель (меланжер) для подсчета лейкоцитов, 5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, микроскоп. Объект исследования – человек.
Проведение работы : Счетную камеру помещают под микроскопом и рассматривают сетку Горяева вначале при малом, а затем при большом увеличении. Накрывают камеру покровным стеклом, притирая его края к стеклу камеры до появления радужных колец Ньютона. Оставив камеру под микроскопом, прокалывают палец ранее описанным методом. Первую выступившую каплю крови из пальца стирают ватным тампоном. Во вторую каплю погружают кончик смесителя для лейкоцито, держат его вертикально и набирают кровь до отметки 1, следя, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Обтирают конец капилляра фильтровальной бумагой и быстро, пока кровь не свернулась, переносят его в чашку с 5% раствором уксусной кислоты, продолжая держать смеситель вертикально. Набирают раствор до метки 11 (т.е. разводят кровь в 10 раз), после чего смеситель переводят в горизонтальное положение и кладут на стол.
Для подсчета лейкоцитов берут заполненный меланжер, зажимая нижний конец пальцем, снимают резиновую грушу и, зажав оба конца смесителя третьим и первым пальцами, в течение 1 мин перемешивают кровь. При этом эритроциты разрушаются и в поле зрения остаются только лейкоциты, точнее их ядра. Т.к. уксусная кислота подкрашена метиденовым синим, ядра лейкоцитов становятся видны отчетливее. Выпускают из смесителя на вату три капли, а четвертую наносят на среднюю площадку камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля сама втягивается в покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, высушить и заполнить снова. Заполненную камеру ставят под микроскоп и, если форменные элементы расположены равномерно (что является показателем хорошего перемешивания крови), приступают к подсчету. Подсчитывают число лейкоцитов в 25 больших квадратах (разделенных на 400 маленьких). Подсчет ведут в пределах маленького квадрата по рядам (от верхнего до нижнего). Во избежание двукратного подсчета клеток, лежащих на границе между малыми квадратами, применяют правило Егорова: « к данному квадрату относятся эритроциты, лежащие как внутри квадрата, так и на его левой и верхней границах; эритроциты, лежащие на правой и нижней границах, к данному квадрату не относятся». Подсчитав сумму лейкоцитов в 25 больших квадратах (что составляет 400 маленьких), находят среднее арифметическое число лейкоцитов в одном маленьком квадрате. Зная, что объем пространства камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм 3 , умножают найденное число на 4000. Получают число лейкоцитов в 1 мм 3 разведенной крови. Умножив на величину разведения (10), получают количество лейкоцитов в 1 мм 3 цельной крови. Таким образом, формула для вычисления количества лейкоцитов следующая: Х = (Л х 4000 х 10)/400, где х – искомое числолейкоцитов в 1мм 3 цельной крови, Л – сумма лейкоцитов в 400 маленьких квадратах, 400 – число маленьких квадратов, в которых произведен подсчет, 10- разбавление крови. Затем полученное число лейкоцитов записывают в пересчете на 1 л крови, т.е. число тысяч лейкоцитов, найденных в 1 мм 3 , умножают на 10 9 .
Оформление результатов и их оценка: Записать, сколько лейкоцитов содержится в 1 л исследуемой крови. Сравнить полученные результаты с нормой. У взрослых этот показатель составляет 6-8 тыс в 1мм 3 или (6,0 - 9,0) х10 9 .
Конец работы -
Эта тема принадлежит разделу:
Учебно-методические материалы по II модулю
Одесский национальный медицинский университет.. кафедра физиологии.. учебно методические материалы..
Если Вам нужно дополнительный материал на эту тему, или Вы не нашли то, что искали, рекомендуем воспользоваться поиском по нашей базе работ:
Что будем делать с полученным материалом:
Если этот материал оказался полезным ля Вас, Вы можете сохранить его на свою страничку в социальных сетях:
| Твитнуть |
Все темы данного раздела:
Система крови
Конкретные цели:
1. Знать состав и функции системы крови, механизмы ее регуляции на основе анализа параметров гомеостаза (объема крови, кислотно-основного равновесия, осмо
Общая характеристика системы крови. Исследование функций и Физико-химических свойств крови
Мотивационная характеристика темы.Знание состава крови и механизма поддержания ее основных констант необходимо ля понимания роли крови как внутреннй среды организма, обеспечивающей
Методика получения крови для анализа у человека
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир. Объект исследования–человек.
Проведение работы: Для получения не
Методика определения объемного соотношения форменных элементов и плазмы (гематокрита)
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, 4% раствор цитрата натрия, центрифуга, стеклянные градуированные капилляры. Объект исследования–
Методика определения наличия и количества белка в плазме крови
Для работы необходимы: плазма крови, 4% раствор цитрата натрия, рефрактометр, дистиллированная вода, таблица Рейса. Объект исследования–человек.
Методика исследования буферных свойств сыворотки крови по Фриденталю
Для работы необходимы: образцы сыворотки крови, разведенные в 10 раз; дистиллированная вода; 0,1н раствор НCl; 0,01 н раствор КОН; индикаторы - фенолфталеин, метилоранж; 4 мерных с
Методика приготовления мазка крови и изучение его под микроскопом
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, предметные стекла. Объект исследования–человек.
Физиология эритроцитов и гемоглобина
Мотивационная характеристика темы.Знание функций эритроцитов, гемоглобина и их осмотической резистентности необходимо для понимания роли крови как внутреннй среды организма, обеспе
Методика подсчета эритроцитов крови в счетной камере Горяева
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, эфир, счетная камера Горяева, смеситель (меланжер) для подсчета эритроцитов, 3% раствор натрия хлорида, микроскоп. Об
Методика вычисления цветового показателя крови
Методика определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ)
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, 5% раствор цитрата натрия, капилляр Панченкова, штатив Панченкова, часовое стекло или пробирка Видаля. Объект исследо
Методика определения осмотической устойчивости эритроцитов
Для работы необходимы: штатив с 18 пробирками, растворы хлорида натрия убывающей концентрации 0,9%, 0,85%, 0,8% и т.д. до 0,1% раствора), пробирка с дистиллированной водой, пробирк
Методика определения среднего содержания гемоголобина в одном эритроците (СГЭ)
Для работы необходимы: полученные ранее показатели уровня гемоглобина и количества эритроцитов образца анализа крови. Объект исследования–человек.
Исследование защитных свойств крови. функции лейкоцитов. Понятие про иммунитет, его виды
Мотивационная характеристика темы.Знание защитных свойств крови, функций лейкоцитов необходимо для понимания механизмов иммунологических реакций в изменяющихся условиях окружающей
Методика подсчета лейкоцитарной формулы в мазке крови
Для работы необходимы: приготовленный ранее мазок крови, окрашенный по Романовскому-Гимза, микроскоп, иммерсионное масло. Объект исследования–человек.
Виды и механизмы гемостаза. Физиология тромбоцитов
Мотивационная характеристика темы.Знание гемостатических свойств крови, функций тромбоцитов необходимо для понимания механизмов тромбообразования и поддержания крови в жидком состо
Методика графической регистрации процесса свертывания крови (тромбоэластография)
Для работы необходимы: тромбоэластограф, скарификаторы, ватные шарики, спирт, специальный капилляр. Объект исследования–человек.
Методика регистрации процесса свертывания и рекальцификации плазмы с помощью коагулографии
Для работы необходимы: коагулограф, скарификаторы, ватные шарики, спирт, специальный капилляр, 1,29% раствор СаСL, цитратная плазма Объект исследования–чело
Определение времени свертывания крови по методу фонио
Определение времени свертывания крови по методу Ли и Уайта
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, пробирка, секундомер. Объект исследования–человек.
Проведение работы:
Определение времени продолжительности кровотечения по методу Дюка
Для работы необходимы: скарификаторы, ватные шарики, спирт, пробирка, секундомер. Объект исследования–человек.
Проведение работы:
1. Здоровый мальчик 5 лет, неосторожно обращавшийся с ножом, порезал палец,
из которого течет кров. Сколько времени будет примерно длиться кровотечение?
A. Несколько секунд
Физиологические основы методов исследования групп крови
Мотивационная характеристика темы.Знание учения о группах крови необходимо для понимания принципов переливания крови и методов постановки проб совместимости перед переливанием.
Методика определения групп крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток
Стандартные сыворотки – это очищенная в фабричных условиях плазма доноров разных групп крови, не содержащая фибриногена, с высокой концентрацией антител к одному или нескольким ант
Возможные Ошибки при определении групп крови
Отсутствие агглютинации может наблюдаться в следствие:
- ошибочного соотношения исследуемой крови и стандартной сыворотки
- слабого титра стандартных сывороток
Методика определения групп крови по системе аво с помощью цоликлонов
Цоликлоны анти-А и анти-В - это специфические иммуноглобулины, т.е. антитела (агглютинины) к групповым антигенам А и В, которые образуются одноклональными В-лимфоцитами в ответ на
Мероприятия, проводимые перед переливанием крови
1. Определение групповой совместимости крови реципиента и донора
2. Опредление индивидуальной совместимости крови реципиента и донора
3. Определение совместимости крови реципиента
Практические навыки по физиологии системы крови
Мотивационная характеристика темы. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний системы крови, примененяемых с целью диагностики и лечения в клини
Исследование вариабельности частоты сердечных сокращений в покое у здоровых людей с построением кривой нормального распределения данного признака
Известно, что частота сердечных сокращений определяется автоматической активностью различных отделов проводящей системы миокрада. В нормальных условиях главным водителем ритма является синоатриальн
насосная фунция сердца. сердечный цикл, методы его исследования
Мотивационная характеристика темы.Знание структуры сердечного цикла и механизмов его фаз необходимо для понимания процессов функционирования миокрада, обеспечивающего кровоснабжени
Определение длительности сердечного цикла у человека по пульсу в покое и при физической нагрузке
Частота сердечных сокращений у человека, находящегося в состоянии физического и эмоционального покоя, колеблется в пределах 60-80 уд./мин. При физической нагрузке частота сердечных
Оценка и анализ результатов электрокардиографии
Электрокардиограмма – это графическая запись разности потенциалов кардиомиоцитов, отражающая процесс распространения возбуждения по проводящей системе к миокарду. Основные компоненты ЭКГ – интервал
Исследование нервной регуляции деятельности сердца
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции деятельности сердца необходимо для понимания процессов функционирования миокрада в условиях действия различных нервных
Влияние рефлекса Данини-Ашнера на частоту сердечных сокращений у человека
У человека при надавливании на глазные яблоки частота сердечных сокращений может снижаться. Этот эффект объясняют рефлекторным возбуждением ядер блуждающего нерва.
Для работы необ
Исследование гуморальной регуляции деятельности сердца
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции деятельности сердца необходимо для понимания процессов функционирования миокрада в условиях действия различных гуморал
системное кровообращение. Законы гемодинамики, роль сосудов в кровообращении. Исследование артериального давления
Мотивационная характеристика темы.Знание основных принципов гемодинамики необходимо для обеспечения возможных путей поддержания гомеостаза в условяих различных функциональных состо
Измерение артериального давления у человека пальпаторным методом рива-роччи
Для работы необходим сфигмоманометр. Объект исследования–человек.
Проведение работы. Накладывают на плечо манжетку так, как указан
Измерение артериального давления (ад) у человека методом короткова
Величина АД–это один из показателей, по которому можно судить о работе сердца и состоянии сосудов организма. Аускультативный метод измерения АД по Короткову основывается на выслуши
Исследование регуляции кровообращения. Регуляция тонуса сосудов
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции артериального давления необходимо для понимания процессов подережания гомеостаза в условиях действия различных нервных
Исследование изменения артериального давления и частоты сердечных сокращений у человека при физической нагрузке
Физическая нагрузка влияет на деятельность сердечнососудистой системы, увеличивая, как правило, систолическое давление и частоту сердечных сокращений (ЧСС). Изменения этих показателей зависят как
Исследование изменения артериального давления и частоты сердечных сокращений у человека при воздействии холода
Сердечно-сосудистая система реагирует на любые воздействия внешней среды, в том числе и на температурные. В понятие метеочувствительности входят и реакции сердечно-
Исследование микроциркуляции и особенностей регионального кровотока
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов микроциркуляции и особенностей регионального кровотока необходимо для понимания процессов поддержания гомеостаза в условиях дейс
Наблюдение венозного кровотока
Основная функция венозной системы–это возврат крови к сердцу, поэтому кровь по венам течет в направлении от периферии к центру, к сердцу. Этому способствуют такие факторы, как ост
Исследование лимфообращения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов функционирования лимфатической системы необходимо для понимания процессов метаболизма в тканях и динамической связи между клетка
Изучение стимулирующих влияний раздражения желудка у спинальной лягушки на работу ее лимфатического сердца
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний:
1. Куда необходимо провести катетер у животного, чтобы собрать лимфу из грудного лимфатического протока?
A.
практические навыки по физиологии системы кровообращения
Мотивационная характеристика темы.. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний системы кровообращения, примененяемых с целью диагностики и лечен
Общая характеристика системы дыхания. Анализ спирограммы
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов внешнего дыхания и анализ его показателей необходимы для понимания и оценки процесса дыхания при различных функциональных состоя
1. Исследование жизненной емкости легких с помощью спирометрии.
2. Исследование показателей внешнего дыхания с помощью спирографии.
Исследование жизненной е
Исследование внешнего дыхания. Исследование механизма вдоха и выдоха
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов вдоха и выдоха необходимо для оценки состояния органов дыхания во врачебной практике.
Цели занятия: зн
Исследование максимальной скорости вдоха и выдоха при форсированном дыхании (Пневмотахометрия)
Измерение максимальной скорости вдоха и выдоха при форсированном дыхании (пневмотахометрия) является простейшим методом диагностики нарушений проходимости бронхов и зависит как от силы дыхательной
исследование газообмена в легких
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов газообмена необходимо для понимания процессов метаболизма в тканях при различных функциональных состояниях и, в случае необходим
Определение парциального давления кислорода и углекислого газа в альвеолярном воздухе
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний:
1. Каково содержание растворенного кислорода в нормальной артериальной крови?
A. 0.9-1,4 об%
B. 1.5
Транспорт газов кровью, значение для организма
2. Роль гемоглобина и миоглобина в дыхании.
3. Кривая диссоциации оксигемоглобина. Факторы, влияющие на образование и диссоциацию оксигемоглобина.
4. Кислородная емкость крови, ме
D. Возникновению деструкции тканей
E. Ведёт к развитию гипоксии тканей
2. Показателем, отражающим положение кривой диссоциации оксигемоглобина, является…
A. РO2 при 100% на
E. Все ответы неправильные
Ответы: 1-B. 2-C. 3-D. 4-C. 5-C. 6-C. 7-C. 8-A. 9-D. 10-C.
Ситуационные задачи:
1. У больног
исследование нервной регуляции дыхания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции дыхания необходимо для понимания процессов функционирования системы дыхания в условиях действия различных нейрогенных
исследования гуморальной регуляции дыхания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции дыхания необходимо для понимания процессов функционирования системы дыхания в условиях действия различных гуморальных
E. уменьшится глубина и частота дыхания
Ответы: 1-D. 2-B. 3-A. 4-C. 5-D. 6-D. 7-C. 8-A. 9-D. 10-C.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний по программе «Крок»
1. Какое
практические навыки по физиологии системы дыхания
Мотивационная характеристика темы.. Закрепление практических навыков методов исследования системы дыхания, примененяемых с целью диагностики и лечения в клинике является необходимы
Энергетический обмен
Конкретные цели:
1. Делать выводы об интенсивности метаболизма на основе анализа энергетических затрат, характеризующих основной обмен.
2. Делать выводы о преобла
энергетический и основной обмен и методы его исследования
Мотивационная характеристика темы.Знание процессов метаболизма и методов его определения необходимо для понимания единства и уравновешенности анаболических и катаболическх процессо
Исследование состояния обмена веществ человека по анализу индекса массы тела
Избыточная масса тела–один из факторов риска для здоровья. Интенсивность этого фактора возрастает от 4% при удовлетворительной адаптации до 52% при неудовлетворительной адап
Терморегуляция
1. Анализировать температуру тела гомойотермных организмов и делать выводы о механизмах регуляции баланса между теплообразованием и теплоотдачей.
2. Анализировать состояние терморегуляции
температура тела и регуляция ее постоянства
Мотивационная характеристика темы.Знание механзмов терморегуляции необходимо для понимания процессов поддержания гомеостаза в организме человека, обеспечивающих нормальный уровень
Исследование наличия тепловых и холодовых рецепторов кожи
Терморецепторы расположены в коже глубже, чем тактильные. Холодовые раздражения воспринимаются колбами Краузе, тепловые – тельцами Руффини. Плотность их расположения: 10-13 холодовых и 1-2 тепловых
Система пищеварения
Конкретные цели:
1. Трактовать понятия системы пищеварения и механизмы регуляции ее физиологических функций – секреторной, моторной, всасывательной.
2. Делать выв
Исследование порогов вкусовой чувствительности
Различают четыре «первичных» вкусовых ощущения: сладкое, кислое, соленое, горькое. Порог вкусовой чувствительности–это минимальная концентрация исследуемого вещества, которая выз
Исследование вкусовых полей языка
Для работы необходимы: 10% раствор сахара, 10% раствор NaCl , 1% раствор лимонной кислоты, 0,5% раствор гидрохлорида хинина, глазная пипетка, стакан с водой. Объект исследовани
Исследование преваривающего действия слюны на крахмал
Для работы необходимы: 6 мл слюны человека, 1% раствор крахмала сырого и вареного, реактивы Фелинга II, водяная баня, 6 пробирок, спиртовка, стакан с водой. Объект исследования
Пищеварение в желудке. Методы исследования пищеварения в желудке
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в полости желудка необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функциональных
Оценка секреторной функции желудка по результатам анализа желудочного сока
Для работы необходимы: результаты исследования желудочного сока человека. Объект исследования–человек.
Проведение работы: Использу
Тестовые задания для самоконтроля уровня знаний
1. Больному была произведена резекция желудка с удалением пилорического отдела. Какие процессы в ЖКТ были нарушены?
A. Переход химуса в двенадцатиперстную кишку
B. Перистальт
Пищеварение в двенадцатиперстной кишке (ДПК). Роль поджелудочного сока и желчи в процессах пищеварения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в двенадцатиперстной кишке необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функци
Исследование эмульгирования жиров
За сутки у человека отделяется 1000-1500 мл желчи, одной из функций которой является эмульгирование жиров, делая водорастворимыми жирные кислоты.
Для работы необхо
Пищеварение в кишках. Физиологические основы голода и насыщения
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов пищеварения в кишках необходимо для понимания механизмов функционирования системы питания при различных функциональных состояния
Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции процессов голода и насыщения.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний:
1. У больного нарушен синтез энтерокиназы. Как
моторная деятельность желудка и кишек. Процессы всасывания
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов всасывания и моторной деятельности органов желудочно-кишечного тракта необходимо для понимания механизмов функционирования систе
Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции постоянства состава питательных веществ во внутренней среде организма.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний:
1. У
Практические навыки по физиологии системы пищеварения
Мотивационная характеристика темы. Закрепление практических навыков методов исследования функциональных состояний органов системы пищеварения, примененяемых с целью диагностики и л
Система выделения
Конкретные цели:
1. Объяснить понятия системы выделения и механизмы регуляции гомеостаза при ее участии на основе анализа констант - объема циркулирующей крови, концентрац
общая характеристика и функции системы выделения. Роль почек в процессах выделения, механизм мочеобразования
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов мочеобразования необходимо для понимания функционирования системы выделения при различных функциональных состояниях, что обеспеч
Программа практической работы на занятии
1. Рассчитать скорость фильтрации в клубочках, используя данные раздаточного материала. Сделать вывод.
2. Определить величину реабсорбции воды в нефроне, используя данные раздаточного мате
регуляция функций почек
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов регуляции функций почек необходимо для понимания процессов функционирования системы выделения различных функциональных состояния
Программа практической работы на занятии
1. Составление контура регуляции процесса мочеиспускания.
При регуляции процесса мочеиспускания отрицательная и положительная обратные связи взаимодействуют, что обеспечивает эффективное о
роль почек в поддержании гомеостаза
Мотивационная характеристика темы.Знание механизмов поддержания гомеостаза почками необходимо для понимания процессов функционирования системы выделения при различных функциональны
Программа практической работы на занятии
1. Построение контура регуляции ренин-ангиотензин-альдостероновой системы.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ УРОВНЯ знаний:
1. В эксперименте на животных раз
E. Водной нагрузке и приеме острой пищи
10. В каком отделе нефрона в основном реабсорбируется глюкоза?
A. проксимальном
B. дистальном
C. собирательных трубочках
D. петле Генле
практические навыки по физиологии системы выделения
Мотивационная характеристика темы.Знание практических навыков исследования функционального состояния органов мочевыделительной системы необходимо для понимания механизмов функциони
E. 60-100 мл
Ответы: 1-D., 2-B., 3-B., 4-D., 5-C., 6-E., 7-C., 8-D., 9-C., 10-D.
Ситуационные задачи:
1. При заболева
Физиология крови
1. Общая характеристика системы крови, состав и функции крови.
2. Понятие о гемостазе, механизмы гемостаза и механизмы его регуляции.
3. Электролиты плазмы крови, их количество. О
Потенциал действия типичных кардиомиоцитов желудочков, механизм его возникновения, графическое изображение, физиологическая роль
8. Соотношения по времени ПД и одиночного сокращения миокарда.
9. Периоды рефрактерности во время развития ПД типичных кардиомиоцитов, их значение.
10. Сопряжение возбуждения и со
Метаболизм и терморегуляция
17. Источники и пути использования в энергии в организме человека.
18. Методы определения энергозатрат человека. Дыхательный коэффициент.
19. Основной обмен и условия его определе
Пищеварение
27. Дайте определение и опишите структуру системы пищеварения.
28. Перечислите основные функции пищеварения.
29. Перечислите этапы обработки пищи в ротовой полости.
30. Н
Выделение
68. Система выделения, ее функции. Особенности почечного кровотока.
69. Органы выделения – почки, легкие, кожа, желудочно-кишечный тракт.
70. Строение и функции структурно-функцио
Рисовать схемы контуров регуляции системного кровообращения при различных физиологических состояниях организма
21. Трактовать роль особенностей регионального кровообращения и его регуляции (легочного, коронарного, мозгового, брюшного) для обеспечения приспособительных реакцій
22. Оценивать состояни