Теоретические основы бактериального исследования жкт. Бактериологическое исследование пищевода. Бактериологическое исследование желудка. Бактериологические исследования для выявления избыточного бактериального роста в кишечнике

Острые кишечные инфекции (ОКИ) широко распространены во всем мире и характеризуются фекально-оральным (алиментарным, водным) или бытовым путем распространения и первичной локализацией возбудителя в кишечнике. Это полиэтиологичные заболевания, возбудители которых принадлежат различным группам микроорганизмов (бактерии, грибы, вирусы, простейшие).

К бактериальным возбудителям ОКИ относятся представители семейств:

1.Enterobacteriaceae :

Род Shigella , представители которого вызывают антропонозную инфекцию- дизентерию.

Род Salmonella , представители которого вызывают антропонозную инфекцию - брюшной тиф и паратифы А и В и зооантропонозы - сальмонеллезы.

Род Esherichia

Диареегенные E . coli , вызывающие эшерихиозы.

Род Iersinia , вызывающие кишечные иерсиниозы и псевдотуберкулез.

Бактерии рода Klebsiella spp , Proteus spp , Entherobacter spp , Citrobacter spp- вызывающие пищевые токсикоинфекции.

2. Vibrionaceae

Род Vibrio - V . cholerae 0,1 или 0139, вызывающие холеру и условно- патогенные вибрионы, возбудители вибрионогенных диарей.

3. Camphylobacteriaceae

Род Camphylobacter (C . jejuni , C . coli и др.), вызывающие зооантропонозы - кампилобактериозы. Род Helicobacter (H . pilori , ассоциированный с язвой желудка и 12 перстной кишки).

4. Bacciillaceae.

Род Bacillus (B . cereus , вызывающий пищевые токсикоинфекции).

5. Clostridiaceae

Род Clostridium (С. botulinum , C . difficila е) - вызывающий антибиотикоиндуцированный псевдомембранозный энтероколит.

6. Staphylococceae

Род Staphylococcus (S . а ureus ), продуцирующий энтеротоксин. При попадании в организм с продуктами питания большого количества энтеротоксина развивается стафилококковый пищевой токсикоз.

Вирусы - возбудители острых кишечных инфекций- это ротавирусы, вирус Норволка, некоторые серовары аденовирусов, энтеровирусов в том числе вирус гепатита А и вирус гепатита Е.

Нормальная микрофлора ЖКТ

В пищеварительной системе отмечается своеобразное распределения микрофлоры. На протяжении ЖКТ выделяют несколько биотопов, существенно отличающихся по составу микробиоценоза, что связано с различными морфологическими, функциональными и биохимическими особенностями соответствующих отделов ЖКТ.

Пищевод. Микрофлора пищевода скудная. Проксимальный отдел контамирован бактериями, типичными для микрофлоры полости рта и глотки, в дистанных отделах можно обнаружитьStaphylococcus spp , дифтероиды,Sarcina spp, B . subtilis , грибы родаCandida .

Желудок. В желудке бактерии практически отсутствуют, их число не превышает 10 3 мл содержимого. Это обусловлено действиями соляной кислоты, лизоцима, ферментов. Большое количество бактерии выявляются в пилорической его части. Видовой состав представлен Lactobacillus spp , Bifidobacterium spp, Bacteroides spp, Streptococcus spp , дрожжеподобными грибами, Sarcina spp, Enterococcus spp, Pseudomonas spp, Bacteroides spp.

Кишечник. В двенадцатиперстной кишке количество бактерий составляет не более 10 4 - 10 5 КОЕ 1 мл содержимого. Микрофлора представлена Lactobacillus spp, Bifidobacterium spp, Bacteroides spp, Enterococcus spp. Часть их поступает с пищевыми массами, другие из верхних отделов тонкой кишки.

В верхних отделах тонкой кишки микроорганизмы определятся в небольшом количестве 10 4 КОЕ/мл. Основным механизмом, препятствующим росту бактерий в тонкой кишке, является действие желчи, ферментов, кишечная перистальтика, секреция в просвет кишки иммуноглобулинов. По мере продвижения и дистальному отделу тонкого кишечника действиe бактерицидных и бактериостатических факторов ослабевает и у входа в толстый кишечник для бактерий создаются благоприятные условия (определенный рН, температура, много питательных субстратов), что способствует их интенсивному размножению. В связи с этим и наличием большого количества продуктов распада постоянная нормальная микрофлора толстого кишечника у взрослых занимает первое место по численности (10 11 – 10 12 КОЕ / г фекалий) и многообразию (более 100 различных видов микроорганизмов постоянно)

Так как в этом биотопе создаются анаэробные условия у здорового человека в составе нормальной микрофлоры в толстом кишечнике преобладают (96-99%), анаэробные бактерии-бактероиды,C erfringens , Streptoccocus spp , Fubacterium spp , Veilonella spp, Gemella spp , Peptostreptococcus spp, Lactobacillus spp , только до 4% микрофлоры составляют аэробные факультативно- анаэробные микроорганизмы E . coli , Enterobacteriaceae spp , в небольшом количестве Staphylococcus spp, Proteus spp, Pseudomonas spp, грибы рода С andida spp , отдельные виды Treponema spp , Mycobacterium spp, Mycoplasma spp, Actinomyces spp, простейшие и вирусы.

Желчные протоки. Печень. У здоровых людей микробы в желчных путях обычно отсутствуют.

Неспецифические заболевания ЖКТ

Неспецифические заболевания ЖКТ - диарея, неспецифический колит, синдром малой сорбции, дуоденит, язвенная болезнь желудка, гастрит, гастроэнтерит, холангит, холецистит, эзофагит. Они часто ассоциируются с энтеровирусами, ротавирусами, амебиазом, балантидиозом, молочницей, кандидозом кишечника.

Микробиология гастроэнтероколита - воспаление слизистых оболочек желудка и тонкой кишки. Этиологическим фактором являются Enterobacterium spp , Staphylococcus spp, Clostridium spp, Bacillus spp, Camphylo bacterium spp , Iersi nia spp ,Vibrio spp, ротавирусы, энтеровирусы.

Микробиология гастрита - поражение слизистой оболочки желудка, сопровождающееся нарушением функций. Гастриты, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки ассоциируются с H . pilori .

Микробиология эзофагита - воспаление слизистой оболочки пищевода. Основной возбудитель C . albicans , вирусы простого герпеса, цитомегаловирусы.

Микробиология холецистита - воспаление желчного пузыря, преимущественно бактериального происхождения (E . coli , S . aureus , Enterococcus spp , Streptococcus spp, Proteus spp , дрожжеподобные грибы, смешанная флора.).

Микробиологическая диагностика. Основным методом микробиологической диагностики при ОКИ является бактериологическое исследование.

Забор материала:

Фекалии собирают в стерильную посуду соблюдая правила асептики. При естественной дефекации сбор проводят с пеленок или из горшка стерильным шпателем, вмонтированным в ватную пробку пробирки;

Фекальные массы можно забирать из прямой кишки с помощью ректальной трубки, которую вводят на 8-10см;

При профилактическом обследовании здоровых людей на тифо- паратифозное носительство, обследуемому необходимо давать за 3 часа до начала сбора материала 25-30гр сернокислой магнезии, которая является желчегонным и слабительным;

Забор материала проводят при появлении первых признаков заболевания, до начала лечения антибиотиками. Забор и первичный посев материала желательно проводить в приемном покое, в лабораторию он должен быть доставлен не позже 2-х часов после взятия, в противном случае его необходимо сохранять в холодильнике. При невозможности немедленного посева собранный материал помещают в пробирки с консервирующим раствором;

Транспортировка должна проводиться с соблюдение необходимых правил осторожности - в биксах, пеналах;

Из пищевода и желудка материал берут при эзофагоскопии и гастроскопии;

Забор содержимого тонкого отдела кишечника проводят при использовании зонда. Пробу исследуют не позже часа после ее забора;

При энтеральных эшерихиозах - это фекалии, материал розеол, моча, желчь, рвотные массы;

При парентеральных’эшерихиозах - гнойное отделяемое, моча, мокрота, кровь при септических формах;

Тифо-паротифные инфекциивыбор материала определяется фазой патогенеза:

Фаза бактериемии (1 неделя) кровь,

Разгар заболевания (2,3 неделя): кровь, пунктат костного мозга, соскоб с розеол;

Выделительно-аллергическая фаза (4 неделя): кровь (при рецидиве), фекалии, моча, желчь;

желчь отбирают в стерильные пробирки при зондировании 12 перстной кишки. При этом отдельно собирают дуоденальное содержимое, пузырную желчь и желчь из желчных протоков (партии А, В, С);

- розеолы скарифицируют, взятый материал засевают на желчный бульон;

Забор мочи, СМЖ, биоптатов костного мозга, мокроты - описано в соответствующих разделах.

Микробиологическая диагностика

Лабораторное исследование фекалий начинается с предварительного капрологического исследования, для этого необходимо:

Приготовить мазки из фекалий, окрасить их метиленовым синим для выявления лейкоцитов, что свидетельствует о поражении слизистой кишечника;

Провести микроскопический анализ нативного мазка из фекалий на яйцеглист, так как гельминтозы могут протекать с клиникой острых кишечных инфекций;

Провести микроскопический анализ на простейших (амебы, лямблии, криптоспоридии).

Бактериологическое исследование фекалий при подозрении на ОКИ

Особенности проведения 1- ого этапа бактериологического исследования при подозрении на ОКИ состоят в следующем:

Первичная микроскопия мазков из фекалии не проводится;

Учитывая полиэтиологичность ОКИ для выделения чистой культуры посев разведений фекалий делают на дифференциально-диагностические среды (Эндо, Левина, Плоскирева, висмут-сульфит агар и среды обогащения).

На 2 этапе бактериологического исследования

Отбирают выросшие лактозонегативные колонии (бесцветные). Их образуют сальмонеллы, шигеллы;

Лактозоположительные (окрашенные) колонии, которые дали эшерихии аккуратно снимают петлей и с ними ставят реакцию агглютинацию с комплексной поливалентной эшерихиозной сывороткой к различным патогенным серогруппам. Колонии, с которыми был зарегистрирован положительный результат, при реакции с соответствующей сывороткой, отсеивают для накопления на скошенный агар.

Накопленную культуру идентифицируют до рода и вида по комплексу биохимических свойств:

В случае подозрения на иерсиниоз, первичный посев проводится на среду Серова с последующим холодовым обогащение (посевы помещают в холодильник с последующим высевом на плотные питательные среды);

В случае подозрения на кампилобактериоз, первичный посев проводится на специальные для них питательные среды с добавление антибиотиков. Посевы инкубируют в анаэростатах;

При бактериологической диагностике холеры материал от больного засевают на элективную среду (1%-ная пептонная вода, щелочной агар);

Для диагностики заболеваний, вызванных C . difficile в фекалиях больных обнаруживают экзотоксин. Используют ИФА или молекулярно - генетические методы.

При подозрении на пищевую токсикоинфекцию первичный посев материала проводится на несколько определенных сред:

Посев на среду Эндо - для выделения энтеробактерий;

Посев по Щукевичу - для выделения протея;

Посев на ЖСА - для выделения S . aureus ,

Посев на кровяной агар - для выделения стрептококков;

Посев на среду Китт – Тарроци - для выделения анаэробов.

Посев на среду Сабуро – для выделения грибов.

Для микробиологической диагностики ОКИ также используется: серодиагностика - чаще проводится ретроспективно.

Иммуноиндикация - реакция иммунофлюоресценции, латекс- агглютинация, Ко-агглютинации.

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ", MOUSEOFF, FGCOLOR, "#FFFFCC",BGCOLOR, "#393939");" onMouseOut="return nd();"> Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Михайлова, Олеся Николаевна. Теоретические и практические аспекты профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят раннего постнатального периода: диссертация... кандидата ветеринарных наук: 06.02.02 / Михайлова Олеся Николаевна; [Место защиты: Кур. гос. с.-х. акад. им. И.И. Иванова].- [Курск], 2013.- 159 с.: ил. РГБ ОД, 61 14-16/47

Введение

1.0 Обзор литературы 8

1.1 Желудочно-кишечные заболевания телят раннего постнатального периода: этиология, клинические и эпизоотологические особенности 8

1.2 Профилактика и лечение желудочно-кишечных заболеваний телят 20

1.3 Применение иммуностимуляторов при желудочно-кишечных заболеваниях новорожденных телят 31

2.0 Собственные исследования 34

2.1 Материал и методы исследований 34

3.0 Результаты собственных исследований 36

3.1 Теоретическое обоснование методологии диссертационного исследования 36

3.2 Выяснение причин и особенностей течения и проявления желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят 38

3.3. Теоретическое и экспериментальное обоснование получения нового иммунометаболического препарата на основе янтарной кислоты и левамизола 44

3.3.1 Изучение влияния комплексного препарата (левамизола янтарного) на гематологические, иммунологические и биохимические показатели новорожденных телят 48

3.4 Влияние левамизола янтарного на показатели заболеваемости диареей 55

3.5 Эффективность левамизола янтарного для коррекции обменных и иммунных процессов глубокостельных коров 56

3.6 Производственное испытание эффективности левамизола янтарного для профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят 61

3.7 Эффективность комплексных препаратов янтарной кислоты для профилактики и лечения диареи новорожденных телят при пероральном применении 68

3.7.1 Теоретическое и экспериментальное обоснование возможности сочетанного применения янтарной кислоты, АСД второй фракции ийодинола 68

3.7.2 Влияние янтарной кислоты в сочетании с АСД второй фракции, в комплексе с йодинолом на гематологические, иммунологические и биохимические показатели клинически здоровых телят при оральном применении 70

3.7.3 Эффективность перорального применения состава на основе янтарной кислоты и АСД для профилактики и в комплексе с йодинолом в клинике лечения диареи новорожденных телят 73

3.7.4 Эффективность перорального применения состава на основе янтарной кислоты и АСД для профилактики и в комплексе с йодинолом при лечении диареи новорожденных телят с выраженным токсикоинфекционным синдромом 75

3.8 Результаты производственного опыта по оценке эффективности научных разработок для профилактики диарей у новорожденных телят 77

4.0 Обсуждение результатов исследований 81

5.0 Выводы 104

6.0 Практические предложения 106

7.0 Список использованной литературы 107

Приложение 143

Введение к работе

Актуальность темы. Желудочно-кишечные заболевания, проявляющиеся синдромом диареи, имеют массовый характер и причиняют большой экономический ущерб промышленному животноводству. Несмотря на большое внимание, уделяемое наукой и практикой проблеме профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят, существенного улучшения ситуации нет. Телята, переболевшие в раннем возрасте диареей в дальнейшем отстают в росте и, как правило, подвержены респираторной патологии.

Ведущей причиной массовых желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят являются инфекционные патогены, вирулентность которых повышается при пассировании через организм восприимчивых животных. При диареях новорожденных телят весьма трудно определить ведущую роль того или иного патогена. В этой связи попытки профилактировать эти заболевания с применением специфических средств не всегда имеют положительный результат. В то же время широко практикуемое применение средств химио- и антибиотикотерапии зачастую ведет к селекции лекарственно устойчивых штаммов микроорганизмов.

Устойчивость телят к диареям полностью определяется активностью колострального иммунитета, который находится в прямой зависимости от качества молозива (Мищенко В.А. с соавт.2004). Данные последних лет свидетельствует о том, что в условиях промышленного ведения животноводства в молозиве коров наблюдается резкое снижение факторов иммунной защиты, в результате чего у новорожденных телят отмечается дефицит гуморальной системы иммунитета (Воронин Е.С., Шахов А.Г.,1999). Принимая во внимание, что нарушения обменных и иммунных процессов лежат в основе клинического проявления всех патофизиологических состояний, современная концепция профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний должна включать обязательное применение иммунометаболических средств.

Все вышеизложенное определило выбор темы диссертационного исследования, посвященного вопросам поиска эффективных средств профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний с диарейным синдромом.

Цель исследований. Основной целью диссертационного исследования явилось теоретическое и экспериментальное обоснование получения и применения препаратов янтарной кислоты в системе мер профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят с диарейным синдромом.

Для реализации поставленной цели были определены следующие задачи:

Изучить особенности проявления и течения желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят;

Теоретически и экспериментально обосновать способы получения комплексных препаратов с иммунометаболической и антиинфекционной активностью;

Изучить эффективность применения препаратов янтарной кислоты для стимуляции иммунобиохимических процессов, профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят.

Определение производственной эффективности авторских подходов профилактики и лечения диарей у телят.

Научная новизна. Научно обоснованы, разработаны и запатентованы новые составы комплексных препаратов иммунометаболической направленности на основе янтарной кислоты и определена эффективность их применения для стимуляции обменных и иммунных процессов, профилактики дисбактериоза, лечения диареи у телят раннего постнатального периода.

Практическая значимость работы. В результате проведенных научных исследований практической ветеринарии предложены экономически выгодные, простые и эффективные средства и практические предложения по профилактике и лечению желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят. Результаты исследований вошли составной частью в проект временного наставления по применению левамизола янтарного, утвержденного директором Курского НИИ агропромышленного производства Россельхозакадемии и управлением ветеринарии Курской области.

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

1. Причины, особенности проявления и течения желудочно-кишечных заболеваний новорожденных телят;

2. Теоретическое и экспериментальное обоснование получения новых составов с иммунометаболической, антиинфекционной и дезинтоксикационной активностью.

3. Результаты изучения эффективности применения новых препаратов в системе мер стимуляции обменных и иммунных процессов, профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят с диарейным синдромом.

Апробация и публикация результатов исследования. Материалы диссертационного исследования доложены и обсуждены на Международной научно-практической конференции Белгородской ГСХА « Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути его решения» - Белгород, 2012; на Международной научно-практической конференции Курской ГСХА «Агропромышленный комплекс: контуры будущего» - Курск, 2012; на Международной Донской аграрной научно-практической конференции «Актуальные проблемы обеспечения ветеринарного благополучия отрасли животноводства» - Зерноград, 2012; на Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и интенсивного животноводства» Брянской ГСХА – Брянск - 2013.

По материалам, представленным к защите диссертации опубликовано 7статей, в том числе 3 в рецензированных журналах.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа изложена на 143 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 24 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований и обсуждения их результатов, выводов, предложений производству, списка использованной литературы. Список использованной литературы включает 344 источника, в том числе 122 иностранных авторов.

Профилактика и лечение желудочно-кишечных заболеваний телят

По мнению Самохина В.Т. с соавт. (2002), Шахова А.Г.(2002) Биологический комплекм «мать-плод-новорожденный» следует рассматривать как единую систему при разработке рациональных методов профилактики и борьбы с неонатальными болезнями, т.к. существует прямая зависимость между состоянием обмена веществ, уровнем естественной резистентности организма коров, внутриутробным развитием плода, состоянием здоровья и сохранности новорожденных телят. Эта точка зрения является итогом многочисленных научных исследований, проведенных в разное время Ворониным Е.С. (1981) с соавт.(1989), Девришевым Д.А.(2000), Зароза В.Г. (1983), Касича А.Ю. (1987), Немченко М.И. с соавт. (1986), Семеновым В.Г.(2002), Сидоровым М.А.(1981, 1987), Сулеймановым С.М.(1999), Урбаном В.П., Неймановым И.Л.(1984), Федоровым Ю.Щ1988), Чекишевым В.М. (1985), Шарабриным И.Г.(1974), Шишковым В.П. с соавт.(1981,1985), Шкиль Н.А.(1997) и др.

Даже нормально развитые телята имеют ряд физиологических особенностей, которые делают их особо уязвимыми к желудочно-кишечным заболеваниям. В первую очередь это физиологический иммунодефицит.

У новорожденных иммунная система развита недостаточно, им свойственны низкая функциональная активность клеточного и неполноценность гуморального звеньев иммунитета. Компенсация возрастных дефицитов иммунной системы новорожденных в постнатальный период жизни происходит за счет клеточных и гуморальных факторов молозива. При их недостатке в молозиве иммунодефицит усугубляется (Воронин Е.С., Шахов А.Г., 1999; Девришев Д.А., 2000; Терехов В.И., 2002; Федоровым Ю.Н. 1988 и др.).

По мнению абсолютного большинства исследователей устойчивость телят к диареям определяется активностью колострального иммунитета, который находится в прямой зависимости от качества молозива, являющегося единственным источником иммуноглобулинов (Мищенко В.А. с соавт., 2005; Richou R„ 1981; Salt L.J., 1985; Selman J.E., 1979).

Наряду с антителами от матери новорожденному с молозивом передаются иммунологически активные клетки-лейкоциты (Виег А. е.а., 1971 Concha С. е.а.,1980; Selman J. 1979; SulingL. 1980; Smith Y. е.а., 1977; Tough D.F.e.a.,1996).

При своевременной, не позднее 2 часов после рождения, выпойке молозива, доля гаммаглобулинов в белках плазмы крови достигает 30-50%, что существенно снижает риск заболевания диареи. И наоборот, телят у которых к суточному возрасту количество гаммаглобулинов в крови не превышает 10% заболевают и погибают почти все.

О важности своевременной выпойки молозива новорожденным наиболее показательно свидетельствуют сопоставление клинических данных регистрации заболевания диареей у телят «ночников» и «дневных». Заболеваемость и гибель телят родившихся ночью значительно превышает показатели по «дневным» телятам (Мищенко В.А. с соавт., 2005). Выпойка молозива телятам «ночникам» проводится утром, то есть спустя 5-6 и более часов.

Сразу же после отела необходимо проверить молозиво на мастит. Важнейшим фактором в профилактике неонатальных диарей является время выпойки молозивом. Лучшее время первой выпойки - это появление сосательного рефлекса у теленка (у большинства 30-40 минут после рождения). При мастите у растелившейся коровы можно использовать молозиво от других коров. Рекомендуется иметь банк замороженного молозива.

Важным фактором, оказывающим влияние на уровень колострального иммунитета, является концентрация в молозиве иммуноглобулинов (Weaver D.e.a. 2000). У высокоудойных коров концентрация иммуноглобулинов в молозиве более низкая, чем у животных с меньшим удоем. У коров с нарушенными обменными процессами рождаются телята с аналогичным метаболическим симптокомплексом. Нарушения иммунометаболического статуса у матери оказывает прямое влияние на эмбриональное развитие плода, что может стать одной из причин развития вторичных иммунодефицитов, и как еле, следствие высокой заболеваемости.

Следующей особенностью, влияющей на склонность к заболеваемости диареями является стерильность кишечника при рождении. Теленок рождается слабо защищенным и, попадая в новую среду, насыщенную различными возбудителями болезней, легко инфицируется.

Основной путь заражения новорожденных телят алиментарный, в результате контакта с так называемой «хлевной» микрофлорой, представленной ассоциацией грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов.

Условно-патогенная («хлевная») микрофлора разлагает молоко в желудке с образованием большого количества токсинов, которые раздражают слизистую кишечника.

Явление дисбактериоза отражает изменившиеся в кишечнике условия размножения молочнокислых и условно-патогенных микроорганизмов. Последнее, проникая в сычуг вытесняют мол очно-кислые микроорганизмы. Быстрое размножение условно-патогенных микроорганизмов сопровождается образованием большого количества токсических продуктов их жизнедеятельности.

Для компенсации физиологического дисбактериоза и более раннего становления колонизационной резистентности кишечника после первой дачи молозива новорожденным телятам рекомендуется назначение пробиотиков (Антипов В.А., 1981; Баженов А.Н. с соавт.,1986; Воронин Е.С. с соавт, 1994; Григорьев Г.И. с соавт.,2000; Грязнева Т.Н., 2005; Гудков А.В. с соавт., 1986; Девришев Д.А., 1988; Интизаров ММ., 1989; Карпов В.Н., 1987; Квасников Е.И. с соавт.,1975; Панин А.Н. с соавт., 1988; Perdigon G. е.а.2001; Shanahan F., 2001 и др.).

Пробиотики - биологические препараты, представляющие собой стабилизированные культуры симбионтных микроорганизмов или продукты их ферментации, обладающие антагонистической активностью по отношению к гнилостным и болезнетворным микроорганизмам, в т.ч. и к эшерихиям, в кишечнике.

Многокомпонентный состав и разностороннее фармакологическое действие позволяют применять пробиотики с высоким эффектом для профилактики и лечения колибактериоза телят, дисбактериозов, детоксикации отдельных эндогенных и экзогенных токсинов, создания неспецифической защиты кишечника, от патогенных бактерий (колонизационной резистентности кишечника). Это экологически безопасные, физиологичные препараты по фармакокинетике и фармакодинамике, технологичны для группового применения, не оказывают побочного действия, не накапливаются в органах и тканях животных, не вызывают привыкания со стороны патогенной микрофлоры (В.А. Антипов, 2001; А. Панин с соавт., 1993; Ю.Н. Проскурин, 2000; СИ. Парникова, 2002).

Раннее назначение новорожденным телятам пробиотических препаратов важно еще и потому, что нормальная микрофлора кишечника выступает в качестве первого стимулятора иммунной системы. Следует отметить, что лечебная эффективность пробиотиков при желудочно-кишечных заболеваний телят недостаточно высока. Противопоказанием к применению пробиотиков является недопустимость их сочетания с антибиотиками или другими противомикробными препаратами.

Голодная диета назначается при появлении признаков учащенной дефекации. Исключают 1-3 (по усмотрению ветеринарного специалиста) кормления молозивом (молоком), заменяя его электролитно-энергетическими растворами (в количестве 0,5 - 1,0 л) или отварами (настоями) лекарственных растений (R.J. Bywater, 1983). Для предотвращения обезвоживания и интоксикации больных телят предложено большое количество различных растворов электролитов как для выпаивания, так и для парентерального введения.

Средства химио-антибиотикотерапии остаются основной группой лекарственных веществ, применяемых при данных патологиях.

Антибактериальные препараты относятся к этиотропным средствам, которые избирательно подавляют рост микроорганизмов, что определяет их важнейшее свойство - специфичность по отношению к возбудителям инфекционных болезней телят. Наиболее важное место среди этих препаратов занимают антибиотики. Ковалев В.Ф. с соавт. (1988),. Витебский Э.Л. с соавт. (1998), Соколов В.Д. с соавт. (2000), Трошин А.Н. с соавт. (2003):

К числу высокоэффективных, антидиарейных средств относятся препараты нитрофуранового ряда. Обладая широким спектром биоактивности, нитрофураны, в отличие от антибиотиков способны повышать общую резистентность макроорганизма (Шипицын А.Г. с соавт., 1999).

В результате массового и зачастую безсистемного применения данной группы препаратов эффективность их заметно снизилась. Основной причиной этого является накапливание в природе лекарственнорезистентных штаммов условно-патогенных микроорганизмов.

Для преодоления лекарственной резистентности микроорганизмов чаще всего практикуется комбинация двух лекарственных препаратов и сочетание антибактериальной терапии с препаратами, усиливающими защитные силы организма.

Изучение влияния комплексного препарата (левамизола янтарного) на гематологические, иммунологические и биохимические показатели новорожденных телят

В данной серии опытов был использован состав препарата, включающий: 1% янтарной кислоты и 2%- левамизола. Способ получения комплексного препарата мы иллюстрируем следующим примером.

Для приготовления комплексного препарата использовали 950 мл деминерализованной воды, в которой при нагревании последовательно растворили 10,0 г янтарной кислоты и 20 г левамизола. Общий объем доводили до 1000 мл. добавлением деминерализованной воды. Полученный раствор имел рН = 4,5-4,7. После расфасовки препарата по флаконам провели стерилизацию. Стерилизация автоклавированием в режиме 1,0- 1,1 атм. в течение 30 минут не изменила физико-химических свойств препарата. Осадок не выпадал при хранении в течении 12 месяцев.

Научно-производственный опыт был проведен в СГЖ «Калининский».

В задачи исследований входило изучение влияния препарата (левамизола янтарного) на гематологические, иммунологические и биохимические показатели телят - нормотрофиков и телят - гипотрофиков.

С учетом имеющегося в нашем распоряжении клинического материала для проведения опыта были сформированы 4 группы телят. Первые две группы были сформированы из числа физиологически развитых телят. Еще в две группы отобрали телят этого же возраста, но из числа гипотрофиков.

Таким образом, проводя первую серию опытов, мы имели возможность изучить влияние препарата на организм физиологически развитых телят и животных с явными признаками иммунодефицита. Подтверждением последнему являлись данные фонового гомеостаза, отобранных для опытов телят, отображенные в таблицах 4,5,6,7.

Как и следовало ожидать, уже первые контрольные результаты исследований показали, что гематологические показатели, даже у физиологически развитых телят, находились на нижних значениях физиологической нормы для данной возрастной группы. Применение левамизола янтарного позволила активизировать обменные процессы, выразившиеся в повышении и нормализации уровня гемоглобина у телят -нормотрофиков. У телят - гипотрофиков опытной группы уровень содержания гемоглобина и количество эритроцитов, практически достигли фоновых показателей клинически здоровых сверстников. При проведении последующих исследований (спустя 2 недели) у телят из контрольных групп значимых изменений за этот период времени не произошло.

Исследованием уровня общего белка и белковых фракций в сыворотке крови телят установили, что содержание их в начале колебалось в нижних пределах физиологической нормы. Применение левамизола янтарного уже на третий день выявило тенденцию роста общего белка и у - глобулинов, которые максимального значения достигли на 7-й день, после чего наметилась тенденция плавного снижения. Тем не менее, на 14-й день контрольных исследований показатели содержания общего белка и гамма-глобулиновой фракции были достоверно более высокими, нежели у их сверстников из контрольных групп (Р 0,05). В процессе исследований отмечено также незначительное повышение уровня альбуминов, фракций а-и р-глобулинов.

Таким образом, применение левамизола янтарного способствовала улучшению гематологических показателей и белкового обмена.

Повышение уровня гамма глобулиновой фракции свидетельствовало о повышении резистентности организма.

Применение препарата позволило значительно улучшить биохимические показатели крови (таблица 7). Так, спустя 2 недели у физиологически развитых телят содержание общего кальция в сыворотке крови после составило 3,02±0,11, против 2,41±0,19 у контрольных животных (Р 0,05); а у телят - гипотрофиков, соответственно 2,28±0,10 и 1,57±0,18 (Р 0,005). Содержание неорганического фосфора также имело выраженную тенденцию роста. Так, у телят - нормотрофиков содержание неорганического фосфора увеличилось на 7 день до 2,04±0,15, на 14 день до 2,09±0,16, что на 11,3% и 12,4% было выше, чем у животных контрольной группы. Аналогичная закономерность просматривалась и в показателях содержания неорганического фосфора у телят - нормотрофиков. Нормализация кальций фосфорного обмена значительно улучшило щелочной резерв крови. Так, у телят - нормотрофиков он повысился с 29,4±2,3 до 43,7±3,1 об% С02 (на 14 день), а у телят - гипотрофиков с 14,3+2,1 об% С02 до 29,1±2,8 об% С02. Повышение и нормализация содержания кальция, фосфора и резервной щелочности крови не могло не указывать на улучшение минерального обмена веществ в целом, что имеет важное значение в вопросе повышения общей резистентности организма. Клинические наблюдения свидетельствовали о том, что животные опытных групп лучше росли и были более спокойными, нежели их сверстники из контрольных групп. Средний прирост живой массы клинически здоровых телят составил 307г, а у контрольных - 250г. В целом абсолютный прирост живой массы клинически здоровых опытных телят составил 9,2+0,3 кг, против 7,5+0,4 кг у контрольных, а у отстававших в развитии соответственно 5,0 ±0,2 кг и 2,4+0,2 кг (таблица 8).

Как известно, одним из факторов неспецифической защиты организма является фагоцитоз. При анализе результатов фагоцитарной реакции установлено, что уже на 3 день фагоцитарная активность нейтрофилов как у клинически здоровых, так и гипотрофиков на 13% и 5,8% выше, чем до введения препарата, и на 12% и 5,2% выше, по сравнению с контрольными животными.

Бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови, отражающие, в общем, гуморальные механизмы естественной резистентности, уже на 3 день после иммунизации была выше, чем у контрольных животных (таблица 9).

Динамика иммунологических показателей свидетельствует о том, что левамизол янтарный обеспечил выраженную тенденцию роста фагоцитарной активности нейтрофилов и бактерицидной активности сыворотки крови. На 14 сутки эти показатели не претерпели выраженных изменений.

Влияние янтарной кислоты в сочетании с АСД второй фракции, в комплексе с йодинолом на гематологические, иммунологические и биохимические показатели клинически здоровых телят при оральном применении

Для проведения опытов мы использовали состав на основе 1% янтарной кислоты, 4% АСД второй фракции в комплексе с йодинолом в соотношении 3:1. По принципу аналогов в СПК «Калининский» были сформированы три группы телят. Первой опытной группе (п=5) выпаивался янтарный биостимулятор, второй (п=5) янтарный биостимулятор в комплексе с йодинолом. Третья группа (п=5) была контрольной. Телятам этой группы выпаивался водный раствор йодинола(3:1). Препараты выпаивались в объеме 100 мл, один раз в сутки в течение 5 дней за 30 минут до выпойки молока.

Отбор проб крови для проведения исследований провели до, на третьи и четырнадцатые сутки после выпаивания препаратов. В таблицах - 19, 20,21 мы приводим сведения о динамике гематологических, иммунологических и биохимических исследованиях.

Результаты гематологических исследований свидетельствовали о том, что применение препаратов янтарной кислоты оказало позитивное влияние на уровень эритроцитов и насыщенность их гемоглобином. Уровень содержания гемоглобина на 3 и 14 сутки после курса применения препаратов был достоверно выше у опытных телят по отношению к их сверстникам из контрольной группы.

Показатель резервной щелочности у телят контрольной групп во все периоды исследований был ниже физиологической нормы, в то время как у животных обеих опытных групп он находился в пределах физиологических показателей. Это указывало на то, что пероральное применение препаратов янтарной кислоты обеспечило устранение метаболического ацидоза. Устранение метаболического ацидоза оказало позитивное влияние и на белковый обмен. Уровень общего белка в крови телят опытных групп находился в пределах средних физиологических показателей, в то время как у их сверстников он был чуть выше нижней границы.

В контрольные периоды исследований после курса применения препаратов у телят обеих опытных групп показатели бактерицидной и лизоцимной активности были достоверно выше, чем у особей из контрольной группы. Это свидетельствовало о позитивном влиянии препаратов янтарной кислоты на факторы естественной резистентности, что имеет важное значение в отношении устойчивости организма к эндогенной инфекции, в том числе и к заболеванию диареей.

Результаты производственного опыта по оценке эффективности научных разработок для профилактики диарей у новорожденных телят

Исходя из того, что устойчивость новорожденных телят к диареям полностью определяется активностью колострального иммунитета, который напрямую зависит от качества молозива, важная роль должна отводиться здоровью глубокостельных коров. Однако данные ретроспективных, в том числе и нами проведенных исследований, свидетельствуют о том, что у большинства коров в последние месяцы стельности развиваются глубокие патобиохимические процессы. Обменные и иммунные процессы взаимосвязаны. Это обстоятельство послужило нам основанием разработки комплексного препарата, обладающего иммунометаболической активностью. В ходе научно-производственного опыта было установлено, что применение левамизола янтарного обеспечивает эффективную коррекцию обменных и иммунных процессов у глубокостельных коров и телят. Это позитивно отразилось на показателях заболеваемости новорожденных телят диареей.

В свою очередь, оральное применение йодинол - янтарного биостимулятора оказалось достаточно эффективным подходом для купирования диарейного синдрома у новорожденных телят.

Научно-производственный опыт был проведен в СПК «Калининский» в период с января по май 2013 года. Порядок проведения научно-производственного опыта включал проведение мероприятий превентивного характера как на глубокостельных коровах, так и на новорожденных телятах.

Объектом для проведения научно- производственного опыта являлись глубокостельные коровы и новорожденные телята до 10-дневного возраста.

При проведении курса превентивной иммунометаболической терапии мы руководствовались уже апробированной схемой применения левамизола янтарного, предусматривающей трехкратное внутримышечное введение препарата глубокостельным коровам в объеме 10,0 мл с интервалом 10 дней.

При возникновении диареи у телят выпойка молозива или молока заменялась дачей йодинол - янтарного биостимулятора (100 мл) в смеси с солевым раствором с одновременным однократным введением левамизола янтарного в дозе 2,0 мл. Концентрация янтарной кислоты в препарате, применяемом для коров и телят была 1,5%.

Из числа глубокостельных коров, были сформированы две подопытные группы. Коров опытной группы (п=103) подвергли обработке левамизолом янтарным. В контрольную группу было отобрано 95 коров.

По результатам клинического наблюдения за телятами были получены следующие данные, которые представлены в таблице 24.

При клиническом наблюдении установлено, что заболевание диареей телят, полученных от коров контрольной группы в марте и апреле регистрировалось практически у всех животных. При этом диарея зачастую протекала с симптомами выраженной интоксикации.

У телят, рожденных от коров опытной группы, диарея протекала преимущественно в легкой и средней степени тяжести.

Следует отметить такую особенность. У телят, рожденных от коров, контрольной группы диарейный синдром обычно развивался на 2 реже 3 сутки. В то время как у телят, рожденных от коров опытной группы, диарея проявлялась на 5-6 сутки.

Для лечения диареи нами был использован йодинол-янтарный биостимулятор. При этом установлено, что однократное выпаивание йодинол - янтарного биостимулятора телятам с симптомами легкого течения диареи, как правило, было достаточно для ее прекращения. При средней тяжести течения диареи требовалось две, реже три выпойки данного состава с интервалом в 5-6 часов.

В клинике лечения диареи с выраженным токсическим симптомокомплексом весьма эффективным оказалось внутривенное введение 100 мл реамберина (1,5% раствор янтарной кислоты) с добавлением в его состав 50 мл 40% глюкозы. Выбор реамберина для снятия симптомов токсикоза неслучаен. Дезинтоксикационный раствор «Реамберин» содержит в своем составе 1,5 % янтарной кислоты в виде ее соли - сукцината натрия. Практическое применение «Реамберина» в медицине и ветеринарии свидетельствуют о том, что он обладает исключительно высоким терапевтическим эффектом при токсикоинфекционных заболеваниях. Однако опыт его применения свидетельствует о том, что он может оказывать и побочные действия на сердечную и дыхательную системы. Для инфузий он применяется внутривенно, капельно. Очевидно, что капельное введение препарата продуктивным животным трудно выполнить в производственных условиях.

По результатам наших наблюдений включение в состав инфузионного раствора глюкозы позволило снизить риск побочного действия реамберина на сердечно-сосудистую и дыхательную систему при медленном (через тонкую иглу) струйном методе введения. Данный состав нами был апробирован на 17 телятах. Не в одном случае побочного действия выявлено не было.

Результаты применения реамберина в сочетании с глюкозой обеспечивали благоприятный «перелом» интоксикационного синдрома. Как правило, после первого введения инфузионного состава клиническое состояние телят настолько улучшалось, что уже не вызывало опасения в отношении неблагоприятного исхода. Следует отметить, что применение других инфузионных растворов, в частности глюкозо-солевых, в клинике снятия токсического синдрома не давало столь выраженного положительного эффекта.

Роль и методы бактериологических исследований при диагностике заболеваний органов желудочно-кишечного тракта

Бактериологические исследования

Бактерии и грибы содержатся в большом количестве в кишечнике и выполняют ряд важнейших функций: витаминообразующую, защитную (за счет конкурирования с условно-патогенной и патогенной флорой), переваривающую (благодаря содержанию в них различных ферментов). Активизация в кишечнике какой-либо одной группы (гнилостной, бродильной или патогенной) приводит к изменению нормального соотношения микрофлоры – дисбактериозу. Дисбактериоз осложняет течение большинства заболеваний ЖКТ .

Лекарственный дисбактериоз (грибковый, стафилококковый, синегнойный, протейный), развивающийся при лечении антибактериальными препаратами, нередко протекает тяжело, при несвоевременной диагностике часто ведет к сепсису, шоку, иногда с летальным исходом.

Диагноз дисбактериоза ставится на основании бактериологического исследования кала, т. е. методом посева кала на питательные среды с дальнейшей идентификацией микроорганизмов.

Выявление микробной контаминации кишечника. Микробная контаминация кишечника характеризуется избыточным ростом условно-патогенных микроорганизмов (эшерихий, клебсиелл, энтерококков, лактобактерий) и подавлением роста бифидобактерий и других микроорганизмов, относящихся к защитным факторам.

Основные причины избыточного роста условно-патогенных микроорганизмов

  • перенесенный в недавнем прошлом острый гастроэнтерит или энтероколит;
  • заболевания, сопровождающиеся нарушением переваривания и всасывания пищевых продуктов в тонком кишечнике (врожденный или приобретенный дефицит лактазы, сахаразы и других ферментов гидролиза дисахаридов, целиакия (глютеновая недостаточность), ахлоргидрия, ахилия, секреторная недостаточность поджелудочной железы, недостаточность желчевыделения);
  • заболевания, сопровождающиеся нарушением моторной функции тонкого кишечника (дивертикулы, стриктуры кишечника при болезни Крона, радиационном поражении, после хирургических операций на органах брюшной полости; обструкции при опухолях тонкой кишки; дискинезии кишечника, например при заболеваниях желчевыводящих путей);
  • хронические заболевания внутренних органов, сопровождающиеся признаками иммунодефицита (ВИЧ-инфекция, сахарный диабет, инфекционные заболевания, склеродермия и др.);
  • массивная длительная терапия антибиотиками широкого спектра действия.

В результате микробной контаминации кишечника происходят структурные изменения его слизистой оболочки (уплощение ворсинок, воспалительная инфильтрация собственной пластинки), что приводит к стойкому нарушению всасывания воды и пищевых продуктов, развитию длительной, рефрактерной к лечению, диареи и других диспептических расстройств и появлению признаков мальабсорбции.

Бактериологические исследования для выявления избыточного бактериального роста в кишечнике



Выявление избыточного бактериального роста в кишечнике возможно несколькими способами, 2 из которых наиболее информативны:

  • бактериологическое исследование аспиратов тощей кишки;
  • водородный дыхательный тест.

Бактериологическое исследование аспиратов тощей кишки

При микробной контаминации позволяет выявить значительное увеличение общего числа микроорганизмов в 1 мл кишечного сока (более 100/мл), а также преобладание условно-патогенной микрофлоры. Для проведения исследования используют длинный двухметровый полиэтиленовый зонд, вводимый через эндоскоп с биопсийным каналом на глубину около 35 см далее привратника.

Водородный дыхательный тест

Относится к группе многочисленных непрямых методов определения бактериальной колонизации тонкого кишечника. Он основан на способности большинства бактерий к ферментативному расщеплению углеводов, в ходе которого образуется водород, который после всасывания в кровь выводится из организма при дыхании.

Исследование проводится утром натощак. Вначале получают исходный образец выдыхаемого воздуха, для этого пациент делает глубокий вдох и максимальный выдох в модифицированную трубку Холдейна–Пристли. В конце выдоха 30 мл воздуха забирают в пластиковый шприц. Затем больной принимает внутрь 50 г лактулозы (или глюкозы). В течение 3 ч каждые 20 мин описанным способом собирают образцы выдыхаемого воздуха (по 30 мл). Все полученные образцы анализируют на водородном анализаторе.

В норме количество водорода в выдыхаемом воздухе возрастает умеренно, причем пик концентрации водорода наступает через 2 ч и более от начала исследования. При избыточном бактериальном росте в тонкой кишке пик концентрации Н 2 (более 20 р/мин) достигается обычно в пределах первого часа. Водородный дыхательный тест достаточно прост и безопасен, хотя его чувствительность ниже, чем бактериологического исследования аспирата тощей кишки.

Микрогельминтологические методы используют для обнаружения яиц или личинок гельминтов. Для исследования готовят нативные мазки или фиксированные окрашенные препараты.

При исследовании на энтеробиоз применяют методы соскоба с перианальных складок деревянным шпателем или ватным тампоном. Из соскобов приготовляют препараты, которые рассматривают под микроскопом.

Для контроля лечения в лабораторию направляют всю порцию испражнений в дни приема противоглистного средства.

Рентгенологические методы исследования

Рентгенологический метод исследования кишечника дает представление о расположении различных отделов кишечника, их форме, состоянии моторно-эвакуаторной функции (тонус и перистальтика), позволяет выявить воспалительные явления в слизистой оболочке кишечника, диагностировать расширения или сужения, определить изменения рельефа слизистой оболочки и оценить двигательную активность кишечника.

Основные методы:

  1. обзорная рентгенограмма брюшной полости;
  2. искусственное контрастирование;
  3. чреззондовое ретроградное контрастирование тонкой кишки;
  4. ирригоскопия;
  5. двойное контрастирование толстой кишки.

Обзорная рентгенограмма брюшной полости в вертикальном положении пациента

Наиболее информативна при наличии симптомов “острого живота ”:

  • при динамической или механической непроходимости кишечника (горизонтальные уровни жидкости в брюшной полости);
  • при перфорации желудка или кишечника (скопление газа под куполом диафрагмы);
  • при остром панкреатите (сегментарное скопление газа в тощей кишке и симптом “дежурной петли”).

Искусственное контрастирование пищевода, желудка и кишечника путем приема внутрь водной взвеси бария сульфата (“контрастный завтрак”)

Является наиболее распространенным способом рентгенологического исследования этих органов. Этот метод позволяет изучить строение пищеварительного канала практически на всем его протяжении, хотя наиболее ценная информация может быть получена при исследовании пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки.

Петли тонкой кишки заполняются контрастным веществом в течение 3–5 ч, слепая и восходящая ободочная кишка – 6–9 ч, а вся толстая кишка – через 24 ч после приема бария внутрь. С помощью перорального приема контрастного вещества невозможно добиться “тугого” наполнения тонкой и толстой кишки, поэтому можно изучить только рельеф слизистой оболочки и моторную функцию кишечника, диагностировать различные дискинезии тонкой кишки, острый энтерит, механическую и динамическую непроходимость тонкого кишечника, болезнь Крона.

Чреззондовое введение бариевой взвеси в тощую кишку или ретроградно в подвздошную кишку

Более информативно и проводится в специализированных гастроэнтерологических клиниках. При таком способе исследования обнаруживаются неравномерное, прерывистое сужение кишки, деформация ее контуров, ригидность стенки, глубокие язвы , стриктуры, свищи, ограниченная подвижность кишечной стенки, а также зернистость рельефа слизистой по типу “булыжной мостовой”.

Ирригоскопия

Является одним из основных способов диагностики воспалительных процессов и нарушений функции кишечника, пороков развития кишечника, злокачественных новообразований и заключается в ретроградном введении контрастного вещества через прямую кишку с помощью аппарата Боброва. Это позволяет добиться тугого наполнения толстой кишки и подробно изучить положение, форму, размеры и особенности ее контура. После дефекации и опорожнения толстой кишки в условиях малого наполнения органа изучают рельеф и мелкие патологические изменения слизистой оболочки.

Для лучшего контрастирования в пищевод, желудок или толстый кишечник дополнительно вводят газ (пневмография), а также сочетают эту методику с введением газа (закиси азота, углекислого газа) вокруг исследуемого органа (париетография).

Перед ирригоскопией необходимо провести пальцевое исследование прямой кишки и ректороманоскопию. Ирригоскопию назначают не раньше чем через 48–72 ч после ректороманоскопии.

Подготовка пациента к ирригоскопии:

  • исключить из питания газообразующие продукты (овощи, фрукты, молочные, дрожжевые продукты, черный хлеб, фруктовые соки) и обеспечить обильное питье (до 2 л в сутки) за 2–3 дня до исследования (для профилактики метеоризма и получения достоверного результата);
  • принять слабительные средства: 20–30 г магния сульфата, 2–3 таб. бисакодила или 30–60 мл касторового масла в 12.00–13.00 дня накануне исследования (обеспечивается тщательное очищение верхних отделов толстой кишки). Если у пациента понос – касторовое масло противопоказано;
  • пациенту разрешен завтрак, обед и ужин вечером накануне исследования (образовавшиеся фекалии будут выведены утром накануне исследования с помощью очистительной клизмы);
  • сделать по 2 очистительные клизмы – вечером накануне исследования и утром (не позднее, чем за 2 ч до исследования), с интервалом в 1 ч (обеспечивается очищение нижнего отдела толстой кишки);
  • проводить пациента в рентгенологический кабинет к назначенному времени.

Выполнение процедуры:

  • с помощью клизмы вводят взвесь бария сульфата (36–37 о С) до 1,5 л, приготовленную в рентгенкабинете;
  • проводят серию снимков;
  • предупреждают пациента об изменении цвета кала и трудном опорожнении кишечника.

Метод двойного контрастирования

Раздувание воздухом толстого кишечника после введения в него небольшого количества бария – также используют при исследовании толстого кишечника.

Эндоскопические методы исследования кишечника

Колоноскопия

В последние годы в связи с использованием специальных гибких эндоскопов на волоконной оптике колоноскопия стала одним из важнейших диагностических методов.

Наряду с рентгенологическим исследованием эндоскопия в настоящее время рассматривается как основной метод диагностики заболеваний желудка и кишечника на самых ранних стадиях их развития.

Колоноскопию применяют для диагностики следующих заболеваний:

  • рак толстой кишки;
  • неспецифический язвенный колит;
  • болезнь Крона с возможным поражением толстой кишки;
  • полипы толстой кишки с возможной малигнизацией;
  • кишечное кровотечение неустановленной этиологии.

Среди всех известных инструментальных методов исследования только при эндоскопии можно детально изучить самые мельчайшие изменения слизистой оболочки, распознать источники кровотечений, осуществлять динамическое наблюдение за течением патологических процессов. Кроме того, с помощью эндоскопии можно проводить различные хирургические и терапевтические манипуляции непосредственно под зрительным контролем.

Метод колоноскопии достаточно безопасен, но его проведение требует специальных навыков из-за анатомических особенностей толстой кишки, имеющей ряд естественных изгибов и физиологических сфинктеров. Перед колоноскопией целесообразно провести ректороманоскопию и пальцевое исследование прямой кишки.

Результаты колоноскопии в значительной мере зависят от качества подготовки пациента к исследованию.

Подготовка пациента к плановой колоноскопии:

  • объяснить пациенту цель и ход предстоящего исследования и получить его согласие на процедуру (объяснить пациенту, что во время процедуры все интимные области будут прикрыты);
  • за 3 дня до исследования рекомендуется бесшлаковая диета № 4 (предупреждение метеоризма и обеспечение достоверного результата исследования);
  • пациент принимает раствор сульфата магния 25% 60 мл в 12.00–13.00 дня накануне исследования. Разрешен завтрак, обед и ужин вечером накануне исследования;
  • вечером накануне исследования делают несколько очистительных клизм (до “чистой воды”);
  • делают очистительную клизму утром, за 2 ч до исследования (клизма, сделанная более чем за 2 ч до исследования, не обеспечивает необходимого очищения слизистой кишки к моменту исследования; клизма, сделанная менее чем за 2 ч до исследования, изменяет состояние слизистой оболочки);
  • провести премедикацию по назначению врача за 20–30 мин до исследования;
  • проводить пациента в эндоскопический кабинет.

Исследование проводит врач в положении пациента лежа на левом боку. После исследования пациенту необходимо обеспечить наблюдение и покой.

При необходимости во время колоноскопии может быть проведена прицельная биопсия слизистой оболочки толстого кишечника.

Ректороманоскопия

Посредством ректороманоскопии можно обнаружить патологические изменения слизистой оболочки (злокачественные и доброкачественные новообразования, воспалительные процессы, изъязвления, геморрой, фистулы). При исследовании можно получить мазки и соскобы со слизистой оболочки для бактериологического и цитологического исследования, проводить биопсию, некоторые терапевтические и хирургические манипуляции.

Подготовка пациента к исследованию:

​Исследование проводит врач в положении пациента на спине с приподнятыми и раздвинутыми нижними конечностями (при использовании гибкого ректоскопа) или коленно-локтевом положении (при использовании жесткого ректоскопа). Ректоскоп вводят на глубину 25–30 см.

После исследования пациенту необходимо обеспечить наблюдение и покой.

Лапароскопия

Лапароскопия – это метод визуального исследования брюшной полости через эндоскоп (лапароскоп), вводимый через брюшную стенку. Осмотр брюшной полости при необходимости сочетается с прицельной биопсией печени и иногда поджелудочной железы.

Лапароскопию проводят для срочного установления диагноза и экстренного хирургического вмешательства (например, перитонит или асцит неясного происхождения, подозрение на мезентериальный тромбоз и инфаркт кишечника), а также для проведения эндоскопических операций на органах брюшной полости.

Лапароскопия позволяет определить размеры некоторых органов брюшной полости, оценить характер их поверхности, цвет серозной оболочки, наличие очаговых поверхностных образований и т. п.

Поскольку лапароскопия является инвазивным методом, она проводится только в условиях хирургического стационара с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Противопоказания к проведению лапароскопии:

  • сердечная и тяжелая дыхательная недостаточность;
  • острый инфаркт миокарда и нестабильная стенокардия;
  • геморрагические диатезы, выраженная анемия и т. д.

ОСНОВНЫЕ ФУНКЦИИ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНОГО ТРАКТА

Нормальная микрофлора (нормофлора) желудочно-кишечного тракта является необходимым условием жизнедеятельности организма. Микрофлора ЖКТ в современном понимании рассматривается как микробиом человека...

Нормофлора (микрофлора в нормальном состоянии) или Нормальное состояние микрофлоры (эубиоз ) - это качественное и количественное соотношение разнообразных популяций микробов отдельных органов и систем, поддерживающее биохимическое, метаболическое и иммунологическое равновесие, необходимое для сохранения здоровья человека. Важнейшей функцией микрофлоры является ее участие в формировании резистентности организма различным заболеваниям и обеспечение предотвращения колонизации организма человека посторонними микроорганизмами.

ЖКТ представляет собой одну из наиболее сложных микроэкологических сред организма человека, в которой на суммарной площади слизистой оболочки, составляющей около 400 м 2 , имеется исключительно высокая и разнообразная (свыше 1000 видов гетерогенных бактерий, вирусов, архей и грибов - ред. ) плотность микробной обсемененности, в которой очень тонко сбалансировано взаимодействие между защитными системами макроорганизма и микробными ассоциациями. Как полагают, бактерии составляют от 35 до 50% объема содержимого ободочной кишки человека, а их совокупная биомасса в ЖКТ приближается к 1,5 кг. Однако бактерии неравномерно распределены в ЖКТ. Если в желудке плотность микробной колонизации невелика и составляет всего около 10 3 -10 4 КОЕ/мл, а в подвздошной кишке — 10 7 -10 8 КОЕ/мл, то уже в области илеоцекального клапана в ободочной кишке градиент плотности бактерий достигает 10 11 -10 12 КОЕ/мл. Несмотря на столь обширное разнообразие видов бактерий, обитающих в ЖКТ, большинство могут идентифицироваться только молекулярно-генетически.

Также в любом микробиоценозе , в том числе кишечном, всегда имеются постоянно обитающие виды микроорганизмов - 90% , относящиеся к т.н. облигатной микрофлоре (синонимы: главная, автохтонная, индигенная, резидентная, обязательная микрофлора), которой отведена ведущая роль в поддержании симбиотических отношений между макроорганизмом и его микробиотой, а также в регуляции межмикробных отношений, а также существуют добавочные (сопутствующая или факультативная микрофлора) - около 10% и транзиторные (случайные виды, аллохтонная, остаточная микрофлора) - 0,01%.

Основными типами кишечной микробиоты являются Firmicutes, Bacteriodetes, Actinobacteria, Proteobacteria, Fusobacteria, Verrucomicrobia, Tenericutes и Lentisphaerae.

Среди бактерий-комменсалов, культивированных из ЖКТ, более 99,9% являются облигатными анаэробами, из которых доминирующими являются роды : Bacteroides, Bifidobacterium, Eubacterium, Lactobacillus, Clostridium, Faecalibacterium , Fusobacterium , Peptococcus , Peptostreptococcus , Ruminococcus , Streptococcus , Escherichia и Veillonella . Состав обнаруживаемых бактерий в различных отделах ЖКТ весьма вариабелен.

Увеличение плотности микроорганизмов и биологического разнообразия видов наблюдается вдоль желудочно-кишечного тракта в каудально-цервикальном направлении. Различия в составе кишечника также наблюдаются между просветом кишечника и поверхностью слизистой оболочки . Bacteroides, Bifidobacterium, Streptococcus, Enterococcus, Clostridium, Lactobacillus и Ruminococcus являются преобладающими родами в просвете кишечника, в то время как Clostridium, Lactobacillus, Enterococcus и Akkermansia являются преобладающими на поверхности, связанной со слизистой оболочкой , - т.е. это и микробиота , соответственно (или по другому - просветная и мукозная). Микробиота, связанная со слизистой оболочкой, играет очень важную роль в поддержании гомеостаза, учитывая ее близость к кишечному эпителию и основной иммунной системе слизистой оболочки [ 3 ]. Эта микробиота может играть важную роль в поддержании клеточного гомеостаза хозяина или в запуске механизмов воспаления.

После установления этого состава микробиота кишечника остается стабильной на протяжении всей взрослой жизни. Наблюдаются некоторые различия между микробиотой кишечника пожилых и молодых людей , в первую очередь касающиеся преобладания родов Bacteroides и Clostridium у пожилых и типа Firmicutes у молодых людей . Были предложены три варианта кишечной микробиоты человека, классифицированные как энтеротипы на основе вариации уровней одного из трех родов : Bacteroides (энтеротип 1), Prevotella (энтеротип 2) и Ruminococcus (энтеротип 3). Эти три варианта, по-видимому, не зависят от индекса массы тела, возраста, пола или национальности [, ].

В зависимости от частоты и постоянства обнаружения бактерий, вся микрофлора подразделяется на три группы (табл. 1).

Таблица 1. Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта.

Тип микрофлоры

Основные представители

Постоянная (индигенная, резистентная)

Облигатная (главная) (90%)

Бактероиды, бифидобактерии

Факультативная (сопутствующая) (~10%)

Лактобактерии, эшерихии, энтерококки, клостридии*

Случайная (транзиторная)

Остаточная (<1%)

Клебсиеллы, протей, стафилококки, цитробактер, дрожжи

Однако, такое деление крайне условно . Непосредственно в толстой кишке человека, в различном количестве присутствуют бактерии родов Actinomyces, Сitrobacter, Сorynebacterium, Peptococcus, Veillonella, Аcidominococcus, Аnaerovibrio, Вutyrovibrio, Acetovibrio, Campylobacter, Disulfomonas, Roseburia, Ruminococcus, Selenomonas, Spirochetes, Succinomonas, Wolinella. Помимо указанных групп микроорганизмов можно обнаружить также представителей и других анаэробных бактерий (Gemiger, Anaerobiospirillum, Metanobrevibacter, Megasphaera, Bilophila), различных представителей непатогенных простейших родов Chilomastix, Endolimax, Entamoeba, Enteromonas) и более десяти кишечных вирусов (более 50% здоровых людей имеют одни и те же 75 видов бактерий, и более 90% бактерий толстой кишки принадлежат к типам Bacteroidetes и Firmicutes - Qin, J.; et al . A human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing. Nature. 2010 , 464 , 59-65.).

Как было отмечено выше, деление микроорганизмов ЖКТ на группы "постоянства и важности" весьма условно. Наука не стоит на месте и с учетом появления новых культурально-независимых методов идентификации микробиоты (секвенирование ДНК, флуоресцентная гибридизация in situ (FISH ), использование технологии Illumina и др.), и проведенной в связи с этим переклассификацией ряда микроорганизмов, взгляд на состав и роль здоровой кишечной микробиоты человека заметно поменялся. Как выяснилось, состав микробиома ЖКТ зависит от человека принадлежности. Появилось и новое представление о доминирующих видах - появилось уточненное филогенетическое древо микробиоты желудочно-кишечного тракта человека (об этом и не только см. в разделах "" & " ".

Между колониями микроорганизмов и кишечной стенкой имеется тесная взаимосвязь, что позволяет их объединять в единый микробно-тканевой комплекс , который образуют микроколонии бактерий и продуцируемые ими метаболиты, слизь (муцин), эпителиальные клетки слизистой оболочки и их гликокаликс, а также клетки стромы слизистой оболочки (фибробласты, лейкоциты, лимфоциты, нейроэндокринные клетки, клетки микроциркуляторного русла и др.). Необходимо помнить о существовании еще одной популяционной части микрофлоры - полостной (или как было указано выше - просветной ), которая является более изменчивой и зависит от скорости поступления пищевых субстратов по пищеварительному каналу, в частности пищевых волокон, которые являются питательным субстратом и играют роль матрицы, на которой фиксируются и образуют колонии кишечные бактерии. Полостная (просветная) флора доминирует в фекальной микрофлоре, что заставляет с особой осторожностью оценивать изменения в различных микробных популяциях, выявляемых при бактериологическом исследовании.

В желудке микрофлоры содержится мало, значительно больше ее в тонком отделе кишечника и особенно много в толстой кишке. Стоит отметить, что всасывание жирорастворимых веществ, наиважнейших витаминов и микроэлементов происходит преимущественно в тощей кишке. Поэтому систематическое включение в рацион и пробиотических продуктов и биодобавок, которые модулируют кишечную микрофлору (микробиоту), регулирующую процессы кишечного всасывания, становится очень эффективным инструментом в профилактике и лечении алиментарных заболеваний.

Кишечное всасывание — это процесс поступление различных соединений через слой клеток в кровь и лимфу, в результате чего организм получает все необходимые ему вещества.

Наиболее интенсивное всасывание происходит в тонкой кишке. Благодаря тому, что в каждую кишечную ворсинку проникают мелкие артерии разветвляющиеся на капилляры, всасываемые питательные вещества легко проникают в жидкие среды организма. Глюкоза и расщепленные до аминокислот белки всасываются в кровь посредственно. Кровь, несущая глюкозу и аминокислоты, направляется к печени, где происходит отложение углеводов. Жирные кислоты и глицерин — продукт переработки жиров под воздействием желчи — всасываются в лимфу и уже оттуда попадают в кровеносную систему.

На рисунке слева (схема строения ворсинки тонкого кишечника): 1 - цилиндрический эпителий, 2 - центральный лимфатический сосуд, 3 - каппилярная сеть, 4 - слизистая оболочка, 5 - подслизистая оболочка, 6 - мышечная пластинка слизистой оболочки, 7 - кишечная железа, 8 - лимфатический канал.

Одно из значений микрофлоры толстого кишечника заключается в том, что она участвует в конечном разложении остатков непереваренной пищи. В толстом кишечнике пищеварение завершается гидролизом не переварившихся остатков пищи. Во время гидролиза в толстом кишечнике участвуют ферменты, которые поступают из тонкой кишки, и ферменты кишечных бактерий. Происходит всасывание воды, минеральных солей (электролитов), расщепление растительной клетчатки, формирование каловых масс.

Микрофлора играет значительную (!) роль в перистальтике, секреции, всасывании и клеточном составе кишечника. Микрофлора участвует в разложении ферментов и других биологически активных веществ. Нормальная микрофлора обеспечивает колонизационную резистентность - защиту слизистой кишечника от болезнетворных бактерий, подавляя патогенные микроорганизмы и предупреждая инифицирование организма. Ферменты бактерий расщепляют , непереваренные в тонкой кишке. Кишечная флора синтезирует витамин К и витамины группы В , ряд незаменимых аминокислот и ферменты необходимые организму. С участием микрофлоры в организме происходит обмен белков, жиров, углеродов, желчных и жирных кислот, холестерина , инактивируются проканцерогены (вещества, способные вызывать рак), утилизируются избытки пищи и формируются каловые массы. Роль нормофлоры чрезвычайно важна для организма хозяина, именно поэтому ее нарушение (дисбактериоз ) и развитие дисбиоза в целом, приводит к серьезным заболеваниям метаболического и иммунологического характера.

Состав микроорганизмов в определённых отделах кишечника зависит от многих факторов: образ жизни, питание, вирусные и бактериальные инфекции, а также медикаментозное лечение, особенно приём антибиотиков. Многие заболевания ЖКТ, включая воспалительные, также могут нарушать экосистему кишечника. Результатом этого дисбаланса являются часто встречающиеся пищеварительные проблемы: вздутие, диспепсия, запор или диарея и т.д.

Подробнее о роли кишечного микробиома в сохранении здоровья ЖКТ см. в статье: (см. в т.ч. ссылки внизу даного раздела ).

На рисунке: Пространственное распределение и концентрация бактерий вдоль желудочно-кишечного тракта человека (усредненнные данные ).

Кишечная микрофлора (кишечный микробиом) представляет собой необычайно сложную экосистему. У одного индивида насчитывается по меньшей мере 17 семейств бактерий, 50 родов, 400-500 видов и неопределённое число подвидов. Микрофлора кишечника подразделяется на облигатную (микроорганизмы, постоянно входящие в состав нормальной флоры и играющие важную роль в метаболизме и противоинфекционной защите) и факультативную (микроорганизмы, часто встречающиеся у здоровых людей, но являющиеся условно-патогенными, т.е. способными вызывать заболевания при снижении резистентности макроорганизма). Доминирующими представителями облигатной микрофлоры являются бифидобактерии .

В таблице 1 указаны наиболее известные функции кишечной микрофлоры (микробиоты), в то время как ее функционал намного шире и еще изучается

Таблица 1. Основные функции кишечной микробиоты

Основные функции

Описание

Пищеварение

Защитные функции

Синтез колоноцитами иммуноглобулина А и интерферонов, фагоцитарная активность моноцитов, полиферация плазматических клеток, формирование колонизационной резистентности кишечника, стимуляция развития лимфоидного аппарата кишки у новорожденных и пр.

Синтетическая функция

Группы К (участвует в синтезе факторов свертывания крови);

В 1 (катализирует реакцию декарбоксилирования кетокислот, является переносчиком альдегидных групп);

В 2 (переносчик электронов с НАДН);

В 3 (перенос электронов к О 2);

В 5 (предшественник коэнзима А, участвует в обмене липидов);

В 6 (переносчик аминогрупп в реакциях с участием аминокислот);

В 12 (участие в синтезе дезоксирибозы и нуклеотидов);

Дезинтоксикационная функция

в т.ч. нейтрализация некоторых видов лекарств и ксенобиотиков: ацетаминофена, азотосодержащих веществ, билирубина, холестерина и пр.

Регуляторная

функция

Регуляция иммунной, эндокринной и нервной систем (последней - через так называемую «gut-brain-axis » -

Сложно переоценить важность микрофлоры для организма. Благодаря достижениям современной науки известно, что нормальная микрофлора кишечника принимает участие в расщеплении белков, жиров и углеводов, создает условия для оптимального протекания процессов пищеварения и всасывания в кишечнике, принимает участие в созревании клеток иммунной системы, что обеспечивает усиление защитных свойств организма и т.д. Двумя главнейшими функциями нормальной микрофлоры являются: барьерная от патогенных агентов и стимуляция ответной иммунной реакции:

БАРЬЕРНОЕ ДЕЙСТВИЕ. Кишечная микрофлора оказывает подавляющее действие на размножение болезнетворных бактерий и таким образом предотвращает патогенные инфекции.

Процесс прикрепления ия включает в себя сложные механизмы. Бактерии кишечной микрофлоры подавляют или уменьшают прилипание патогенных агентов путём конкурентного исключения.

К примеру, бактерии пристеночной (мукозной) микрофлоры занимают определённые рецепторы на поверхности эпителиальных клеток. Патогенные бактерии , которые могли привязаться к тем же рецепторам, устраняются из кишечника. Таким образом, кишечные бактерии препятствуют проникновению в слизистую оболочку патогенных и условно-патогенных микробов (в частности, пропионовокислые бактерии P. freudenreichii имеют довольно хорошие адгезивные свойства и прикрепляются к клеткам кишечника очень надежно, создавая упомянутый защитный барьер. Также, бактерии постоянной микрофлоры помогают поддерживать кишечную перистальтику и целостность слизистой кишечника. Так, б актерии - комменсалы толстой кишки в ходе катаболизма неперевариваемых в тонкой кишке углеводов (т.н. пищевых волокон ) образуют короткоцепочечные жирные кислоты (SCFA, short-chain fatty acids ), такие как ацетат, пропионат и бутират, которые поддерживают барьерные функции муцинового слоя слизи (повышают продукцию муцинов и защитную функцию эпителия).

ИММУННАЯ СИСТЕМА КИШЕЧНИКА. В кишечнике человека сосредоточено более 70 % иммунных клеток. Главной функцией иммунной системы кишечника является защита от проникновения бактерий в кровь. Вторая функция - устранение патогенов (болезнетворных бактерий). Это обеспечивают два механизма: врождённый (наследуется ребенком от матери, люди с рождения имеют в крови антитела) и приобретённый иммунитет (появляется после попадания в кровь чужеродных белков, например, после перенесения инфекционного заболевания).

При контакте с патогенами происходит стимуляция иммунной защиты организма. При взаимодействии с Toll-подобными рецепторами запускается синтез различного типа цитокинов. Микрофлора кишечника воздействуют на специфические скопления лимфоидной ткани. Благодаря этому происходит стимуляция клеточного и гуморального иммунного ответа. Клетки иммунной системы кишечника активно вырабатывают секреторный иммунолобулин А (LgA) - белок, который участвует в обеспечении местного иммунитета и является важнейшим маркером иммунного ответа.

АНТИБИОТИКОПОДОБНЫЕ ВЕЩЕСТВА. Также, микрофлора кишечника вырабатывает множество антимикробных веществ, которые угнетают размножение и рост патогенных бактерий. При дисбиотических нарушениях в кишечнике наблюдается не только избыточный рост патогенных микробов, но и общее снижение иммунной защиты организма. Нормальная микрофлора кишечника играет особенно важную роль в жизни организма новорожденных и детей.

Благодаря продукции лизоцима, перекиси водорода, молочной, уксусной, пропионовой, масляной и ряда других органических кислот и метаболитов, снижающих кислотность (pH) среды бактерии нормальной микрофлоры эффективно борются с патогенами. В этой конкурентной борьбе микроорганизмов за выживание антибиотикоподобные вещества типа бактериоцинов и микроцинов занимают ведущее место. Ниже на рисунке Слева: Колония ацидофильной палочки (х 1100), Справа: Разрушение Shigella flexneri (а) (Шигелла Флекснера — вид бактерий, возбудителей дизентерии) под действием бактериоцинпродуцируюших клеток ацидофильной палочки (х 60000)


Стоит особо отметить, что в кишечнике практически все микроорганизмы имеют особую форму сосуществования, которая называется биопленкой. Биоплёнка - это сообщество (колония) микроорганизмов, расположенных на какой-либо поверхности, клетки которых прикреплены друг к другу. Обычно клетки погружены в выделяемое ими внеклеточное полимерное вещество - слизь. Именно биопленка выполняет основную барьерную функцию от проникновения патогенов в кровь, путем исключения возможности их проникновения к эпителиальным клеткам.

О биопленке см. подробнее:

ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ СОСТАВА МИКРОФЛОРЫ ЖКТ

История изучения состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) началась в 1681 г., когда голландский исследователь Антони Ван Левенгук впервые сообщил о своих наблюдениях относительно бактерий и других микроорганизмов, обнаруженных в человеческих фекалиях, и выдвинул гипотезу о совместном существовании различных видов бактерий в желудочно-кишечном тракте.

В 1850 году Луи Пастер развил концепцию о функциональной роли бактерий в ферментационном процессе, а немец-кий врач Роберт Кох продолжил исследования в данном направлении и создал методику выделения чистых культур, позволяющую идентифицировать специфичные бактериальные штаммы, что необходимо для разграничения болезнетворных и полезных микроорганизмов.

В 1886 г. один из основоположников учения о кишечных инфекциях F. Esherich впервые описал кишечную палочку (Bacterium coli communae). Илья Ильич Мечников в 1888 году, работая в Институте Луи Пастера, утверждал, что в кишечнике человека обитает комплекс микроорганизмов, которые оказывают на организм «аутоинтоксикационный эффект», полагая, что введение в ЖКТ «здравословных» бактерий способно модифицировать действие кишечной микрофлоры и противодействовать интоксикации. Практическим воплощением идей Меч-ни-кова стало применение ацидофильных лактобацилл с терапевтическими целями, начатое в США в 1920-1922 годах. Отечественные исследователи приступили к изу-чению этого вопроса только в 50-х годах XX века.

В 1955 г. Перетц Л.Г. показал, что кишечная палочка здоровых людей является одним из основных представителей нормальной микрофлоры и играет положительную роль благодаря сильным антагонистическим свойствам по отношению к патогенным микробам. Начатые более 300 лет назад исследования состава кишечного микробиоценоза , его нормальной и патологической физиологии и разработка способов положительного влияния на кишечную микрофлору продолжаются и в настоящее время.

ЧЕЛОВЕК, КАК СРЕДА ОБИТАНИЯ БАКТЕРИЙ

Основными биотопами являются: желудочно-кишечный тракт (ротовая полость, желудок, тонкая кишка, толстая кишка), кожа, дыхательные пути, урогенитальная система. Но основной интерес для нас здесь представляют органы пищеварительной системы, т.к. основная масса разнообразных микроорганизмов обитает именно там.

Микрофлора ЖКТ является наиболее представительной, масса киишечной микрофлоры у взрослого человека составляет более 2,5 кг, численностью - до 10 14 КОЕ/г. Ранее считалось, что в состав микробиоценоза ЖКТ входят 17 семейств, 45 родов, более 500 видов микроорганизмов (последние данные - около 1500 видов) постоянно корректируются .

С учетом новых данных, полученных при исследовании микрофлоры различных биотопов ЖКТ с помощью молекулярно-генетических методов и метода газожидкостной хромато-масс-спектрометрии общий геном бактерий ЖКТ насчитывает 400 тыс. генов, что в 12 раз превышает размер генома человека.

Подвергнута анализу на гомологию секвенированных генов 16S pРНК пристеночная (мукозная) микрофлора 400 различных отделов ЖКТ, полученная при эндоскопическом исследовании различных отделов кишечника добровольцев.

В результате исследования показано, что пристеночная и просветная микрофлора включает 395 филогенетически обособленных групп микроорганизмов, из которых 244 являются абсолютно новыми. При этом 80% новых таксонов, выявленных при молекулярно-генетическом исследовании, относятся к некультивируемым микроорганизмам. Большинство из предполагаемых новых филотипов микроорганизмов являются представителями родов Firmicutes и Bactero-ides. Общее количество видов приближается к 1500 и требует дальнейшего уточнения.

ЖКТ через систему сфинктеров сообщается с внешней средой окружающего нас мира и одновременно через кишечную стенку - с внутренней средой организма. Благодаря этой особенности в полости ЖКТ создалась собственная среда, которую можно разделить на две отдельные ниши: химус и слизистая оболочка. Пище-варительная система человека взаимодействует с различными бактериями, которые можно обозначить, как «эндотрофную микрофлору кишечного биотопа человека». Эндотрофная микрофлора человека делится на три основные группы. К первой группе относят полезную для человека эубиотическую индигенную или эубиотическую транзиторную микрофлору; ко второй - нейтральные микроорганизмы, постоянно или периодически высевающиеся из кишечника, но не влияющие на жизнедеятельность человека; к третьей - патогенные или потенциально патогенные бактерии («агрессивные популяции»).

ПОЛОСТНОЙ И ПРИСТЕНОЧНЫЙ МИКРОБИОТОПЫ ЖКТ

В микроэкологическом плане желудочно-кишечный биотоп может быть разделен на ярусы (ротовая полость, желудок, отделы кишечника) и микробиотопы (полостной, пристеночный и эпителиальный).


Способность к аппликации в пристеночном микробиотопе, т.е. гистадгезивность (свойство фиксироваться и колонизировать ткани) определяют суть транзиторности или индигенности бактерий. Эти признаки, а также принадлежность к эубиотической или агрессивной группе являются основными критериями, характеризующими взаимодействующий с ЖКТ микроорганизм. Эуби-о-тические бактерии участвуют в создании колонизационной резистентности организма, что является уникальным механизмом системы противоинфекционных барьеров.

Полостной микробиотоп на протяжении ЖКТ неоднороден, его свойства определяются составом и качеством содержимого того или иного яруса. Ярусы имеют свои анатомические и функциональные особенности, поэтому их содержимое различается по составу веществ, консистенции, рН, скорости перемещения и другим свойствам. Эти свойства определяют качественный и количественный состав адаптированных к ним полостных микробных популяций.

Пристеночный микробиотоп является важнейшей структурой, огра-ни-чивающей внутреннюю среду организма от внешней. Он представлен слизистыми наложениями (слизистый гель, муциновый гель), гликокаликсом, расположенным над апикальной мембраной энтероцитов и поверхностью самой апикальной мембраны.

Пристеночный микробиотоп представляет наибольший (!) интерес с позиции бактериологии, так как именно в нем возникает полезное или вредное для человека взаимодействие с бактериями - то, что мы называем симбиозом.

Иными словами, в микрофлоре кишечнике различают 2 вида :

  • мукозную (М) флору - мукозная микрофлора взаимодействует со слизистой оболочкой желудочно-кишечного тракта, образуя микробно-тканевой комплекс - микроколонии бактерий и их метаболиты, эпителиальные клетки, муцин бокаловидных клеток, фибробласты, иммунные клетки Пейровых бляшек, фагоциты, лейкоциты, лимфоциты, нейроэндокринные клетки;
  • просветную (П) флору - просветная микрофлора находиться в просвете желудочно-кишечного тракта, не взаимодействует со слизистой оболочкой. Субстратом для её жизнедеятельности является неперевариваемые пищевые волокна, на которых она и фиксируется.

На сегодняшний день известно, что микрофлора слизистой оболочки кишечника существенно отличается от микрофлоры просвета кишечника и каловых масс. Хотя у каждого взрослого человека кишечник населяет определенная комбинация преобладающих видов бактерий, состав микрофлоры может меняться в зависимости от образа жизни, питания и возраста. Сравни-тельное исследование микрофлоры у взрослых лиц, состоящих в генетическом родстве той или иной степени, выявило, что на состав кишечной микрофлоры генетические факторы влияют больше, чем питание.


Примечание к рисунку: ФОЖ - фундальный отдел желудка, АОЖ - антральный отдел желудка, ДПК - двенадцатиперстная кишка ( : Чернин В.В., Бондаренко В.М., Парфенов А.И. Участие просветной и мукозной микробиоты кишечника человека в симбионтном пищеварении. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №4)

Расположение мукозной микрофлоры соответствует степени ее анаэробиоза: облигатные анаэробы (бифидобактерии, бактероиды, пропионовокислые бактерии и др.) занимают нишу в непосредственном контакте с эпителием, далее располагаются аэротолерантные анаэробы (лактобациллы и др.), еще выше — факультативные анаэробы, а затем — аэробы. Просветная микрофлора является наиболее изменчивой и чувствительной к различным экзогенным воздействиям. Изменение рационов питания, экологические воздействия, медикаментозная терапия, прежде всего отражаются на качестве просветной микрофлоры.

См. дополнительно:

Количество микроорганизмов мукозной и просветной микрофлоры

К внешним воздействиям мукозная микрофлора более устойчива, чем просветная микрофлора. Соотношения между мукозной и просветной микрофлорой динамичны, и определяются следующими факторами:

  • эндогенные факторы - влияния слизистой оболочки пищеварительного канала, его секретов, моторики и самих микроорганизмов;
  • экзогенные факторы - влияют непосредственно и опосредованно через эндогенные факторы, например, прием той или иной пищи изменяет секреторную и моторную деятельность пищеварительного тракта, что трансформирует его микрофлору

МИКРОФЛОРА РОТОВОЙ ПОЛОСТИ, ПИЩЕВОДА И ЖЕЛУДКА

Рассмотрим композиции нормальной микрофлоры разных отделов ЖКТ.


Ротовая полость и глотка осуществляют предварительную механическую и химическую обработку пищи и дают оценку бактериологической опасности относительно проникающих внутрь человеческого организма бактерий.

Слюна является первой пищеварительной жидкостью, обрабатывающей пищевые вещества и воздействующей на проникающую микрофлору. Общее содержание бактерий в слюне вариабельно и в среднем составляет 10 8 МК/мл.

В состав нормальной микрофлоры ротовой полости входят стрептококки, стафилококки, лактобациллы, коринебактерии, большое количество анаэробов. Всего микрофлора рта насчитывает более 200 видов микроорганизмов.

На поверхности слизистой в зависимости от применяемых индивидуумом гигиенических средств обнаруживается около 10 3 -10 5 МК/мм2. Колонизационную резистентность рта осуществляют преимущественно стрептококки (S. salivarus, S. mitis, S. mutans, S. sangius, S. viridans), а также представители кожного и кишечного биотопов. При этом S. salivarus, S. sangius, S. viridans хорошо прилипают к слизистой оболочке и зубному налету. Эти альфа-гемолитические стрептококки, обладающие высокой степенью гистадгезии, сдерживают колонизацию рта грибами рода Сandida и стафилококками.

Микрофлора, транзиторно проходящая через пищевод, нестабильна, гистадгезивности к его стенкам не проявляет и характеризуется обилием временно находящихся видов, попадающих из полости рта и глотки. В желудке создаются относительно неблагоприятные условия для бактерий, обусловленные повышенной кислотностью, воздействием протеолитических ферментов, быстрой моторно-эвакуаторной функцией желудка и другими факторами, лимитирующих их рост и размножение. Здесь микроорганизмы содержатся в количестве, не превышающем 10 2 -10 4 в 1 мл содержимого. Эубиотики в желудке осваивают в основном полостной биотоп, пристеночный микробиотоп для них менее доступен.

Основными микроорганизмами, активными в желудочной среде, являются кислотоустойчивые представители рода Lactobacillus, обладающие или не обладающие гистадгезивным отношением к муцину, некоторые виды почвенных бактерий и бифидобактерии. Лактоба-цил-лы, несмотря на короткое время пребывания в желудке, способны, кроме антибиотического действия в полости желудка, временно колонизировать пристеночный микробиотоп. В результате совместного действия защитных компонентов основная масса попавших в желудок микроорганизмов погибает. Однако при нарушении работы слизистого и иммунобиологического компонентов некоторые бактерии находят в желудке свой биотоп. Так, за счет факторов патогенности в желудочной полости закрепляется популяция Helico-bacter pylori.

Немного о кислотности желудка: Максимальная теоретически возможная кислотность в желудке 0,86 рН. Минимальная теоретически возможная кислотность в желудке 8,3 рН. Нормальная кислотность в просвете тела желудка натощак 1,5-2,0 рН. Кислотность на поверхности эпителиального слоя, обращённого в просвет желудка 1,5-2,0 рН. Кислотность в глубине эпителиального слоя желудка около 7,0 рН.

ОСНОВНЫЕ ФУНКЦИИ ТОНКОГО КИШЕЧНИКА

Тонкий кишечник - это трубка около 6м длиной. Она занимает практически всю нижнюю часть брюшной полости и является самой длинной частью пищеварительной системы, соединяюще желудок с толстым кишечником. Большая часть пищи уже переваривается в тонком кишечнике с помощью специальных веществ - энзимов (ферментов).


К основным функциям тонкой кишки относят полостной и пристеночный гидролиз пищи, всасывание, секрецию, а также барьерно-защитную. В последней, кроме химических, ферментативных и механических факторов, значительную роль играет индигенная микрофлора тонкой кишки. Она принимает активное участие в полостном и пристеночном гидролизе, а также в процессах всасывания пищевых веществ. Тонкая кишка является одним из важнейших звеньев, обеспечивающих длительное сохранение эубиотической пристеночной микрофлоры.

Существует разница в заселении эубиотической микрофлорой полостного и пристеночного микробиотопов, а также заселении ярусов по длине кишки. Полостной микробиотоп подвержен колебаниям по составу и концентрации микробных популяций, пристеночный микробиотоп имеет сравнительно стабильный гомеостаз. В толще слизистых наложений сохраняются популяции, обладающие гистадгезивными свойствами к муцину.

Проксимальный отдел тонкой кишки в норме содержит относительно небольшое количество грамположительной флоры, состоящей главным образом из лактобацилл, стрептококков и грибов. Концентрация микроорганизмов составляет 10 2 -10 4 на 1 мл кишечного содержимого. По мере приближения к дистальным отделам тонкой кишки общее количество бактерий возрастает до 10 8 на 1 мл содержимого, одновременно появляются дополнительные виды, включающие энтеробактерии, бактероиды, бифидобактерии.

ОСНОВНЫЕ ФУНКЦИИ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА

Основными функциями толстой кишки являются резервирование и эвакуация химуса, остаточное переваривание пищи, выделение и всасывание воды, всасывание некоторых метаболитов, остаточного питательного субстрата, электролитов и газов, формирование и детоксикация каловых масс, регуляция их выделения, поддержание барьерно-защитных механизмов.

Все перечисленные функции выполняются с участием кишечных эубиотических микроорганизмов. Количество микроорганизмов толстой кишки составляет 10 10 -10 12 КоЕ на 1 мл содержимого. На бактерии приходится до 60% каловых масс. На протяжении всей жизни у здорового человека преобладают анаэробные виды бактерий (90-95% всего состава): бифидобактерии, бактероиды, лактобациллы, фузобактерии, эубактерии, вейллонеллы, пептострептококки, клостридии. От 5 до 10% микрофлоры толстой кишки составляют аэробные микроорганизмы: эшерихии, энтерококки, стафилококки, различные виды условно-патогенных энтеробактерий (протей, энтеробактер, цитробактер, серрации и др.), неферментирующие бактерии (псевдомонады, ацинетобактер), дрожжеподобные грибы рода Сandida и др.

Анализируя видовой состав микробиоты толстой кишки, необходимо подчеркнуть, что в ее состав, помимо указанных анаэробных и аэробных микроорганизмов, входят представители непатогенных простейших родов и около 10 кишечных вирусов. Таким образом, у здоровых лиц в кишечнике насчитывается около 500 видов различных микроорганизмов, большую часть из которых составляют представители так называемой облигатной микрофлоры - бифидобактерии, лактобактерии, непатогенная кишечная палочка и др. На 92-95% микрофлора кишечника состоит из облигатных анаэробов.

1. Преобладающие бактерии. В связи с анаэробными условиями у здорового человека в составе нормальной микрофлоры в толстом кишечнике преобладают (около 97%) анаэробные бактерии: бактероиды (особенно Bacteroides fragilis), анаэробные молочнокислые бактерии (например, Bifidumbacterium), клостридии (Clostridium perfringens), анаэробные стрептококки, фузобактерии, эубактерии, вейлонеллы.

2. Малую часть микрофлоры составляют аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы : грамотрицательные колиформные бактерии (прежде всего кишечная палочка - E.Coli), энтерококки.

3. В очень небольшом количестве : стафилококки, протеи, псевдомонады, грибы рода Candida, отдельные виды спирохет, микобактерий, микоплазм, простейших и вирусов

Качественный и количественный СОСТАВ основной микрофлоры толстого кишечника у здоровых людей (КОЕ/г фекалий) меняется в зависимости от их возрастной группы.


На рисунке показаны особенности роста и ферментативной активности бактерий в проксимальном и дистальном отделах толстого кишечника при различных условиях молярности, мМ (молярной концентрации) короткоцепочечных жирных кислот (КЦЖК) и величины водородного показателя, pH (кислотности) среды .

«Этажность расселения бактерий »

Для лучшего понимания темы дадим краткие определе ния понятиям, что такое аэробы и анаэробы

Анаэробы — организмы (в т.ч. микроорганизмы), получающие энергию при отсутствии доступа кислорода путем субстратного фосфорилирования, конечные продукты неполного окисления субстрата при этом могут быть окислены с получением большего количества энергии в виде АТФ в присутствии конечного акцептора протонов организмами, осуществляющими окислительное фосфорилирование.

Факультативные (условные) анаэробы — организмы, энергетические циклы которых проходят по анаэробному пути, но способные существовать и при доступе кислорода (т.е. растут как в анаэробных, так и в аэробных условиях), в отличие от облигатных анаэробов, для которых кислород губителен.

Облигатные (строгие) анаэробы — организмы, живущие и растущие только при отсутствии молекулярного кислорода в среде, он для них губителен.

Аэробы (от греч . aer — воздух и bios — жизнь) — организмы, обладающие аэробным типом дыхания, то есть способностью жить и развиваться только при наличии свободного кислорода, и растущие, как правило, на поверхности питательных сред.

К анаэробам относятся почти все животные и растения, а также большая группа микроорганизмов, которые существуют за счёт энергии, освобождающейся при реакциях окисления, протекающих с поглощением свободного кислорода.

По отношению аэробов к кислороду их делят на облигатные (строгие), или аэрофилы, которые не могут развиваться в отсутствии свободного кислорода, и факультативные (условные), способные развиваться при пониженном содержании кислорода в окружающей среде.

Следует отметить, что бифидобактерии , как наиболее строгие анаэробы колонизируют наиболее близкую к эпителию зону, где всегда поддерживается отрицательный окислительно-восстановительный потенциал (причём не только в толстой кишке, но и в других, более аэробных биотопах организма: в ротоглотке, влагалище, на кожных покровах). Пропионовокислые бактерии относятся к менее строгим анаэробам, т.е к факультативным анаэробам и могут переносить лишь низкое парциональное давление кислорода.


Два различающихся по анатомо-физиологическим и экологическим характеристикам биотопа - тонкую и толстую кишку отделяет эффективно функционирующий барьер: баугиневая заслонка, которая открывается и закрывается, пропуская содержимое кишечника только в одном направлении, и удерживает обсемененность кишечной трубки в количествах, необходимых здоровому организму.

По мере продвижения содержимого внутри кишечной трубки снижается парциальное давление кислорода и повышается значение рН среды, в связи с чем появляется «ЭТАЖНОСТЬ» расселения различных видов бактерий по вертикали: выше всего располагаются аэробы , ниже факультативные анаэробы и еще ниже - строгие анаэробы .

Таким образом, хотя содержание бактерий во рту может быть достаточно высоким - до 10 6 КОЕ/мл, оно снижается до 0-10 2-4 КОЕ/мл в желудке, поднявшись до 10 5 КОЕ/мл в тощей кишке и до 10 7-8 КОЕ/мл в дистальных отделах подвздошной кишки, с последующим резким возрастанием количества микробиоты в толстой кишке, достигая уровня 10 11-12 КОЕ/мл в дистальных ее отделах.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ


Эволюция человека и животных проходила при постоянном контакте с миром микробов, в результате чего сформировались тесные взаимоотношения между макро- и микроорганизмами. Влияние микрофлоры ЖКТ на поддержание здоровья человека, его биохимического, метаболического и иммунного равновесия несомненно и доказано большим количеством экспериментальных работ и клинических наблюдений. Ее роль в генезе многих заболеваний продолжают активно изучать (атеросклероз, ожирение, синдром раздраженного кишечника, неспецифические воспалительные заболевания кишечника, целиакия, колоректальный рак и др.). Поэтому проблема коррекции нарушений микрофлоры, по сути, является проблемой сохранения здоровья человека, формирования здорового образа жизни. Препараты пробиотики и пробиотические продукты обеспечивают восстановление нормальной микрофлоры кишечника, повышают неспецифическую резистентность организма.

СИСТЕМАТИЗИРУЕМ ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ О ЗНАЧИМОСТИ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ ЖКТ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА

МИКРОФЛОРА ЖКТ:

  • защищает организм от токсинов, мутагенов, канцерогенов, свободных радикалов;
  • яляется биосорбентом, аккумулирующим множество токсических продуктов: фенолы, металлы, яды, ксенобиотики и т.д.;
  • подавляет гнилостные, патогенные и условно патогенные бактерии, возбудителей кишечных инфекций;
  • ингибирует (подавляет) активность ферментов, вовлекаемых в образование опухолей;
  • укрепляет иммунную систему организма;
  • синтезирует антибиотикоподобные вещества;
  • синтезирует витамины и незаменимые аминокислоты;
  • играет огромную роль в процессе пищеварения, а также в обменных процессах, способствует всасыванию витамина Д, железа и кальция;
  • является главным переработчиком пищи;
  • восстанавливает моторную и пищеварительную функции желудочно-кишечного тракта, предотвращает метеоризм, нормализирует перистальтику;
  • нормализует психическое состояние, регулирует сон, циркадные ритмы, аппетит;
  • обеспечивает клетки организма энергией.

См. подробнее:

  • Локальные и системные функции микробиоты. (Бабин В.Н., Минушкин О.Н., Дубинин А.В. и др., 1998 г.)

Крайней степенью дисбактериоза кишечника является появление в крови (!) патогенных бактерий из желудочно-кишечного тракта (бактериемия) или даже развитие сепсиса:

На видео показаны некоторые моменты того, как нарушение иммунной защиты может привести к попаданию в кровь опасных бактерий

Заключение:

В связи с тем, что современная наука, изучающая микроорганизмы и их влияние на человека не стоит на месте, кардинально меняются и многие представления о роли кишечной микрофлоры, которую сегодня принято называть кишечным микробиомом или кишечной микробиотой. Микробиом человека более обширное понятие, чем кишечный микробиом. Однако имено кишечный микробиом является самым представительным в организме человека и оказывает наиболее существенное влияние на все протекающие в нем метаболические и иммунологические процессы. Результаты современных исследований четко показывают, что кишечная микробиота может являться отличной мишенью для терапевтических вмешательств с целью профилактики и лечения многих заболеваний. Для получения начального представления о различных механизмах взаимодействия кишечного микробиома с хозяином рекомендуем ознакомиться с дополительным материалом. Пробиотики и пребиотики для улучшения состояния при СД 1 типа


  • Для цитирования: Лоранская И.Д., Лаврентьева О.А. Функциональный анализ микробиоценоза желудочно– кишечного тракта // РМЖ. 2011. №17. С. 1057

    История изучения состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) началась в 1681 г., когда голландский исследователь Антони Ван Левенгук впервые сообщил о своих наблюдениях относительно бактерий и других микроорганизмов, обнаруженных в человеческих фекалиях, и выдвинул гипотезу о совместном существовании различных видов бактерий в желудочно-кишечном тракте. В 1850 году Луи Пастер развил концепцию о функциональной роли бактерий в ферментационном процессе. Немец-кий врач Роберт Кох продолжил исследования в данном направлении и создал методику выделения чистых культур, позволяющую идентифицировать специфичные бактериальные штаммы, что необходимо для разграничения болезнетворных и полезных микроорганизмов. В 1886 г. один из основоположников учения о кишечных инфекциях F. Esherich впервые описал кишечную палочку (Bacterium coli communae). Илья Ильич Мечников в 1888 году, работая в Институте Луи Пастера, утверждал, что в кишечнике человека обитает комплекс микроорганизмов, которые оказывают на организм «аутоинтоксикационный эффект», полагая, что введение в ЖКТ «здравословных» бактерий способно модифицировать действие кишечной микрофлоры и противодействовать интоксикации. Практическим воплощением идей Меч-ни-кова стало применение ацидофильных лактобацилл с терапевтическими целями, начатое в США в 1920-1922 годах. Отечественные исследователи приступили к изу-чению этого вопроса только в 50-х годах XX века. В 1955 г. Перетц Л.Г. показал, что кишечная палочка здоровых людей является одним из основных представителей нормальной микрофлоры и играет положительную роль благодаря сильным антагонистическим свойствам по отношению к патогенным микробам. Начатые более 300 лет назад исследования состава кишечного микробиоценоза, его нормальной и патологической физиологии и разработка способов положительного влияния на кишечную микрофлору продолжаются и в настоящее время.

    Основными биотопами являются: желудочно-кишечный тракт (ротовая полость, желудок, тонкая кишка, толстая кишка), кожа, дыхательные пути, урогенитальная система.
    Микрофлора ЖКТ является наиболее представительной, ее масса у взрослого человека составляет более 2,5 кг, численность - 1014. Ранее считалось, что в состав микробиоценоза ЖКТ входят 17 семейств, 45 родов, более 500 видов микроорганизмов. С учетом новых данных, полученных при исследовании микрофлоры различных биотопов ЖКТ с помощью молекулярно-генетических методов и метода газожидкостной хромато-масс-спектрометрии общий геном бактерий ЖКТ насчитывает 400 тыс. генов, что в 12 раз превышает размер генома человека. Подвергнута анализу на гомологию секвенированных генов 16S pРНК пристеночная (мукозная) микрофлора 400 различных отделов ЖКТ, полученная при эндоскопическом исследовании различных отделов кишечника добровольцев. В результате исследования показано, что пристеночная и просветная микрофлора включает 395 филогенетически обособленных групп микроорганизмов, из которых 244 являются абсолютно новыми. При этом 80% новых таксонов, выявленных при молекулярно-генетическом исследовании, относятся к некультивируемым микроорганизмам. Большинство из предполагаемых новых филотипов микроорганизмов являются представителями родов Firmicutes и Bactero-ides. Общее количество видов приближается к 1500 и требует дальнейшего уточнения.
    ЖКТ через систему сфинктеров сообщается с внешней средой окружающего нас мира и одновременно через кишечную стенку - с внутренней средой организма. Благодаря этой особенности в полости ЖКТ создалась собственная среда, которую можно разделить на две отдельные ниши: химус и слизистая оболочка. Пище-варительная система человека взаимодействует с различными бактериями, которые можно обозначить, как «эндотрофную микрофлору кишечного биотопа человека». Эндотрофная микрофлора человека делится на три основные группы. К первой группе относят полезную для человека эубиотическую индигенную или эубиотическую транзиторную микрофлору; ко второй - нейтральные микроорганизмы, постоянно или периодически высевающиеся из кишечника, но не влияющие на жизнедеятельность человека; к третьей - патогенные или потенциально патогенные бактерии («агрессивные популяции»). В микроэкологическом плане желудочно-кишечный биотоп может быть разделен на ярусы (ротовая полость, желудок, отделы кишечника) и микробиотопы (полостной, пристеночный и эпителиальный). Способность к аппликации в пристеночном микробиотопе, т.е. гистадгезивность (свойство фиксироваться и колонизировать ткани) определяют суть транзиторности или индигенности бактерий. Эти признаки, а также принадлежность к эубиотической или агрессивной группе являются основными критериями, характеризующими взаимодействующий с ЖКТ микроорганизм. Эуби-о-тические бактерии участвуют в создании колонизационной резистентности организма, что является уникальным механизмом системы противоинфекционных барьеров. Полостной микробиотоп на протяжении ЖКТ неоднороден, его свойства определяются составом и качеством содержимого того или иного яруса. Ярусы имеют свои анатомические и функциональные особенности, поэтому их содержимое различается по составу веществ, консистенции, рН, скорости перемещения и другим свойствам. Эти свойства определяют качественный и количественный состав адаптированных к ним полостных микробных популяций. Пристеночный микробиотоп является важнейшей структурой, огра-ни-чивающей внутреннюю среду организма от внешней. Он представлен слизистыми наложениями (слизистый гель, муциновый гель), гликокаликсом, расположенным над апикальной мембраной энтероцитов и поверхностью самой апикальной мембраны. Пристеночный микробиотоп представляет наибольший интерес с позиции бактериологии, так как именно в нем возникает полезное или вредное для человека взаимодействие с бактериями - то, что мы называем симбиозом. На сегодняшний день известно, что микрофлора слизистой оболочки кишечника существенно отличается от микрофлоры просвета кишечника и каловых масс. Хотя у каждого взрослого человека кишечник населяет определенная комбинация преобладающих видов бактерий, состав микрофлоры может меняться в зависимости от образа жизни, питания и возраста. Сравни-тельное исследование микрофлоры у взрослых лиц, состоящих в генетическом родстве той или иной степени, выявило, что на состав кишечной микрофлоры генетические факторы влияют больше, чем питание.
    Рассмотрим композиции нормальной микрофлоры разных отделов ЖКТ. Ротовая полость и глотка осуществляют предварительную механическую и химическую обработку пищи и дают оценку бактериологической опасности относительно проникающих внутрь человеческого организма бактерий. Слюна является первой пищеварительной жидкостью, обрабатывающей пищевые вещества и воздействующей на проникающую микрофлору. Общее содержание бактерий в слюне вариабельно и в среднем составляет 108 МК/мл. В состав нормальной микрофлоры ротовой полости входят стрептококки, стафилококки, лактобациллы, коринебактерии, большое количество анаэробов. Всего микрофлора рта насчитывает более 200 видов микроорганизмов. На поверхности слизистой в зависимости от применяемых индивидуумом гигиенических средств обнаруживается около 103-105 МК/мм2. Колонизационную резистентность рта осуществляют преимущественно стрептококки (S. salivarus, S. mitis, S. mutans, S. sangius, S. viridans), а также представители кожного и кишечного биотопов. При этом S. salivarus, S. sangius, S. viridans хорошо прилипают к слизистой оболочке и зубному налету. Эти альфа-гемолитические стрептококки, обладающие высокой степенью гистадгезии, сдерживают колонизацию рта грибами рода Сandida и стафилококками. Микрофлора, транзиторно проходящая через пищевод, нестабильна, гистадгезивности к его стенкам не проявляет и характеризуется обилием временно находящихся видов, попадающих из полости рта и глотки. В желудке создаются относительно неблагоприятные условия для бактерий, обусловленные повышенной кислотностью, воздействием протеолитических ферментов, быстрой моторно-эвакуаторной функцией желудка и другими факторами, лимитирующих их рост и размножение. Здесь микроорганизмы содержатся в количестве, не превышающем 102-104 в 1 мл содержимого. Эубиотики в желудке осваивают в основном полостной биотоп, пристеночный микробиотоп для них менее доступен. Основными микроорганизмами, активными в желудочной среде, являются кислотоустойчивые представители рода Lactobacillus, обладающие или не обладающие гистадгезивным отношением к муцину, некоторые виды почвенных бактерий и бифидобактерии. Лактоба-цил-лы, несмотря на короткое время пребывания в желудке, способны, кроме антибиотического действия в полости желудка, временно колонизировать пристеночный микробиотоп. В результате совместного действия защитных компонентов основная масса попавших в желудок микроорганизмов погибает. Однако при нарушении работы слизистого и иммунобиологического компонентов некоторые бактерии находят в желудке свой биотоп. Так, за счет факторов патогенности в желудочной полости закрепляется популяция Helico-bacter pylori.
    К основным функциям тонкой кишки относят полостной и пристеночный гидролиз пищи, всасывание, секрецию, а также барьерно-защитную. В последней, кроме химических, ферментативных и механических факторов, значительную роль играет индигенная микрофлора тонкой кишки. Она принимает активное участие в полостном и пристеночном гидролизе, а также в процессах всасывания пищевых веществ. Тонкая кишка является одним из важнейших звеньев, обеспечивающих длительное сохранение эубиотической пристеночной микрофлоры. Существует разница в заселении эубиотической микрофлорой полостного и пристеночного микробиотопов, а также заселении ярусов по длине кишки. Полостной микробиотоп подвержен колебаниям по составу и концентрации микробных популяций, пристеночный микробиотоп имеет сравнительно стабильный гомеостаз. В толще слизистых наложений сохраняются популяции, обладающие гистадгезивными свойствами к муцину. Проксимальный отдел тонкой кишки в норме содержит относительно небольшое количество грамположительной флоры, состоящей главным образом из лактобацилл, стрептококков и грибов. Концентрация микроорганизмов составляет 102-104 на 1 мл кишечного содержимого. По мере приближения к дистальным отделам тонкой кишки общее количество бактерий возрастает до 108 на 1 мл содержимого, одновременно появляются дополнительные виды, включающие энтеробактерии, бактероиды, бифидобактерии.
    Основными функциями толстой кишки являются резервирование и эвакуация химуса, остаточное переваривание пищи, выделение и всасывание воды, всасывание некоторых метаболитов, остаточного питательного субстрата, электролитов и газов, формирование и детоксикация каловых масс, регуляция их выделения, поддержание барьерно-защитных механизмов. Все перечисленные функции выполняются с участием кишечных эубиотических микроорганизмов. Количество микроорганизмов толстой кишки составляет 1010-1012 КоЕ на 1 мл содержимого. На бактерии приходится до 60% каловых масс. На протяжении всей жизни у здорового человека преобладают анаэробные виды бактерий (90-95% всего состава): бифидобактерии, бактероиды, лактобациллы, фузобактерии, эубактерии, вейллонеллы, пептострептококки, клостридии. От 5 до 10% микрофлоры толстой кишки составляют аэробные микроорганизмы: эшерихии, энтерококки, стафилококки, различные виды условно-патогенных энтеробактерий (протей, энтеробактер, цитробактер, серрации и др.), неферментирующие бактерии (псевдомонады, ацинетобактер), дрожжеподобные грибы рода Сandida и др. Анализируя видовой состав микробиоты толстой кишки, необходимо подчеркнуть, что в ее состав, помимо указанных анаэробных и аэробных микроорганизмов, входят представители непатогенных простейших родов и около 10 кишечных вирусов. Два различающихся по анатомо-физиологическим и экологическим характеристикам биотопа - тонкую и толстую кишку отделяет эффективно функционирующий барьер: баугиневая заслонка, которая открывается и закрывается, пропуская содержимое кишечника только в одном направлении, и удерживает обсемененность кишечной трубки в количествах, необходимых здоровому организму. Таким образом, хотя содержание бактерий во рту может быть достаточно высоким - до 106 КоЕ/мл, оно снижается до 0-10 КоЕ/мл в желудке, поднявшись на 101-103 в тощей кишке и 105-106 в дистальных отделах подвздошной кишки, с последующим резким возрастанием количества микробиоты в толстой кишке, достигая уровня 1012 КоЕ/мл в дистальных ее отделах. По мере продвижения содержимого внутри кишечной трубки снижается парциальное давление кислорода и повышается значение рН среды, в связи с чем появляется «этажность» расселения различных видов бактерий по вертикали: выше всего располагаются аэробы, ниже факультативные анаэробы и еще ниже - строгие анаэробы.
    Доказано, что микрофлора может влиять на сенсомоторную функцию кишечника в трех направлениях:
    1) через конечные продукты бактериального брожения и метаболизма,
    2) нейроэндокринные факторы
    3) иммунные медиаторы.
    Бактериальные пептиды стимулируют энтеральную нервную систему и афферентную иннервацию, а эндотоксины (липополисахариды) могут воздействовать на кишечную моторику. Продукты метаболизма сахаролитических бактерий - короткоцепочечные жирные кислоты (КЖК), такие как бутират, ацетат, пропионат, играют важную роль в поддержании нормальной функции кишечника и могут участвовать в патогенезе желудоч-но-кишечных заболеваний. КЖК являются важными источниками энергии, необходимыми для колоноцитов. Поддержание анаэробных условий в толстой кишке также осуществляется с помощью микробных метаболитов.
    КЖК оказывают влияние на выработку серотонина, мотилина и соматостатина, содержащихся в энтероэндокринных клетках толстой кишки и подвздошной кишки; они являются ключевыми медиаторами кишечной моторики. Микрофлора имеет важное значение в нормальном развитии кишечной иммунной системы и лимфоидной ткани. Значение иммунной системы в регуляции сенсомоторной функции кишки также нельзя недооценивать.
    Существуют гистохимические, морфологические, молекулярно-генетические методы исследования микроорганизмов, нагрузочные пробы.
    Наиболее распространенным методом является бактериологическое исследование кала. Как правило, количество определяемых показателей колеблется от 14 до 25. Достоинством метода является точная верификация патогенных бактерий. К недостаткам метода относится возможность получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов из-за неоднородности выделения микроорганизмов из разных отделов испражнений, трудности культивирования анаэробных микроорганизмов. Кроме того, определяется полостная и транзитная флора, которая доминирует в фекальной флоре, при этом пристеночная флора не оценивается.
    Альтернативу бактериологическим исследованиям могут составить хроматографические методы дифференциации микроорганизмов - газожидкостная, ионнообменная и, в частности, газожидкостная хроматография (ГЖХ) в сочетании с масс-спектрометрией (МС) - ГЖХ-МС. Метод ГЖХ-МС основан на определении компонентов бактериальных клеток, появляющихся в результате их естественного отмирания, или атаки компонентов иммунной системы. В качестве маркеров используют минорные липидные компоненты мембран микробов. По их содержанию и количеству можно в течение нескольких часов определить до 170 видов аэробных и анаэробных бактерий и грибов в разных биологических средах.
    Разработан и внедряется в практику метод ГЖХ-анализа, основанный на определении КЖК, являющихся метаболитами в основном анаэробных родов микроорганизмов. На основании полученных данных создан метаболический паспорт при эубиозе кишечника. Метод позволяет достаточно быстро и достаточно точно оценить состояние индигенной микрофлоры.
    Синдром избыточного бактериального роста в тонкой кишке (СИБР) предполагает аномальный рост (более 105 КОЕ/мл) эндогенных бактерий в тонкой кишке, сходных с теми, что в норме находятся в толстой кишке. Для диагностики СИБР применяют прямые и косвенные методы. Прямой заключается в посеве дуоденального и еюнального содержимого, полученного с помощью стерильного зонда. К косвенному методу можно отнести исследование выделяемого водорода - дыхательный тест. Обоснованием для создания водородного дыхательного теста стал факт того, что в процессе метаболизма углеводов микрофлорой толстой кишки образуется большое количество газов, в том числе водорода. Водородный тест может применяться для ориентировочного представления о степени бактериального обсеменения тонкой кишки. Однако в последнее время появилось мнение, что дыхательный водородный тест позволяет определить лишь ороцекальный транзит бактерий.
    В настоящее время широкое распространение получил способ определения видов микроорганизмов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Метод ПЦР разработал еще в 1983 году Кэри Мюллис, за что в 1993 г. он был удостоен Нобелевской премии в области химии. В основу метода ПЦР положено многократное копирование (амплификация) искомого фрагмента ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. По сравнению с традиционными методами диагностики ПЦР отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Он позволяет использовать для диагностики образцы с менее жесткими требованиями к жизнеспособности исследуемых микроорганизмов, чем для исследования микробиологическими методами. Сегодня существует более совершенный, чем «классический», метод ПЦР - с детекцией результатов в режиме реального времени. Этот метод основан на автоматическом измерении уровня флуоресцентного сигнала, увеличивающегося с каждым циклом при положительной реакции ПЦР, что позволяет проводить количественную оценку ДНК исследуемого микроорганизма в биологическом образце.
    Эволюция человека и животных проходила при постоянном контакте с миром микробов, в результате чего сформировались тесные взаимоотношения между макро- и микроорганизмами. Влияние микрофлоры ЖКТ на поддержание здоровья человека, его биохимического, метаболического и иммунного равновесия несомненно и доказано большим количеством экспериментальных работ и клинических наблюдений. Ее роль в генезе многих заболеваний продолжают активно изучать (атеросклероз, ожирение, синдром раздраженного кишечника, неспецифические воспалительные заболевания кишечника, целиакия, колоректальный рак и др.). Поэтому проблема коррекции нарушений микрофлоры, по сути, является проблемой сохранения здоровья человека, формирования здорового образа жизни.
    Необходимо помнить, что дисбиотические нарушения всегда вторичны. Поэтому устранение причин, лечение основного заболевания, на фоне которого развиваются нарушения микробиоценоза кишечника, является одним из ведущих принципов его коррекции. Наряду с воздействием на основное заболевание и повышением резистентности организма при коррекции дисбиотических нарушений показано: нормализация моторной функции кишечника, применение энтеросорбентов, назначение антибактериальных препаратов, пре- и пробиотиков, синбиотиков.
    Указанными свойствами обладает используемый в современной клинической практике Бактистатин® - комплексный препарат природного происхождения, инновационный энтеросорбент с пробиотическим действием.
    Препарат Бактистатин® состоит из трех компонентов, взаимно усиливающих действие друг друга. Основой препарата является стери-ли-зо-ванная культуральная жидкость природного микроба Bacillus Subtilis с высокими меди-ко-биологическими свойствами, содержащая пробиотические вещества (лизоцим, бактериоцины, каталазы), ферменты и аминокислоты. Бактери-цидное и бактериостатическое влияние на патогенные и условно патогенные микробы обусловлено содержанием пробиотических веществ, синтезируемых в процессе вегетативного роста бактерий B. Subtilis штамма и концентрированием их в культуральной жидкости за время ферментации. Таким образом, пробиотические соединения в составе Бактиста-тина® обеспечивают восстановление нормальной микрофлоры кишечника, повышают неспецифическую резистентность организма.
    Второй компонент - цеолит, природный сорбент, обладающий ионнообменными свойствами. Цеолит способен проявлять сорбционные свойства преимущественно по отношению к соединениям с низкой молекулярной массой (метан, сероводород, аммиак и другие токсические вещества), не вступая в прямое взаимодействие с витаминами, аминокислотами, белками, оставляя их в желудочно-кишечном тракте. Ионы, содержащиеся в организме, могут включаться в кристаллическую структуру минерала, и, наоборот, из минерала организм получает те неорганические элементы, в которых испытывает потребность. Происходит так называемый селективный ионообмен. Цеолиты способствуют нормализации жирового, белкового, углеводного обмена; повышению иммунитета; повышают устойчивость к стрессу; улучшают репродуктивную функцию, функции печеночных клеток; нормализует перистальтику кишечника, ускоряя продвижение содержимого кишечника по пищеварительному тракту.
    Также в состав Бактистатина® входит гидролизат соевой муки, который является естественным источником полноценного белка аминокислот, олигосахаридов, обеспечивает максимально благоприятные условия для бесконкурентного роста нормальной флоры и восстановления микробного пейзажа организма.
    Бактистатин® особо эффективен для нормализации микрофлоры кишечника при острых и хронических заболеваниях ЖКТ с явлениями дисбактериоза, при дисбактериозах, возникающих при синдроме раздраженной кишки, в результате антибиотикотерапии, после перенесенных кишечных инфекций.

    Литература
    1. Барановский А.Ю., Кондрашина Э.А. Дисбактериоз и дисбиоз кишечника. - Санкт-Петербург: Питер. - 2000. - С.17
    2. Бондаренко В.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериоз кишечника как клинико-лабораторный синдром: современное состояние проблемы. - М.: Издательская группа «ГЭОТАР-Медиа». - 2007. - С.8-35
    3. Григорьев А.В. Желудочно-кишечный тракт как среда обитания бактерий// Раздел 1. - М.: Издательство: ЗАО «СИЛМА». - 2004.- С.5-7, С.16-32
    4. Коровина Н.А., Захарова И.Н., Костадинова В.Н. и др. Пребиотики и пробиотики при нарушениях кишечного микробиоценоза у детей. - М.: ИД «Медпрактика-М». - 2004. - С.8-9
    5. Ткаченко Е.И., Успенский Ю.П. Питание, микробиоценоз и интеллект человека. - Санкт-Петербург: СпецЛит. - 2006. - С.110-113
    6. Урсова Н.И. Современные технологии в коррекции дисбактериозов у детей. - Учебное пособие. - Москва. - 2003. - С.4-6.
    7. Eckburg P.B., Bik E.M., Bernstein C.N. et al. Diversity of the human intestinal microbial flora. // Science. 2005. - 308.- Р.1635-1638.
    8. Ghoshal U.C., Park H., Gwee K.-A. Bugs and Irritable Bowel Syndrome: The Good, the Bad and Ugly. // J Gastroenterology, Hepatology. - 2010. - 25 (2). - P.244-251.
    9. O’Hara А.М., Shanahan F. Обзор. Кишечная микрофлора: анализ терапевтического потенциала. // Клиническая гастроэнтерология и гепатология. Русское издание. - 2008.- Том1, №4: 236-247.
    10. Spiller R.С. Review Article: Probiotics and Prebiotics in Irritable Bowel Syndrome // Alimentary Pharmacology & Therapeutics. 2008; 28(4):385-396.