Аллергологический метод исследования. Техника проведения аллергологических проб. Что такое аллергены

Аллергия - довольно распространенное состояние. Съев апельсин, погладив кошку, попав в пыльное помещение, получив укус пчелы, люди начинают чихать и чувствовать зуд в глазах, раздражение кожи, расстройство пищеварения. А ведь мало кто знает, что аллергия - критическое состояние, и иногда может привести к отеку верхних дыхательных путей, заканчивающемуся летальным исходом. Во многих случаях это можно избежать, если проводить раннюю диагностику заболевания.

Что такое аллергия?

Аллергией называют усиленную чувствительность организма к некоторым веществам, выражающуюся патологической реакцией. Смысл состояния заключается в следующем. Некоторые вещества являются аллергенами для иммунной системы человека. При первой встрече защитная система как бы «запоминает» их, а при повторной встрече выделяет большое количество биологически активных веществ (гистамин, лейкотриены, простогландины), вызывающих повреждение тканей организма и нарушение их функционирования. Это так называемая патофизиологическая стадия аллергии. Она может закончиться отеком Квинке и смертью человека от удушения, все это может развиваться в течение всего лишь несколько минут.

Особое значение в развитии аллергической реакции имеют иммуноглобулины класса Е . Именно они реагируют при повторной встрече с аллергенами и фиксируются вместе с ними на поверхности мембран базофилов и тучных клеток, вызывая освобождение БАВ.

Существуют разные группы аллергенов:

  • Пищевые продукты.
  • Продукты жизнедеятельности животных и растений.
  • Лекарства.
  • Бытовые (самое извсетное - пыль).
  • Вещества, попадающие в организм при непосредственном контакте с насекомыми.
  • Химико-промышленные соединения.

Диагностика аллергии важна, поскольку позволяет выявить гиперчувствительность организма к тому или иному продукту или животному или растению до проявления патологии и избежать повторной встречи.

Методы диагностики аллергии

К основным мероприятиям, позволяющим определить повышенную реактивность человека, относятся:

  1. Кожные пробы.
  2. Анализ на содержание иммуноглобулинов Е в крови.
  3. Провокационные тесты.
  4. Элиминационные тесты.

Кроме того, следует помнить о противопоказаниях к проведению анализов. Это:

  • Детский возраст до пяти лет.
  • Возраст после 60 лет.
  • Противопоказано для беременных или женщин, кормящих грудью.
  • При обострении патологий других систем органов.
  • Нельзя проводить пациентам, принимающим гормоны в качестве терапии.
  • Нельзя, если в истории болезни указан хоть один случай анафилактического шока.

Рассмотрим каждую из диагностик подробнее.

Кожные пробы

Их проводят с целью выявления, есть ли у человека чувствительность на определенное вещество. Пробы можно ставить несколькими способами:

  • Метод скарификации . Очищенное и подготовленное предплечье пациента размечают на «ячейки» или квадраты. На каждый участок наносят каплю аллергена, после чего через нее делают царапину. Метод, как и последующие, бескровный и абсолютно безболезненный.
  • Аппликационные пробы . Кожу при этом виде не царапают, а просто прикладывают смоченные в растворе ватные тампоны.
  • Прик-тест . Общий смысл тот же, что и в скарификационном, только производят не царапины, а уколы с помощью специальной иглы.
  • Введение под кожу растворов аллергенов.

За один подход можно определять не более 15 компонентов. Существует огромное количество препаратов, сделанных из шерсти домашних животных, перьев птиц, пыльцы растений, пыли, микроскопических грибов, пищевых продуктов и химических соединений.

Положительной реакция считается в том случае, если в месте нанесения отмечается покраснение, зуд или небольшой отек кожи.

Пациента проверяют обычно через 24-48 часов, но иногда чувствительность может проявляться уже через 15-30 минут.

Результат анализа выдается в виде списка, где указано на какие из аллергенов есть положительная реакция, причем есть разные степени её выраженности: сильная, слабая, сомнительная, отрицательная.

Анализ на Ig E в крови

В норме иммуноглобулины класса Е обнаруживаются в крови в незначительных количествах. Однако повышение уровня этих тел может говорить о наличии таких заболеваний, как: аллергический ринит, крапивница, системная анафилаксия. Метод очень информативный, однако действует только в случае IgE-зависимых аллергий, к счастью это самый распространенный тип аллергий. Кроме того, повышение этого класса иммуноглобулинов свидетельствует не только о чувствительности, но и о гельминтозах и бронхиальной астме.

Анализ Ig E эффективен больше у детей. Одно только повышение этих соединений не является 100-процентной гарантией наличия аллергии, нужно выявить аллерген-специфический антиген, который может быть ответственен за реакцию чувствительности.

Есть у метода и несомненные преимущества: его можно проводить и при обострении заболеваний других органов, он е противопоказан маленьким детям, пожилым людям, беременным и кормящим матерям.

В ходе пробы берут кровь из вены спустя 3 часа после последнего приема пищи.

Провокационные тесты

Иногда, когда результаты кожных проб не совпадают с симптоматикой, или картина слишком смазана, то назначают провокационные тесты. При этом методе небольшое количество аллергена вводят человеку непосредственно в легкие при помощи ингаляций или на слизистую оболочку носовой полости или под язык, на конъюнктиву. Реакция считается положительной, если наблюдаются покраснение и зуд (в случае глаз), чихание и ринит (в случае носовой полости).

Элиминационные тесты

Чаще всего применяется при диагностике пищевой аллергии. Если предполагается, что какой-то продукт вызывает аллергию, то проводят его элиминацию, то есть удаление из рациона . Если симптомы аллергии исчезли, то можно с уверенностью сказать, что аллерген выявлен.

При проведении любого вида диагностики аллергии важно прекратить заранее прием любых противоаллергических и противогистаминных препаратов. Кроме того, следует помнить о противопоказаниях к проведению анализов. Это:

Чаще всего применяются все методы, то есть используют комплексную диагностику. Одним из её важных моментов является ведение дневника врачом-аллергологом, в котором отмечается время начала аллергической реакции, ее продолжительность, характерные проявления. С помощью дневника можно установить сезонный характер чувствительности, например, по причине пыльцы какого-нибудь растения, а также разработать профилактические меры, например, избегать нахождения вблизи аллергенного объекта.

Таким образом, диагностика аллергии - распространенная, безболезненная, и, в большинстве случаев, безопасная процедура, позволяющая выявить аллерген и подтвердить наличие чувствительности. С помощью комплексных анализов можно выбрать стратегию лечения и профилактики, позволяющей избежать опасной патологии в будущем.

Специфические и неспецифические методы обследования больных аллергией

В статье перечислены применяемые современной медициной методы диагностики аллергии.

Физикальное обследование

Включает осмотр пациента, пальпацию, аускультацию (прослушивание звуков, сопровождающих работу органов) и перкуссию (прослушивание звуков при простукивании определённых участков на теле пациента).

Лабораторная диагностика аллергии

Лабораторный метод диагностики аллергии определяет состояние организма по взятым у пациента анализам. Большинство методов базируется на ИФА (иммуноферментный анализ) - специфической реакции антиген-антитело. На ИФА основаны метод множественной хемилюминисценции и иммунофлуоресцентный метод на аппарате ImmunoCAP.

Биохимический анализ крови

Изучает состояние внутренних органов и систем, наличие воспалительных процессов, определяя химический состав крови.

Скрининговое аллергологическое обследование

Объект исследования - сыворотка крови. Проводятся ИФА тесты на основные группы аллергенов. Метод позволяет сузить круг поиска виновного аллергена.

Определение специфических IgG

Объект - сыворотка крови. LgG-тест ИФА проводят с индивидуальными антигенами для точного выявления виновного аллергена.

Показания: диагностика пищевой аллергии и непереносимости.

  • 50 Ед/мл - результат отрицательный;
  • 50 - 100 Ед/мл - слабое нарушение толерантности;
  • 100 - 200 Ед/мл - умеренное нарушение толерантности;
  • более 200 Ед/мл - выраженное нарушение толерантности.

Исследование специфических антител IgE

IgE антитела отвечают за реакции немедленного типа. Определяются в сыворотке крови методом ИФА. Выявляется вызывающий аллергию агент.

Показания: невозможность выявить аллерген через анамнез, отказ от кожных проб, системные реакции в анамнезе, дерматит, гипо- и гиперреактивность кожи, количественная оценка антител, lgE-зависимая пищевая аллергия.

Забор крови производится из локтевой вены. За несколько дней до сдачи крови исключают аллергенные продукты из диеты и контакт с животными, прекращают приём антигистаминных препаратов. Анализ проводится в период ремиссии, кровь берут натощак..

Нормальное (референсное) значение lgE в крови - менее 0,35 МЕ/мл

При выявлении lgE-зависимой аллергии показана аллерген-специфическая иммунотерапия

Исследование газового состава крови

Определяется pH, парциальное давление О2 и СО2, количество бикарбоната в крови пациента.

Исследование гормонального профиля

В крови измеряется уровень гормонов коры надпочечников.

Клинический анализ мочи

Оцениваются физико-химические характеристики мочи: цвет, прозрачность, плотность, кислотность, химический состав. В осадке определяют наличие эпителия, эритроцитов, лейкоцитов, бактерий.

Копрограмма

Используется при диагностике пищевой аллергии.

Общий анализ мокроты

Применяется при диагностике дыхательной аллергии. Исследуются количество,консистенция, цвет, запах, характер (слизь, гной, кровь, серозная жидкость), флора, форменные элементы.

Ревматологические пробы

Объект - кровь. Анализируется уровень ревматологического фактора, фибриногена, С-реактивного белка и антистрептолизина. Метод позволяет установить наличие, локализацию и источник воспаления соединительной ткани.

Вирусологические исследования

Объекты: кровь, кал, мокрота, спинномозговая жидкость. Определяется присутствие вирусов в организме.

Бактериологический анализ мокроты и других выделений (секретов) со слизистых и кожи

Производится посев образца в питательную среду и последующий анализ выращенных колоний. Позволяет выявить и количественно оценить наличие возбудителей инфекционных заболевании.

Цитологическое исследование секрета, мазков или смывов из полости носа, слизистой конъюнктив и др

Метод состоит в исследовании под микроскопом клеток, находящихся во взятом образце, для выявления их морфологических патологий и поражений и их причин.

Специфические методы аллергологического обследования

Данная группа методов диагностики аллергии проводится на пациенте и направлена на выявления агента, вызывающего аллергию.

Кожные пробы (скарификационные)

Производится оценка местной реакции на контакт аллергена с кожей.

Существуют следующие виды кожных проб:

    капельные : препарат аллергена наносится в виде капли на неповреждённую кожу;

Пример проведения капельной диагностики (можно увеличить)

  • аппликационные или patch-тесты: на неповреждённую кожу наносится ткань,пропитанная аллергеном;
  • скарификационные: аллерген вводится через царапины на коже;
  • внутрикожные: препарат аллергена вводится внутрь кожи шприцем.
  • prick тесты : аллерген вводится через укол иглы, смоченной препаратом аллергена.
  • Показания: данные анамнеза, указывающие на аллергическую природу заболевания.

    Противопоказания:

    Причины ложных результатов:

    • Нарушение технологии проведения пробы;
    • Неправильное хранение препаратов аллергенов;
    • Пониженная реактивность кожи;
    • Приём антигистаминных препаратов.

    Положительный результат указывает на сенсибилизацию организма, при совпадении с результатами анамнеза делается вывод об аллергической природе заболевания, при несовпадении проводятся дополнительные тесты.

    При положительной реакции на пробу Манту проводится дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии, то есть определяется, что вызвало местную реакцию - палочка Коха или антитела без инфекции.

    Тест проводится врачом-аллергологом, с применением растворов аллергенов, помещаемых на кожу предплечья. Одновременно наносится до 15 проб.

    Фрагмент сюжета телеканала МИР - проведение прик-тестирования детям

    Элиминационные тесты

    На несколько недель исключается контакт пациента с вероятными аллергенами, что приводит у улучшению общего состояния. При возобновлении воздействия искомого аллергена у больного снова проявляются симптомы аллергии.

    Таким образом можно точно определить вещество, вызывающее аллергическую реакцию. Метод наиболее эффективен при пищевой, лекарственной аллергии и контактных дерматитах.

    Провокационные тесты

    Аллерген наносится на слизистую оболочку органа-мишени, возникает местная аллергическая реакция.

    При диагностике аллергии используются следующие виды провокационных тестов:

    • Назальный (показания: полиноз, ринит): аллерген помещают в ноздрю;
    • Конъюнктивальный: аллерген закапывают под нижнее веко;
    • Подъязычный (пищевая аллергия): аллерген закапывают под язык;
    • Ингаляционный (показания: бронхиальная астма): вдыхается аэрозоль препарата аллергена;
      • Ингаляционный тест с карбахолином : подтверждение диагноза бронхиальной астмы;
      • Ингаляционный тест с холодным воздухом : исследование неспецифической гиперреактивности бронхов;
    • Дополнительные методы аллергологического обследования:
      • Дункан-тест (на холодовую аллергию): помещают на кожу кусок льда на 20 минут;
      • Тепловой тест (на тепловую аллергию): помещают на кожу предплечья бюкс с горячей водой (40 о С) на 10 минут.

    Функциональные методы диагностики аллергии

    Позволяют оценить работу физиологических систем организма посредством инструментального измерения внешних проявлений их работы.

    При диагностике аллергии оценивают работу лёгких и дыхательных путей:

    Проведение пикфлоуметрии при астме (можно увеличить)

    • Пикфлуометрия - измерение пиковой скорости выдоха;
    • Спирометрия и спирография - измеряются скоростные и объёмные характеристики дыхания;
    • Пневмотахометрия - измерение скорости воздуха при форсированном вдохе и выдохе.

    Инструментальные методы обследования

    Арсенал инструментальных методов диагностики аллергии включает в себя:

    • Переднюю риноскопию: диагностика поражений слизистой оболочке носа.
    • Переднюю риноманометрию: измеряет сужение просветов носовых ходов вследствие назального аллерготеста.
    • Эндоскопические исследования: осмотр внутренних органов посредством эндоскопа.

    Кроме вышеперечисленных традиционных, существуют альтернативные методы диагностики аллергии.

    Альтернативные методы диагностики аллергических заболеваний

    Если аллергическое заболевание проявляется нехарактерными симптомами, или затруднена диагностика традиционными способами, прибегают к альтернативным методам диагностики аллергии.

    Лейкоцитотоксический тест

    Определяется количество лейкоцитов, несущих специфический антиген. Наличие антигена определяется по изменению внешнего вида лейкоцита при его реакции с подозреваемым аллергеном.

    Aллергологический тест на выявление IgG в ИФА

    Применяется при выявлении вызывающего аллергию агента и диагностике пищевой непереносимости.

    Так выглядит проведение вегето-резонансного тестирования (можно увеличить)

    VEGA-тестирование (электродермальное тестирование) метод Фоля (Voll)

    Исследование электромагнитной проводимости в организме. Пониженная проводимость указывает на аллергический процесс.

    Анализ волос и тестирование аллергии

    Аурикулокардиальный рефлекс

    Оценивается изменение пульса и кровенаполнения при контакте с аллергеном.

    Для безошибочной постановки диагноза аллерголог при обследовании использует поочерёдно несколько из перечисленных методов диагностики аллергии.

    Программа «Алло, доктор!». Современные методы молекулярной диагностики аллергии

    Диагностика аллергии методом кожного тестирования

    Прежде чем начать лечение заболевания аллергологического характера, проводится диагностика аллергии, направленная на точное установление аллергена, вызывающего негативную реакцию. Как правило, анализ на выявление аллергена проводится путем кожных проб, специальных (провокационных) тестов, а также методом иммунологических лабораторных исследований. Здесь вы можете ознакомиться с подробным обзором всех вышеперечисленных методов диагностики аллергических заболеваний и особенностями их проведения.

    Диагностика аллергических заболеваний: прямые и косвенные признаки

    Первый и крайне важный этап диагностики аллергических заболеваний - правильно собранная история болезни. Данные, которые пациент сообщает врачу во время первого приема, позволяют направить дальнейшее аллергологическое обследование в нужном направлении.

    Существуют прямые и косвенные признаки, указывающие на чувствительность к аллергенам. Например, прямой признак бытовой аллергии - появление клинических признаков заболевания во время уборки помещения, во время игры с мягкими игрушками, при посещении цирка или зоопарка и так далее. Косвенные признаки бытовой аллергии - частые обострения заболевания дома, проявление симптомов чаще ночью в постели, а не на улице при прогулке.

    К прямым признакам пыльцевой аллергии относится появление заболевания (или усиление признаков заболевания) при контакте с цветущими растениями, использовании парфюмерии с цветочной пыльцой, применении средств фитотерапии. Косвенно на пыльцевую аллергию могут указывать обострения в весенне-летне-осенний период, появление реакции при употреблении в пищу меда, орехов, яблок, груш, слив.

    Структура аллергенов (при IGE-зависимых аллергических реакциях) выглядит следующим образом.

    Выработку IgE могут вызвать аллергены белковой природы или комплекс белка с углеводом. Полисахариды не способны сами вызывать стимуляцию образования IgE.

    По молекулярной массе и иммуногенности антигены делятся на две группы: полные антигены и гаптены.

    К полным антигенам относятся антигены пыльцы, эпидермиса, сыворотки животных и другие. Они способны самостоятельно вызвать синтез IgE антител. Основу полного антигена составляет полипептидная цепь.

    Неполные антигены, или гаптены, - низкомолекулярные вещества, сами по себе не являются аллергенами. Попадая в организм, гаптены образуют комплекс с тканевыми или сывороточными белками, и уже этот комплекс выступает в роли аллергена.

    Различия между полными антигенами и гаптенами имеют принципиальное значение в диагностике аллергических заболеваний. Полные антигены можно идентифицировать с помощью диагностических препаратов при кожном тестировании. Однако определить гаптен и изготовить на его основе диагностический препарат практически невозможно (исключение составляют только пенициллины).

    Выявлению аллергенов способствуют кожные пробы, провокационные тесты, лабораторные анализы.

    Как выявить аллерген: лабораторный тест на аллергическую реакцию

    Лабораторные иммунологические тесты. Наиболее отработанный аллергический тест, проводимый в лабораторных условиях, - это определение аллерген-специфических IgE антител в сыворотке крови. Лабораторные методы могут лишь установить наличие какого-либо звена аллергического процесса, но не отражают картину в целом. Тест на аллергическую реакцию - это результат одновременного участия всех составляющих сложного механизма иммунологического процесса. Он принципиально не может быть получен в лабораторных условиях, поэтому тесты используются как вспомогательный, хотя и важный, инструмент диагностики и не могут заменить проведение испытаний на самом больном.

    Как проводят тест на аллергию: кожные пробы

    Кожные пробы. В диагностике большинства аллергических заболеваний используется постановка кожных диагностических проб.

    Кожные пробы на аллергены малоинформативны при обширном поражении кожи. Для диагностики лекарственной аллергии кожное тестирование используется крайне редко, поскольку обычно аллергию вызывает не сам препарат, а его метаболиты, определить которые невозможно. Из лекарств кожные пробы проводятся только с белковыми аллергенами - например, с инсулином, сыворотками и пенициллинами.

    Помимо местной реакции при проведении кожных проб могут возникнуть и общие реакции, как правило, через 10-180 минут после тестирования. Наличие общих реакций служит надежным доказательством чувствительности организма к аллергену.

    Перед тем как выявить аллерген, медики обязательно учитывают особенности проведения кожных проб:

    • Кожное тестирование проводят только в период ремиссии заболевания.
    • Кожное тестирование целесообразно выполнять не ранее чем через 3-4 недели после системной аллергической реакции.
    • Все виды кожных проб могут дать системную реакцию в виде анафилактического шока или обострения со стороны шокового органа.
    • Перед кожным тестированием на аллергию следует заранее отменить прием антигистаминных препаратов, причем срок отмены во многом зависит от вида препарата.

    Среди кожных проб выделяют аппликационные пробы, тест уколом (прик-тест), скарификационные и внутрикожные пробы.

    Проведение скарификационных кожных проб

    Скарификационные кожные пробы применяют при подозрении на сенисбилизацию к пыли (домашние клещи), пыльце, эпидермальным аллергенам и пище. Из всех видов кожных проб именно этот вид диагностики аллергии наиболее распространен в России.

    Как проводят такие тесты на аллергию в амбулаторных условиях? При проведении скарификационных проб на кожу предплечья капают водные растворы различных аллергенов (пылевых, пыльцевых, пищевых) на некотором расстоянии друг от друга. В местах нанесения капель слегка повреждают кожу, не затрагивая кровеносных сосудов. Через 10 минут капли удаляют, а еще через 10 минут проверяют, не появились ли эритема (сильное покраснение) и волдырь.

    Такие тесты довольно чувствительны, а техника их проведения менее стандартизована, чем проба уколом. Поэтому предпочтительнее проведение прик-теста.

    Прик-тест, конъюнктивальный и назальный тесты для диагностики аллергии

    Прик-тест - это метод диагностики аллергий путем прокола кожи через каплю раствора аллергена. Прокол должен быть достаточным по глубине, но не до крови. Оценку реакции проводят через 20 минут. Прик-тест редко дает ложноположительные реакции.

    Конъюнктивальный тест - это проба на аллергию путем закапывания разведенного аллергена в глазную щель. Она проводится при подозрении на аллергический конъюнктивит. Проводится крайне редко в связи с непредсказуемой возможной тяжелой реакцией со стороны глаз.

    Назальный провокационный тест - это аллергическое тестирование, которое проводится при подозрении на аллергический ринит. В носовой ход последовательно, через каждые 15-20 минут, закапывают несколько капель аллергена в возрастающих концентрациях (от 1/100000 до 1/10).

    Аппликационное аллергическое тестирование

    Аппликационные кожные тесты (патч-тесты) – это тест для диагностики аллергии, который используется при подозрении на контактный аллергический дерматит и фотоаллергические реакции. В последние годы обсуждается возможность их использования у больных атопическим дерматитом. Тесты проводятся на незатронутых повреждением участках кожи. Тест-аллергенами чаще всего служат различные химические вещества, в том числе и лекарства. Их применяют в чистом виде или в растворах в концентрациях, не вызывающих раздражения кожи у здоровых людей.

    Для постановки и оценки кожных тестов требуется 3-4 визита больного к врачу. В первый раз осуществляется нанесение аллергена на кожу. Обычно раствором аллергена смачивают кусочек марли и закрепляют его на коже предплечья, живота или спины. Результаты оценивают через 20 минут, 5-6 часов и 1-2 суток. Если на месте аппликации аллергена возникло выраженное жжение и зуд, пациент должен обратиться к врачу. В этом случае лоскут снимают раньше. Реакцию оценивают, пользуясь специальной шкалой.

    Анализ на выявление аллергена проведением внутрикожных и провокационных проб

    Внутрикожные пробы (подкожные инъекции аллергена) почти не используются в диагностике. Проведение внутрикожных проб проводится очень редко из-за высокого риска системной реакции.

    Провокационные пробы – это тестирование на аллергию методом выявления сенсибилизации (чувствительности), основанное на непосредственном введении аллергена в орган-мишень. Наиболее достоверный метод аллергологической диагностики, однако, и наиболее опасный. Предсказать реакцию больного на провокацию невозможно, поэтому требуется наличие строгих показаний для ее проведения. Так же как и кожные пробы, с аллергенами, провокационные пробы могут проводиться только в период полной ремиссии заболевания. По способу введения аллергена различают назальные, конъюнктивальные и ингаляционные провокационные пробы. У больных с пищевой аллергией подозреваемый пищевой продукт дается больному через рот.

    Основное преимущество провокационных проб перед кожными, заключается в большей достоверности результатов. Недостатки же - в повышенном риске тяжелых аллергических реакций, сложность с количественной оценкой результатов. Кроме того, в один день можно провести пробу только с одним аллергеном.

    Какие методы наиболее эффективны в диагностике причин аллергии

    Когда Вы обнаруживаете у себя или своих близких расстройства здоровья, которые могут быть симптомами аллергии, необходимо обратиться к терапевту или дерматологу (в случае, когда симптомами являются кожные реакции).

    Для лечения у специалиста аллерголога требуется направление, которое может быть выдано семейным врачом или дерматологом.

    Диагностические симптомы аллергии

    В первую очередь, самое главное, это интервью – он включает в себя определение семейной предрасположенности к образованию аллергических заболеваний и склонности к аллергическим реакциям в прошлом.

    Врач спрашивает о симптомах заболеваниях: сезонные или круглогодичные риниты пазух носа, конъюнктивит, крапивница, одышка, понос, запор.

    Тест на аллергию методом Прик-тест

    National Institute of Allergy and Infectious Diseases, public domain

    Предметное исследование пациента, указывающее на возникновение аллергии , является показанием к выполнению диагностических обследований, выявлению аллергена.

    Диагностика аллергии позволяет начать эффективное лечения и снижает тягость симптомов аллергии, поэтому не стоит пренебрегать аллергической реакцией и рассчитывать на то, что болезни пройдут сами собой.

    Диагностика аллергических заболеваний

    Что делать, если вы заметили проявления аллергии у вашего ребенка? Это может быть насморк, чиханье, сыпь и зуд кожи, отеки век и губ в ответ на контакт с пыльцой растений, животными и насекомыми, продуктами питания или домашней пылью. Склонные к аллергии дети обычно сенсибилизированы к множеству аллергенов. Знать к каким именно родителям нужно для того, чтобы по возможности удалить их из среды обитания ребенка. Прекращение контакта с аллергеном – один из основных этапов лечения любого аллергического заболевания. Сегодня мы поговорим о методиках, применяемых для их диагностики.
    Тестирование с диагностическими аллергенами проводит доктор-аллерголог в условиях аллергологического кабинета. Перед этим с родителями и ребенком ведется беседа, в ходе которой собирается подробная информация о течении заболевания. Будьте готовы ответить на вопросы доктора о первых симптомах, длительности, предполагаемых провоцирующих факторах, применяемых ранее лекарствах, других заболеваниях ребенка.

    Далее проводится осмотр и назначается первичное обследование. Нужно сдать кровь и мочу для общего анализа, пройти флюорографию и ЭКГ. Будьте готовы к тому, что потребуется консультация дерматолога, оториноларинголога, невропатолога. Для диагностики аллергии у детей применяют кожные пробы и провокационные аллергические тесты. Существуют противопоказания к их проведению:

    Острая фаза аллергического или любого другого заболевания;
    острая инфекция любой локализации;
    проведение глюкокортикостероидной или антигистаминной терапии;
    декомпенсированное состояние при болезнях внутренних органов.

    Когда же лучше выполнять пробы с аллергенами? Подозреваемую сенсибилизацию к пыльце диагностируют зимой за несколько месяцев до начала массового цветения, к бытовым аллергенам – летом, к аллергенам животных – через несколько месяцев после того, как устранен с ними контакт. То есть специфическая диагностика проводится во время наименьших проявлений аллергии, а лучше при полном их отсутствии.  

    Скарификационные пробы:

    Методика заключается в оценке реактивности кожи при контакте с различными антигенами. Для пробы используют диагностические аллергены в малом разведении (10000 PNU). Кожа волярной поверхности предплечья обрабатывается раствором антисептика. От лучезапястного сустава отступают 5 см и делают стерильным скарификатором первую насечку. На нее наносят 0,01% раствор гистамина, чтобы оценить нормальный ответ кожных покровов. Отступив 5 см, новым скарификатором делают еще насечку и наносят контрольную жидкость, чтобы зафиксировать для сравнения отрицательную реакцию. Далее на расстоянии 5 см друг от друга наносят капли аллергенов. В каждой капле своим скарификатором делают 2 параллельные насечки длиной до 5 мм. Результат оценивают спустя 20 мин.
    Реакцию кожи на экзогенный антиген в виде волдыря над зоной гиперемии считают положительной и характеризуют по шкале от + до ++++. Наличие волдыря больше 5 мм и псевдоподий говорит о резкоположительной реакции (+++ и ++++).

    Прик-тест (проба уколом):

    Более современная и чувствительная методика. На кожу предплечья с внутренней стороны наносятся капли аллергенов, растворителя и 0,1 % гистамина на расстоянии 2-4 см друг от друга. Капли прокалывают иглой из стандартного одноразового набора. Время оценки результата короче: на гистамин – через 10 мин, пыльцевые аллергены – 15 мин. Шкала оценки подобна таковой для поверхностных проб.

    Внутрикожная проба:

    При сомнительных результатах поверхностных кожных проб у детей с предполагаемой сенсибилизацией к определенным антигенам их вводят внутрикожно с помощью инсулиновых шприцов.  
    Простерилизовав кожу волярной поверхности предплечья, поочередно вводят 0, 02 мл жидкости (сначала контрольной, затем испытуемых аллергенов). Разведение препарата аллерголог подбирает индивидуально: начиная с 1 PNU и заканчивая 1000 PNU. Регистрацию результата пробы проводят через 20 мин с помощью шкалы плюсов. О резкоположительном ответе говорит волдырь с псевдоподиями размером более 15 мм на фоне покраснения кожи.

    Провокационные тесты:

    Бывают дети, у которых из-за сильной реакции капилляров кожи на механическое повреждение скарификационная проба дает ложноположительный результат. В таких случаях аллерголог может порекомендовать назальное капельное или ингаляционное введение аллергена. Тестирование должно проводиться лишь в узкоспециализированном стационаре, где при возникновении анафилактической реакции ребенку окажется немедленная помощь.
    Капельный тест показан при рините, вызванном пыльцой растений или домашней пылью. В одну ноздрю сперва закапывают 3 капли жидкости-контроля. Если спустя 15 мин никакой реакции не возникло, капают 3 капли аллергена в разведении, при котором возникла ложноположительная реакция внутрикожного теста (волдырь до 4 мм, что рассасывается медленнее, чем в контроле). Если реакции слизистой носа через 15 мин не последовало, концентрацию увеличивают. Провокационный назальный тест положителен при появлении чихания, чувства заложенности носа, слизистых выделений.

    Лабораторные методики:

    Позволяют определять моноклональные Ig E в период обострения аллергии, при высокой активности аллергического ответа. Широко применяется у детей. С помощью сертифицированных диагностиков в крови определяют специфические иммуноглобулины к предполагаемым антигенам.

    PRIST – метод определяет концентрацию в сыворотке неспецифического Ig E с помощью тест-полоски, пропитанной радиоиммуносорбентом.  

    RAST – методика основана на связывании специфического Ig E сыворотки с аллергеном, зафиксированном на тест-пластинке. Общий Ig E отмывают. К содержимому добавляют меченые I125   антитела к Ig Е. Образовавшееся радиоактивное соединение фиксирует сцинтилляционный счетчик.

    ИФА – сыворотку крови ребенка наносят на специальную поверхность, на которой адсорбированы антигены (полистирольный планшет или микроцеллюлозные диски). Чтобы определить концентрацию специфических Ig E добавляют к ним меченые антитела и соответствующие реагенты, которые воспроизводят реакцию в цвете. Ее интенсивность оценивается фотометрически.
    Реакция выявления специфических Ig E – современная аллергодиагностика, которой должно отдаваться предпочтение. Однако в некоторых клинических случаях не потеряли своей актуальности тесты для диагностики антителзависимых реакций, реакций замедленного типа.

    По статистике ВОЗ, аллергия имеется у 40% населения. И это объяснимо: воздух, вода и почва планеты перенасыщены вредными веществами, пища давно перестала быть чистой и простой по составу, применение химии в быту превысило все разумные пределы.

    С каждым днем у аллергологов и иммунологов появляется все больше пациентов. Немаловажное значение при этом имеет наследственный фактор: доказано, что дети аллергиков имеют 70%-ный шанс стать аллергиками, если этим недугом страдают оба родителя, если же только отец или мать - вероятность снижается до 33%, что тоже немало.

    Как возникает аллергическая реакция

    Это повышенная чувствительность организма к определенному веществу, будь то лекарство, продукт, шерсть, бытовая пыль, цветочная пыльца, плесень или микроб.

    Большинство людей никак не реагируют на то, что заставляет аллергика заливаться слезами, кашлять и покрываться сыпью. Иммунная же система больного дает на этот возбудитель () специфический ответ.

    В норме задача производимых иммунной системой антител (иммуноглобулинов) - противодействие болезнетворным микроорганизмам и вредоносным веществам. Однако стоит произойти сбою (причина которого зачастую доподлинно не известна), и эти антитела, не распознав «своих» и «чужих», запускают аллергическую реакцию на самые безобидные вещества. А благодаря механизмам «запоминания», в следующий раз, при повторном попадании этого компонента в организм, иммунитет выдает усиленный ответ, который проявляется полным набором выраженных аллергических симптомов.

    Что такое аллергены

    По своей природе аллергены - это чужеродные белки и липиды, а также полисахариды животного и растительного происхождения.

    В организм человека антигены могут проникнуть несколькими путями:

    • Через кровь (например, ужалило насекомое или сделана инъекция и последовала аллергическая реакция на введенное вещество).
    • Посредством вдыхания (в воздухе присутствовали аллергены).
    • Энтерально (аллерген поступил с пищей, водой).
    • Через кожу и слизистые оболочки.

    Классификация аллергенов

    Существует несколько классификаций аллергенов, одна из самых распространенных основана именно на способе попадания аллергена в организм:

    А. Ингаляционные аллергены:

    1. Бытовые аллергены:
      • бытовая и производственная пыль;
      • споры дрожжеподобных и плесневых грибов;
      • клещи домашней пыли, корм для рыб.
    2. Эпидермальные аллергены:
      • эпидермис, частицы эпидермиса, перхоть, волосы человека;
      • шерсть, секреты животных (слюна, моча, выделения сальных и потовых желез).
    3. Пыльцевые аллергены (пыльца растений):
      • деревьев (березы, дуба и др.);
      • злаковых культур;
      • сорных трав (амброзии, полыни обыкновенной, подсолнечника);
      • луговых трав (овсяницы луговой, ежи, мятлика).
    4. Частицы тел насекомых.

    Б. Энтеральные аллергены

    • Пищевые аллергены растительного происхождения (цитрусовые, орехи, кунжут, бобовые, злаки, томаты и др.);
    • Пищевые аллергены животного происхождения (рыба, молоко, яйца, морепродукты и др.).

    В. Лекарственные препараты.

    Г. Инсектные аллергены:

    • яды перепончатокрылых насекомых (пчел, ос, шмелей, шершней, оводов, слепней и др.);
    • слюна кровососущих насекомых (комаров, клопов, мошки и др.).

    Симптомы аллергии

    Хотя аллергия отличается многообразием проявлений, все же можно выделить типичные ее признаки, такие как:

    • насморк, заложенность носа, чихание, отек слизистой;
    • слезотечение, покраснение глаз, воспаление конъюнктивы, мутные выделения;
    • затруднение дыхания, одышка, бронхиальный спазм, хрипы и др.;
    • покраснение кожи, сыпь, зуд, шелушение;
    • тошнота, рвота, диарея;
    • головная боль.

    Более подробную информацию о симптомах аллергологических заболеваний можно найти на нижеследующих страницах сайта:

    Из чего состоит аллергологическое обследование

    После сбора анамнеза направляет пациента на необходимые исследования.

    В борьбе с аллергией роль диагностики первостепенна, ведь определение аллергена, вызвавшего патологическую реакцию иммунной системы, - залог того, что лечение принесет желаемые плоды.

    Возможно двумя методами:

    • кожные пробы;
    • лабораторные тесты.

    Кожные пробы

    На чувствительную кожу внутренней стороны предплечья одноразовым инструментом наносятся царапины (скарификационный тест) или делаются неглубокие уколы (прик-тестирование). Далее исследуется реакция поврежденного участка на самые распространенные аллергены, которые наносятся капельно. Покраснение, отек, иной видимый отклик кожи сигнализирует о наличии аллергии на определенное вещество.

    Важно! Кожные пробы проводят в период ремиссии заболевания во избежание искажения результатов.

    Иногда кожные пробы оказываются не показательными или ложноположительными - например, у пациента выявилась повышенная чувствительность капилляров кожи к механическому раздражению или аллергия на консервирующие компоненты раствора с аллергенами.

    Лабораторные исследования

    В ходе этих тестов исследуется сыворотка крови или цельная кровь.

    Определение аллергоспецифических lgE:

    • RAST (радиоаллергосорбентная проба). С ее помощью устанавливается наличие антител нескольких классов: IgE, IgM, IgG.
    • ИФА (иммуноферментный анализ) также дает возможность определить присутствие и активность иммуноглобулинов E, G, M.
    • РПГА, пассивная гемагглютинация.
    • РТМЛ, торможение движения лейкоцитов.

    Аллергологическая диагностика в клинике «МедикСити»

    В нашей клинике вы можете пройти , включающее все самые современные методы диагностики.

    Аллергологическое обследование:

    • Общий IgE и ECP;
    • Общий IgE и ECP;
    • Иммуноглобулин Е;
    • Эозинофильный катионный белок;
    • Микроскопическое исследование на эозинофилы.

    Профессиональные аллергены, определение специфических IgE:

    • Латекс;
    • Формальдегид/формалин.

    Определение специфических IgG:

    • Скрининг ингаляционных аллергенов, определение специфических IgE;
    • Скрининг бытовых аллергенов - домашняя пыль (D. pteronyssimus, D. farinae, таракан);
    • Скрининг аллергенов постельного пера (перо гуся, перо курицы, перо утки, перо индюка);
    • Скрининг аллергенов микроскопических грибов (Aspergillus fumigatus, Alternaria tenuis, Cladosporium herbarum, Penicillium notatum, Candida albicans);
    • Скрининг аллергенов смеси перьев птиц (перо волнистого попугая / Melopsittacus undulates, перо попугая / Psittacidae spp., перо канарейки / Serinus canaries);
    • Скрининг аллергенов трав №1 (ежа сборная, овсяница луговая, рожь многолетняя, тимофеевка, мятлик луговой);
    • Скрининг аллергенов трав №2 (свинорой пальчатый, плевел, тимофеевка луговая, мятлик луговой, гречка заметная, сорго);
    • Скрининг аллергенов трав №3 (колосок душистый, плевел, тимофеевка луговая, рожь посевная, бухарник шерстистый);
    • Скрининг аллергенов трав №4 (колосок душистый, плевел, тростник обыкновенный, рожь посевная, бухарник шерстистый);
    • Скрининг аллергенов растений (амброзия высокая, полынь обыкновенная, нивяник, одуванчик, золотарник);
    • Скрининг аллергенов раннецветущих деревьев (ольха серая, лещина, вяз, ива, тополь);
    • Скрининг аллергенов позднецветущих деревьев (клен ясенелистный, береза бородавчатая, дуб, бук крупнолистный, грецкий орех)

    Скрининг пищевых аллергенов, определение специфических IgE

    • Фрукты (банан, апельсин, яблоко, персик);
    • Орехи (арахис, американский орех, фундук, миндаль, кокосовый орех);
    • Рыба (треска, креветки, синяя мидия, тунец, лосось);
    • Овощи (помидор, шпинат, капуста, красный перец);
    • Мясо (свинина, говядина, курятина, баранина);
    • Детская пищевая панель №1 (яичный белок, коровье молоко, пшеница, треска, арахис, соя);
    • Детская пищевая панель №2 (треска, пшеница, соя, фундук).

    В последние годы отмечается значительный рост аллергических заболеваний, особенно среди населения крупных индустриальных центров и мегаполисов, что диктует необходимость постоянного поиска новых диагностических приемов и методов лечения аллергии.

    Диагноз ставится на основании физикальных, а также лабораторных, инструментальных и других методов общеклинического и аллергологического обследования.

    Особое место среди методов специфического аллергологического обследования занимают так называемые провокационные тесты, направленные на выявление ответной реакции на специфический раздражитель — аллерген.

    Условия проведения аллергологического тестирования

    Провокационные тесты с использованием аллергенов может проводить исключительно специалист — аллерголог-иммунолог, владеющий практическими навыками проведения подобных исследований, способный быстро и грамотно провести лечебные мероприятия при возникновении системных реакций.

    Возможность развития системных реакций при проведении такого тестирования делает данную процедуру опасной, поэтому ее следует осуществлять только в условиях специализированного кабинета или стационара, оборудованных всем, что необходимо для купирования системных реакций. Провокационные тесты имеют свои показания и противопоказания, которые нужно учитывать при назначении подобных методов диагностики.

    Наиболее распространенные методы аллергологического тестирования

    Для проведения специфического провокационного тестирования используются стандартизированные лечебно-диагностические аллергены, прошедшие регистрацию в России и допущенные к применению. Основные группы лечебно-диагностических аллергенов, применяемых на данный момент в России для диагностики немедленной аллергии, следующие: пыльцевые аллергены; аллергены домашней и библиотечной пыли; аллергены клещей домашней пыли; аллергены эпидермиса животных; аллергены из пера и пуха птиц; пищевые аллергены; инсектные аллергены; бактериальные и грибковые аллергены.

    Основная цель провокационных тестов — выявить наличие гиперчувствительности к тому или иному аллергену, установить ее степень, а также подобрать спектр аллергенов для дальнейшего проведения аллерген-специфической иммунотерапии.

    При проведении тестирования производится нанесение на кожу или слизистые конъюнктив либо дыхательного тракта одного или нескольких разведений аллергена, после чего оценивается выраженность реакции в ответ на этот раздражитель. Основные методы провокационного аллергологического тестирования: кожный (в том числе аппликационный); назальный; конъюнктивальный; ингаляционный; сублингвальный.

    Кожное тестирование

    Кожное тестирование — наиболее доступный и высокоспецифичный метод выявления гиперчувствительности как немедленного, так и замедленного типа.

    Данный метод тестирования имеет противопоказания, которые также необходимо учитывать и при применении других провокационных тестов.

    Противопоказания к проведению кожного тестирования: обострение основного заболевания; тяжелое, нескомпенсированное течение бронхиальной астмы; острые интеркуррентные инфекции (ОРЗ, ангина, пневмония и др.); декомпенсация заболеваний внутренних органов (печени, почек, сердечно-сосудистой системы, эндокринной системы, крови и др.); обострение очагов хронической инфекции. Активная фаза хронических инфекционных заболеваний (туберкулеза, сифилиса, бруцеллеза и др.); аутоиммунные заболевания (СКВ, склеродермия, ревматоидный артрит, дерматомиозит и др.); злокачественные новообразования; психические заболевания; беременность и лактация; синдром приобретенного иммунодефицита.

    С целью диагностики одной из самых распространенных форм немедленной аллергии — атопии — применяют скарификационные и prick-методы кожного тестирования. Для диагностики гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) используют внутрикожные тесты с бактериальными и грибковыми аллергенами, для общей оценки ГЗТ возможно проведение кожных тестов с туберкулином и бруцеллином. Реакция оценивается через 24—48 ч. И в том и в другом случае используется тест-контрольная жидкость как отрицательный и раствор гистамина как положительный контроль.

    Кожное тестирование с определенной долей вероятности может быть неинформативным (ложноположительные или ложноотрицательные результаты) по целому ряду причин — неправильное хранение аллергенов, снижение кожной реактивности, нарушения техники проведения кожного тестирования и др. Поэтому, как и другие виды провокационного тестирования, кожные тесты можно рассматривать в качестве уточняющего метода диагностики. При этом необходимо также учитывать, что по результатам кожного тестирования можно установить лишь наличие сенсибилизации (повышенной чувствительности организма к определенному аллергену). Для того чтобы поставить заключительный диагноз, необходимо установить четкую связь между наличием данной сенсибилизации и клиническими проявлениями заболевания, т. е. подтвердить, что именно этот аллерген ответственен за появление симптомов аллергии.

    Для оценки степени чувствительности пациента к данному аллергену (а также с целью подбора начальной дозы лечебного аллергена для проведения аллерген-специфической иммунотерапии) проводится аллергометрическое титрование, т. е. тестирование с разными разведениями аллергена. Исследование осуществляют путем постановки кожных проб с различными разведениями аллергенов.

    Кожные тесты можно проводить только с использованием специально разработанных диагностических аллергенов. Тесты с нанесением лекарственного препарата на кожу, внутрикожным или подкожным его введением с целью выявления лекарственной аллергии использовать не рекомендуется. Во-первых, это создает опасность возникновения системной реакции, а во-вторых, есть риск развития неспецифической местной воспалительной реакции, которая не может достоверно указывать на наличие или отсутствие аллергии.

    Методика постановки кожных аллергологических проб

    На кожу предплечья, предварительно обработанную спиртом, наносят каплю тест-контрольной жидкости, каплю 0,01% раствора гистамина, а также каплю аллергена (аллергенов). Раствор с гистамином является положительным контролем, а с тест-жидкостью — отрицательным. Расстояние между местами нанесения капель не менее 2,5-3 см. После этого производится повреждение эпидермиса в области каждой капли. При этом используют разные скарификаторы. Скарификацию также можно выполнять ланцетами — специальными скарификаторами с фиксированными на них аллергенами. При проведении prick-тестирования повреждение наносится посредством укола, при проведении скарификации — поверхностной царапины эпидермиса (при проведении этой процедуры важно не повредить кровеносные сосуды!). Реакции оценивают через 10-20 мин. Оценка скарификационных и prick-тестов по степени выраженности реакции приведена в и .

    Аппликационные кожные тесты

    Аппликационные кожные тесты (patch-tests) применяются для диагностики контактного аллергического дерматита и фотодерматита. Для проведения тестирования используются стандартизированные диагностикумы для выполнения аппликационных тестов: медикаменты местного действия, металлы, компоненты резины, клеящие вещества, антимикробные средства, ароматизаторы и другие вещества. Реакция оценивается через 48-72 ч.

    Назальный тест

    Назальный тест применяют для диагностики аллергического ринита. В один носовой ход закапывают 1 каплю тест-контрольной жидкости. При отсутствии какой-либо реакции в другой носовой ход последовательно закапывают по 1 капле десятикратного разведения аллергена (1:100, 1:10), затем цельный аллерген. Интервал между закапыванием аллергена с более высокой концентрацией должен составлять не менее 20-30 мин. Увеличение концентрации аллергена производится только при отсутствии реакции на предыдущее разведение. Тест считается положительным при появлении симптомов ринита. Проявления ринита также можно зафиксировать при передней риноскопии.

    Конъюнктивальный тест

    Конъюнктивальный тест используют для диагностики аллергического конъюнктивита. В нижний конъюнктивальный мешок глаза закапывают тест-контрольную жидкость. При отсутствии реакции в другой конъюнктивальный мешок последовательно закапывают по 1 капле аллергена в двукратных разведениях (1:2048, 1:1024, 1:512 и т. д., до 1:2). Интервал между нанесениями аллергена с разными концентрациями не менее 20-30 мин. Увеличение концентрации аллергена производится только при отсутствии реакции на предыдущую концентрацию. Тест считается положительным при появлении симптомов конъюнктивита.

    Ингаляционный тест

    Ингаляционный тест применяют для диагностики бронхиальной астмы и проводят только в условиях стационара. Сначала оценивают показатели функции внешнего дыхания — ОФВ 1 (первоначально не менее 70% от должных величин). Затем ингалируют контрольную жидкость. Ингаляции можно проводить с помощью дозирующего струйного ингалятора. При отсутствии реакции производятся ингаляции аллергена в двукратных разведениях (1:1024, 1:512, 1:256 и т. д., до 1:16). Через каждые 10 мин после очередной ингаляции регистрируется ОФВ 1 . При снижении показателя более чем на 20% тест считается положительным. После проведения теста пациент должен оставаться под наблюдением врача 24 ч. В течение одних суток возможно проведение ингаляционного теста только с одним аллергеном.

    Сублингвальный тест

    Сублингвальный тест применяют для диагностики лекарственной и пищевой аллергии. При наличии в анамнезе пациента тяжелых реакций, предположительно связанных с исследуемым препаратом или пищевым продуктом, предпочтительнее использовать лабораторные методы исследования. Перед началом тестирования измеряют ЧСС, АД, осматривают полость рта. Затем 1/8 (1/4) таблетки (или 2-3 капли растворенного лекарственного препарата) или натуральный пищевой продукт в разведении 1:10 помещают под язык пациента на 5-15 мин. Тест считается положительным при возникновении местной воспалительной реакции на слизистой оболочке полости рта или системной реакции. После тестирования больной должен находиться под наблюдением врача в течение суток. За этот период времени врач проводит мониторинг состояния сердечно-сосудистой и дыхательной систем пациента.

    Реакции при проведении аллергологического тестирования

    Возникновение местной аллергической реакции при проведении аллергологического тестирования является ожидаемой, однако, учитывая наличие провокации, подобный метод обследования сопряжен и с опасностью появления системных реакций, которые требуют принятия немедленных мер. Возникновение подобных осложнений при проведении тестирования возможно как в первые секунды (минуты), так и часы, а в некоторых случаях — и сутки.

    Легкие признаки системной реакции: боли в суставах, головная боль, ощущение дискомфорта.

    Умеренные признаки системной реакции: легкие проявления ринита, конъюнктивита или бронхиальной астмы (пиковая скорость выдоха не ниже 60% от должных величин или от показателя пациентов в период ремиссии). Симптомы хорошо контролируются соответствующими лекарственными препаратами (Н 1 -блокаторами или ингаляционными β 2 -агонистами).

    Выраженные признаки системной реакции: крапивница, отек Квинке, нарушение бронхиальной проводимости (с показателем пиковой скорости выдоха ниже 60% от должной величины или от показателя пациента в период ремиссии), симптомы контролируются соответствующим лечением.

    Угрожающие жизни состояния — анафилактический шок, отек жизненно важных органов (отек гортани) — требуют интенсивной терапии.

    Основными причинами развития подобных реакций могут быть: несоблюдение требований, предъявляемых в отношении противопоказаний к провокационному тестированию; использование нестандартизированных аллергенов или препаратов, которые хранились без соблюдения соответствующих требований; нарушения технологии проведения тестирования; высокая индивидуальная чувствительность пациента.

    Объем терапевтической помощи при возникновении системных реакций зависит от ее выраженности.

    Во всех случаях возникновения системных реакций при проведении аллергологического тестирования необходима госпитализация для стационарного наблюдения и лечения пациента. Лечение тяжелых системных реакций необходимо проводить в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии.

    При возникновении системных реакций первое, что необходимо сделать,— прекратить введение (аппликацию, ингаляцию и т. д.) аллергенов. После этого следует начать проведение терапии, направленной на купирование реакции: введение системных антигистаминных препаратов (Н 1 -блокаторов), а также системных глюкокортикостероидов парентерально. В случае возникновения бронхообструктивного синдрома применяются β 2 -агонисты, холинолитики (ингаляционно), парентеральное введение метилксантинов, системных ГКС с учетом степени выраженности реакции.

    Анафилактический шок — одно из самых серьезных проявлений аллергической реакции немедленного типа, сопровождающееся рядом системных нарушений и требующее оказания немедленной врачебной помощи. Время развития — от нескольких секунд до нескольких часов. Анафилактический шок может развиваться по разным сценариям. Клинические симптомы обусловлены сокращением гладких мышц, увеличением сосудистой проницаемости, дисфункцией эндокринных желез, нарушением свертываемости крови. Ведущими в клинической картине анафилактического шока являются кардиоваскулярные и респираторные нарушения, одно из которых может превалировать над другим.

    В более легких случаях анафилактический шок начинается с появления предвестников — чувства тревоги, страха, слабости, ощущения жара. Могут появляться кожный зуд, высыпания по типу крапивницы, эритема, отек Квинке, осиплость голоса (вплоть до афонии), затруднение глотания, головокружение, головная боль, шум в ушах, онемение и покалывание пальцев, языка и губ, симптомы ринита и конъюнктивита, боли в животе, пояснице и в области сердца. При осмотре — бледность кожных покровов, иногда с синюшным оттенком. Наблюдаются одышка, стридорозное дыхание, хрипы; рвота, непроизвольная дефекация и мочеиспускание. Снижение АД на 30-50 мм рт. ст., тоны сердца глухие, пульс нитевидный. Тахикардия, тахиаритмия. Потеря сознания отмечается не сразу или вовсе не происходит.

    При анафилактическом шоке средней степени тяжести указанные выше симптомы носят более выраженный характер. Потеря сознания происходит быстро, нередко отмечаются тонические и клонические судороги, холодный липкий пот, цианоз губ, расширение зрачков. Тоны сердца глухие, сердечный ритм неправильный, нитевидный, АД не определяется.

    При тяжелом течении — развитие стремительное. Потеря сознания немедленная. Тоны сердца не выслушиваются, АД не определяется. Дыхание не выслушивается из-за полной обструкции дыхательных путей.

    Лечебные мероприятия при возникновении анафилактического шока

    Лечебные мероприятия при возникновении анафилактического шока должны проводиться незамедлительно. Ввести подкожно 0,3-0,5 мл 0,1% раствор адреналина. Место нанесения аллергена (по возможности) обколоть 0,1% раствором адреналина или норадреналина в дозе 0,1-0,3 мл с 4-5 мл физиологического раствора. Можно приложить лед. Необходимо начать внутривенное капельное введение: 300 мл 5% раствора глюкозы + 1 мл 0,1% раствора норадреналина. Альтернативно: введение допамина (от 300-700 мкг/мл, но не более 1500 мкг/мл) с постепенным снижением. При необходимости можно продолжать введение прессорных аминов (0,1% раствор адреналина подкожно) с интервалами 5-10 мин. Длительность введения определяется гемодинамическими показателями. Внутривенное капельное введение системных ГКС-препаратов: гидрокортизона 250 мг, или преднизолона 90-120 мг, или дексаметазона 8-32 мг. При возникновении бронхообструктивного синдрома ввести эуфиллин 10,0 мл 2,4% раствора в/в на физиологическом растворе. При отеке легких дозу ГКС можно увеличить, а также ввести в/в 0,5 мл 0,5% строфантина с 10 мл 40% глюкозы. При необходимости проводится: интубация или трахеостомия и перевод на ИВЛ, оксигенация — ингаляция увлажненного кислорода с помощью носового катетера (скорость — 5-10 л/мин). Применение диуретиков показано только при нормализации АД. При систолическом АД выше 90 мм рт. ст. могут быть введены антигистаминные препараты: тавегил — 2,0 мл. Осуществляется введение плазмозамещающих препаратов, жидкости в/в капельно или струйно. Возможно введение декстранов. Введение ГКС и антигистаминных препаратов продолжить до улучшения состояния пациента. Отмена вышеуказанных препаратов производится постепенно и сообразно объективным признакам стабилизации. Необходим постоянный мониторинг функции дыхательной и сердечно-сосудистой систем. Возможно развитие осложнений (инфаркт миокарда, отек легких, отек мозга и проч.).

    Длительность лечения варьирует от нескольких часов до нескольких суток.

    Таким образом, провокационное тестирование с использованием диагностических аллергенов продолжает оставаться важной, а в ряде случаев незаменимой частью специфического аллергологического обследования. Провокационные методы позволяют оценить аллергологический статус пациента, проводить подбор и оценку эффективности терапии, осуществлять динамическое наблюдение за состоянием пациента.

    В последнее время во всем мире проводится работа, направленная на создание новых диагностических препаратов на основе аллергенов. Однако основной принцип подобной диагностики остается неизменным: назначение, проведение и оценка результатов провокационного аллергологического тестирования должны производиться исключительно специалистом — аллергологом-иммунологом.

    Е. Н. Медуницына, кандидат медицинских наук НИИ аллергологии и иммунологии, Москва

    15.1. Характеристика микробиологических и иммунологических лабораторий

    Вся работа с микробами проводится в лабораториях, которые в зависимости от основных задач могут быть научно-исследовательскими, диагностическими или производственными.

    В системе органов здравоохранения имеются:

    Клинико-диагностические лаборатории общего или специального (биохимическая, бактериологическая, иммунологическая, цитологическая и др.) типов, входящие в состав больниц, поликлиник, диспансеров и других лечебно-профилактических учреждений;

    Бактериологические лаборатории Госсанэпиднадзора (ГСН);

    Санитарно-бактериологические лаборатории ГСН;

    Санитарно-химические лаборатории ГСН;

    Центральные (ЦНИЛ), проблемные, отраслевые, учебные лаборатории вузов;

    Специализированные лаборатории (особо опасных инфекций и др.).

    В настоящее время лаборатории и более крупные лабораторные учреждения (отделы, институты, производственные предприятия), как правило, специализированные и работают с той или иной группой микробов.

    С вирусами работают в вирусологических лабораториях, располагающих соответствующим оборудованием и использующих спе- циальные методы исследования. Существуют микологические и протозоологические лаборатории. Специализированный характер

    приобретают и бактериологические лаборатории, в которых работа концентрируется на определенных группах бактерий, например риккетсиозные, туберкулезные, лептоспирозные, анаэробные и др. Иммунологические исследования проводятся в иммунологических лабораториях, хотя отдельные виды исследований могут выполняться и в микробиологических лабораториях, например серодиагностика инфекционных болезней.

    Лабораторная работа с патогенными микробами проводится в специально оборудованных лабораториях, обеспечивающих режим работы и технику безопасности, исключающих возможность заражения персонала и утечку микробов за пределы лаборатории.

    Необходимость четкой регламентации условий работы с микробами, в различной степени опасными для сотрудников ла- бораторий и окружающего населения, обусловила разработку классификации микробов, разбив их на 4 группы по степени их биологической опасности (классификация ВОЗ). В России в соответствии с рекомендациями ВОЗ патогенные микробы также делят на 4 группы: 1-я группа - возбудители особо опасных инфекций; 2-я группа - возбудители высококонтагиозных эпидемических заболеваний человека; 3-я группа - возбудители инфекционных болезней, выделяемые в самостоятельные нозологические группы; 4-я группа - условно-патогенные микробы - возбудители оппортунистических инфекций. Нумерация групп микробов, принятая в России, отличается обратным порядком от классификации ВОЗ, где к 1-й группе относятся микробы самой низкой патогенности, а к 4-й группе - особо опасные.

    В соответствии с делением микробов на группы по степени биологической опасности лаборатории также делят на категории. По номенклатуре ВОЗ выделяют 3 категории микробиологических лабораторий:

    Базовые (основные или общего типа) лаборатории, которые в связи с конкретными особенностями работы могут быть оборудованы различными защитными устройствами;

    Режимные (изолированные) лаборатории и лаборатории особого режима (максимально изолированные).

    Безопасность работ в лабораториях всех категорий обеспечивается выполнением распорядка и правил работы в лаборатории, выполнением требований к лабораторным помещениям и их оснащению, обеспечением лабораторий соответствующим оборудова-

    нием, медицинским наблюдением за состоянием здоровья сотрудников, обучением и тренировкой персонала технике безопасности в лаборатории.

    15.2. Оснащение микробиологических и иммунологических лабораторий

    Помещения базовой лаборатории должны быть просторными для обеспечения безопасного проведения лабораторной работы. Стены, потолок, пол должны иметь гладкую, легко моющуюся поверхность, непроницаемую для жидкостей, устойчивую к дезинфектантам, обычно используемым в лаборатории. Поверхность рабочих столов должна быть водонепроницаемой, устойчивой к дезинфектантам, кислотам, щелочам, органическим растворителям и умеренному нагреванию. Лабораторная мебель должна быть прочной. Пространство под столами и между мебелью должно быть легкодоступно для уборки. В лаборатории должен находиться автоклав для обеззараживания отходов.

    Оборудование базовой лаборатории должно ограничивать или предупреждать контакт микробиолога с инфекционным матери- алом, должно быть изготовлено из прочных материалов, непроницаемых для жидкостей, устойчивых к коррозии. Оборудование должно быть сконструировано и установлено так, чтобы оно легко подвергалось чистке, обеззараживанию и проверке.

    Лабораторию оснащают микроскопом, автоклавом, термостатами, сушильными, стерилизационными шкафами, аппаратом для свертывания сыворотки, дистиллятором, центрифугами, лабораторными весами, рН-метром, ФЭК, магнитной мешалкой, моечной ванной.

    Рабочие помещения лаборатории должны быть снабжены подводкой холодной и горячей воды, электричеством, вакуумом, кис- лородом, воздухом высокого давления и т.п. В некоторых кабинетах оборудуются боксы и вытяжные шкафы.

    В число обязательных помещений входят лаборатории кишечных, капельных инфекций, санитарно-бактериологическая, се- рологическая, а также вспомогательные помещения: средоварка, моечная, стерилизационная (чистая и грязная), регистратура, кладовые, санузел для сотрудников, виварий. В лабораториях с пунктами для обследования на носительство микроорганизмов дополнительно оборудуют приемную, процедурную, туалеты для забора

    материала. Располагают помещения таким образом, чтобы грязный и чистый потоки не перекрещивались и не соприкасались.

    В отношении помещений режимных лабораторий должны соблюдаться те же требования, которые предусмотрены для базовой лаборатории. Кроме того, лаборатория этого типа должна быть отделена от тех частей здания, где передвижение сотрудников не ограничивается. Устройства для мытья рук должны быть снабжены приспособлениями для открывания воды ножной педалью или локтем. Окна должны быть закрыты и заклеены. Входные двери в лабораторные помещения должны быть самозакрывающимися и запирающимися на замок. Вытяжная вентиляция проектируется так, чтобы наиболее низкое давление создавалось в помещениях самой высокой опасности инфицирования. В этом случае движение воздуха будет происходить из вспомогательных помещений в направлении основного рабочего помещения. Отработанный воздух выбрасывается в окружающую среду только после фильтрации через бактериальные фильтры. При оснащении режимных лабораторий оборудованием руководствуются рекомендациями, разработанными для базовых лабораторий, с тем дополнением, что вся работа с инфекционным материалом в них проводится в защитных боксах. В режиме максимально изолированных лабораторий существует ряд особенностей для обеспечения максимальной биологической безопасности персонала, населения и окружающей среды. Вход в лабораторию и выход из нее осуществляются через санитарный пропускник. При входе обязательно полное переодевание в специальную одежду, при выходе перед переодеванием обязательна целевая санитарная обработка (душ, дезинфектанты) персонала. Для снижения риска попадания инфекционного мате- риала в окружающую среду применяют боксирование. С помощью боксов (настольных, ламинарных) создают физические барьеры для предотвращения возможных контактов работающего персонала с инфекционным материалом.

    15.3. Правила работы в микробиологической лаборатории

    Основные правила работы в базовой лаборатории включают:

    Запрет работ с пипеткой при помощи рта;

    Запрет приема пищи, питья, курения, хранения пищи и применения косметических средств в рабочих помещениях;

    Поддержание чистоты и порядка;

    Дезинфекцию рабочих поверхностей не реже 1 раза в день и после каждого попадания на них заразного материала;

    Мытье рук персоналом после работы с заразным материалом, животными, перед уходом из лаборатории;

    Проведение всех работ таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозоля;

    Обеззараживание всех инфицированных материалов перед выбросом или повторным использованием.

    15.4. Принципы микробиологической диагностики инфекционных болезней

    Наиболее важное место в лабораторной диагностике инфекционных болезней занимает специфическая микробиологическая диагностика, которую проводят в бактериологической, вирусологической, иммунологической и других лабораториях. Она состоит из трех этапов: преаналитического, аналитического и постаналитического.

    Первым этапом микробиологической диагностики является преаналитический, включющий взятие материала для исследования. Выбор исследуемого материала определяется патогенезом и клинической картиной инфекционного заболевания. Исследуемый материал берут по возможности в асептических условиях, помещают в стерильную посуду и как можно быстрее доставляют в лабораторию (желательно в течение 1 ч). В некоторых случаях посев материала проводят у постели больного. Иногда допускается непродолжительное хранение материала в регламентированных условиях. Исследуемый материал сопровождается документом, в котором обязательно указываются время взятия, характер материала, его источник и точно определяется цель исследования.

    Материалом для исследования в медицинской микробиологии служат различные биологические и патологические жидкости организма (кровь, гной, моча, мокрота, ликвор, испражнения, рвотные массы, промывные воды и т.п.) и ткань - материал биопсии от живого или аутопсии от трупа. В санитарной микробиологии на исследование берут объекты окружающей среды (воздух, воду, пищевые продукты и т.п.) или смывы с них. При заборе материа-

    ла для микробиологического исследования необходимо соблюдать следующие правила:

    Материал берут непосредственно из очага инфекции или исследуют соответствующее отделяемое (гной, мочу, желчь и т.п.);

    Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования и его повторения в случае необходимости;

    Материал берут по возможности в начальном периоде болезни, так как именно в этот период возбудители выделяются чаще, их больше, они имеют более типичную локализацию;

    Материал берут до начала антимикробной химиотерапии или через определенный промежуток времени после приема антибактериального препарата, необходимый для его выведения из организма;

    Следует предупредить возможность попадания в материал антимикробных препаратов (дезинфектанты, антисептики, антибиотики);

    Транспортировку материала в лабораторию следует проводить в максимально короткие сроки, в условиях, исключающих гибель неустойчивых видов микробов, или помещать его в специальные транспортные среды;

    При транспортировке должны соблюдаться все правила биологической безопасности;

    К материалу прилагают сопроводительный документ, содержащий основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования (фамилия, имя, отчество больного, номер истории болезни, клинический диагноз и т.д.).

    15.5. Методы микробиологической диагностики

    Аналитический этап включает микроскопический, культуральный, биологический, серологический и аллергологический методы микробиологической диагностики.

    Микроскопический метод заключается в приготовлении препаратов (нативных или окрашенных простыми или сложными методами) из исследуемого материала и их микроскопии с применением различных видов микроскопической техники (световая, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная и др.). В бактериологии микроскопический метод получил название бактериоскопического, в вирусологии - вирусоскопического.

    Культуральный метод заключается в посеве исследуемого материала на искусственные питательные среды, культуры клеток или куриные эмбрионы с целью выделения и идентификации чистой культуры возбудителя или возбудителей. В бактериологии культуральный метод получил название бактериологического, в микологии - микологического, в протозоологии - протозоологического, в вирусологии - вирусологического.

    Биологический метод (экспериментальный или биопроба) заключается в заражении исследуемым материалом чувствительных лабораторных животных или других биологических объектов (куриные эмбрионы, культуры клеток). Его используют для выделения чистой культуры возбудителя, определения типа токсина, активности антимикробных химиотерапевтических препаратов и т.д.

    Серологический метод заключается в определении титра специфических антител в сыворотке крови больного, реже - в обнаружении микробного антигена в исследуемом материале. С этой целью используются иммунные реакции.

    Аллергологический метод заключается в выявлении инфекционной аллергии (ГЗТ) на диагностический микробный препараталлерген. С этой целью ставят кожные аллергические пробы с соответствующими аллергенами.

    Диагностическая ценность этих методов неравнозначна. Ведущим методом микробиологической диагностики является бак- териологический метод, так как он позволяет выделять и иден- тифицировать микроб-возбудитель, т.е. первопричину болезни. Остальные методы менее информативны, так как они позволяют обнаружить в организме изменения, обусловленные наличием в нем микроба. Второе место по значимости занимает серологический метод, поскольку взаимодействие антигена и антитела характеризуется высокой степенью специфичности. Информативность трех остальных методов невысокая, и они обычно служат дополнением к бактериологическому и серологическому методам. Так, микроскопия исследуемого материала далеко не всегда позволяет увидеть и идентифицировать микробы под микроскопом. Их удается обнаружить только при высокой обсемененности ими материала. Даже обнаружив бактерии под микроскопом, идентифицировать их до вида морфологически нельзя. Как известно, все видовое многообразие бактерий сводится к 4 основным морфологическим формам: кокки, палочки, извитые и ветвящиеся формы. Поэтому по микро-

    скопической картине можно весьма ориентировочно отнести увиденные бактерии к крупному таксону, например грамположительным коккам. Только в единичных случаях, когда бактерии имеют уникальную морфологию, микроскопически можно определить их родовую принадлежность. Информативность микроскопического метода грибов и простейших выше, так как грибы и простейшие, являясь эукариотами, имеют более крупные размеры и более характерную морфологию.

    Диагностические возможности биологического метода ограничены тем, что к большинству возбудителей антропонозных инфек- ций человека лабораторные животные невосприимчивы, поэтому вызвать у них экспериментальную инфекцию не представляется возможным.

    Возможности аллергологического метода ограничены тем, что большинство микробов в организме человека не вызывают ГЗТ.

    Поскольку микробиологические исследования являются одним из наиболее дорогих видов лабораторных исследований, перед ми- кробиологом стоит задача постановки достоверного микробиологического диагноза с наименьшей затратой времени, сил и средств. Поэтому для постановки диагноза используют 1-5 методов диагностики, чтобы выбранный набор методов гарантировал правильность ответа.

    Особое значение приобретают методы экспресс-диагностики, которые позволяют поставить микробиологический диагноз в течение короткого промежутка времени (от нескольких минут до нескольких часов) с момента доставки исследуемого материала в лабораторию. К числу экспресс-методов относятся РИФ, ИФА, РИА, ПЦР, использование биочипов, хроматография и др. Особенности диагностики анаэробных инфекций изложены в материалах диска.

    Наряду с традиционными классическими методами микробиологической диагностики в последние годы все большее значение приобретают молекулярно-биологические методы диагностики (ДНК-зонды, ПЦР, лигазная цепная реакция - ЛЦР, хроматография, электрофорез, иммуноблот, биочипы и др.).

    Молекулярно-биологические методы диагностики основаны на идентификации ДНК и РНК, специфичных для данного вида микробов, и включают гибридизацию на основе ДНК-зондов и диагностику на основе ПЦР.

    Постаналитический этап микробиологической диагностики заключается в клинической интерпретации результатов лабораторных исследований. При этом лечащий врач должен оценить этиологическое значение выделенных от больного микробов, скорректировать на основании данных микробиологического мониторинга проводимую больному эмпирическую антимикробную химиотерапию и др.

    15.5.1. Методы микробиологической диагностики бактериальных инфекций

    В бактериологии для обнаружения возбудителя в исследуемом материале используют бактериоскопический, бактериологический, биологический методы.

    Достоинствами бактериоскопического метода являются простота, быстрота, экономичность. Однако он находит ограниченное применение, так как может быть использован лишь при наличии каких-либо морфологических или тинкториальных особенностей возбудителя и достаточном его содержании в исследуемом материале. Данный метод является ориентировочным.

    Основной и самый точный метод диагностики бактериальных инфекций бактериологический, который используют почти при всех заболеваниях, несмотря на его недостатки: длительность исследования (от 4-5 дней до 2 мес), опасность (так как накапливается чистая культура возбудителя), сравнительную дороговизну. В том случае, если в исследуемом материале предполагается содержание возбудителя в достаточном количестве, посев материала производят на плотные питательные среды для получения изолированных колоний. При незначительном содержании микробов исследуемый материал прежде засевают на жидкие питательные среды - среды обогащения. Идентификацию выделенной чистой культуры производят по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, антигенным и токсигенным свойствам (в зависимости от вида возбудителя). Определение перечисленных свойств позволяет установить вид возбудителя. С целью эпидемиологического маркирования производят внутривидовую идентификацию выделенной культуры: определяют ее фаговар, биовар и др. Кроме того, для назначения рационального лечения, как правило, опре- деляют чувствительность выделенной культуры к антибиотикам.

    При микробиологической диагностике заболеваний, вызванных условно-патогенными микробами, представителями нормальной микрофлоры, обязательным является определение количества воз- будителей в исследуемом материале.

    Биологический метод неэкономичен, негуманен, поэтому находит ограниченное применение. В качестве экспериментальных животных используют белых мышей, морских свинок, кроликов, обезьян и других животных.

    Диагноз инфекционного заболевания возможно установить также с помощью серологического метода, позволяющего обнаружить либо специфические антитела в сыворотке больного, либо специфические антигены непосредственно в исследуемом материале. Антитела к возбудителю заболевания появляются, как правило, к концу первой недели болезни. Невозможность обнаружить их в первые дни заболевания является серьезным недостатком метода, особенно в тех случаях, когда заболевание протекает остро. Кроме того, при многих болезнях требуются изучение антителообразования в динамике и выявление увеличения количества антител, что также не позволяет быстро поставить диагноз. Недостатком метода является и то, что с его помощью нельзя точно идентифицировать возбудителя и определить его антибиотикограмму. Но в то же время это совершенно безопасный, относительно недорогой метод, позволяющий за короткое время поставить диагноз. В настоящее время при ряде болезней определяют не только количество, но и классы иммуноглобулинов.

    При некоторых заболеваниях серологический метод применяют для выявления специфических антигенов в исследуемом ма- териале. Поскольку специфические антигены, входящие в состав возбудителя, находятся в патологическом материале с первых минут болезни, этот вариант серологического метода применяют для ускоренной (в течение первого дня болезни) или даже экспрессдиагностики (в течение нескольких часов) инфекционных заболеваний.

    В качестве вспомогательного при небольшой группе инфекционных заболеваний используют аллергологический метод, по- зволяющий выявить повышенную чувствительность к специфическому антигену (аллергену), которым является возбудитель заболевания.

    15.5.2. Методы микробиологической диагностики вирусных инфекций

    В вирусологии методы лабораторной диагностики вирусных инфекций имеют свою специфику, учитывая особенности биологии вирусов. Используются вирусоскопический, вирусологический и серологический методы лабораторной диагностики.

    Вирусоскопический метод заключается в обнаружении вируса в исследуемом материале под микроскопом. Чаще используют электронный микроскоп, реже - люминесцентный. Световая микроскопия из-за ничтожно малых размеров вирусов практически не применяется. Лишь для обнаружения крупных вирусов, используя методы сверхокраски, можно применить световой микроскоп. Кроме того, с помощью светового микроскопа можно выявить внутриклеточные включения, которые образуются в пораженных клетках при некоторых инфекциях.

    Вирусологический метод заключается в заражении исследуемым материалом чувствительной биологической модели (лабораторные животные, куриные эмбрионы или культуры клеток), индикации вируса и его последующей идентификации. При заражении лабораторных животных индикация вирусов производится, как правило, по клинической картине болезни, патолого-анатомическим изменениям ориентировочно и окончательно, например, с помощью реакции гемагглютинации. Эта же реакция позволяет выявить вирусы в курином эмбрионе, видимых изменений при вскрытии которого, как правило, не наблюдается. В культуре клеток наличие вируса определяют по цитопатическому действию (в том числе образованию внутриклеточных включений), гемадсорбции, феномену бляшкообразования, реакции гемагглютинации, отсутствию изменения окраски индикатора. Идентификация вируса осуществляется с помощью серологических реакций (РПГА, РТГА, РН, РСК, ИФА и др.). Вирусологический метод позволяет точно определить природу возбудителя, но он требует достаточного времени (5-7 дней и более), значительных материальных затрат и небезопасен.

    Особенностью серологического метода в вирусологии является исследование парных сывороток. Первую сыворотку берут у больного в острый период в начале болезни, хранят при температуре 4-8 ?С, а вторую сыворотку берут через 10-14 дней. Сыворотки

    исследуют одномоментно. О болезни свидетельствует сероконверсия, т.е. нарастание титра антител во второй сыворотке по отношению к первой. Диагностической является сероконверсия в 4 раза и выше. Так как многие вирусные болезни протекают остро, этот вариант серологического метода обычно применяют для ретроспективной диагностики.

    Ведущим методом лабораторной диагностики вирусных инфекций является вирусологический.

    Ускоренная и экспресс-диагностика вирусных болезней производится так же, как при бактериальных инфекциях.

    15.5.3. Особенности микробиологической диагностики микозов

    Для диагностики грибковых инфекций обычно используют микроскопический метод. Микологический метод заключается в по- севе патологического материала на специальные питательные среды, выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам. Особенностью данного метода является его продолжительность - несколько недель из-за медленного роста грибов. Обнаружение антител при серологическом исследовании возможно со 2-4-й нед болезни. При некоторых заболеваниях выявляют специфические антигены в исследуемом материале. Аллергологический метод используют редко. Нередко при микозах применяют гистологический метод, заключающийся в обнаружении элементов гриба (споры, конидиальные головки и т.п.) в органах и тканях, пораженных грибами. С этой целью готовят гистологические тонкие или ультратонкие срезы тканей, окрашивают их специальными гистологическими и гистохимическими методами и исследуют с применением световой, а в случае необходимости и электронной микроскопии.

    15.5.4. Особенности микробиологической диагностики протозойных инфекций

    Микроскопическое исследование патологического материала заключается в приготовлении как нативных препаратов («толстая капля»), так и мазков, окрашенных по методу Романовского- Гимзе, и является основным методом диагностики заболеваний, вызванных простейшими. В некоторых случаях применяют серологический и аллергологический методы диагностики.

    15.6. Принципы иммунологической диагностики болезней человека

    Иммунодиагностика - раздел иммунологии, изучающий и разрабатывающий методы диагностики инфекционных и неинфекци- онных болезней, связанных с функцией иммунной системы.

    Многие инфекционные заболевания в настоящее время претерпели существенные изменения, что выражается в увеличении удельного веса легких, стертых и бессимптомных форм, росте аллергического компонента, высокой частоте микст-инфекций. Это затрудняет традиционную диагностику заболеваний, поэтому значимость иммунодиагностики, направленной на поиск антигенов возбудителя или специфических иммунных сдвигов в организме больного, возрастает.

    Под иммунореактивностью (иммунный статус, иммунный профиль) понимают способность иммунной системы к иммунному ответу в данный момент времени. Ее характеризуют концентрация иммуноглобулинов, количество лимфоцитов и лейкоцитов, соотношение Т- и В-клеток и функциональные показатели, в частности способность иммунокомпетентных клеток отвечать на стимуляцию.

    15.7. Контроль качества лабораторных исследований

    Важным элементом работы микробиологической и иммунологической лаборатории является получение точных и сопоставимых результатов анализов, для чего необходимо осуществлять контроль качества проводимых исследований. Контроль качества может быть внутрилабораторным и внешним.

    Внутрилабораторный контроль качества - система контрольных мер, которые проводятся в отдельной лаборатории персоналом этой лаборатории и направлены на обеспечение соответствующего качественного уровня работы лаборатории.

    Внешний контроль качества - система контрольных мер, которые проводятся в рамках единой Федеральной системы внешней оценки качества (ФСВОК) лабораторных исследований группами экспертов и направлены на обеспечение правильной организации технологических процессов производства лабораторных исследований.

    Федеральная система внешней оценки качества лабораторных исследований состоит из разделов, в рамках каждого из которых

    выполняется оценка качества определенного вида лабораторных исследований. В структуру ФСВОК входят экспертные группы по разработке и проведению внешнего контроля качества в различных видах лабораторных исследований.

    Задания для самоподготовки (самоконтроля)

    A. Назовите метод микробиологического исследования, позволяющий установить вид возбудителя:

    1. Аллергический.

    2. Микроскопический.

    3. Культуральный.

    4. Биологический.

    Б. Назовите основную задачу бактериологического метода исследования.

    B. У больного с подозрением на вирусную инфекцию на 7 день заболевания была взята сыворотка, в которой обнаружены специфические противовирусные антитела. Оцените достоверность полученного результата исследования.

    Г. Назовите тип лаборатории, в которую следует направить материал от больного с подозрением на особо опасную инфекцию.

    Всем больным, страдающим атопическим дерматитом, должно быть как можно раньше проведено аллергологическое обследование, которое практически не имеет противопоказаний, за исключением обострения основного или других заболеваний. Диагностику следует проводить также в случае наличия у пациента других «аллергосимптомов» (эпизоды персистирующего кашля, в том числе ночью, после физической нагрузки; зуд и отек глаз и/или заложенность носа, насморк и т. п.). Аллергологическое обследование является обязательным для тех больных, которым предполагается назначить профилактическое лечение (специфическую иммунотерапию/аллерговакцинацию).

    В целом аллергодиагностика имеет неоценимо важное значение с целью:
    а) ранней идентификации детей из группы риска развития аллергических заболеваний;
    б) назначения больному специфической терапии, в том числе элиминационной, соответствующей фармакотерапии, специфической иммунотерапии (аллерговакцинации).

    У детей объем аллергологического обследования зависит от их возраста, семейной отягощенности атопией, провоцирующих факторов, симптомов заболевания и т.

    п. История болезни включает данные о наследственной предрасположенности к аллергическим заболеваниям, погрешностях в питании беременной/кормящей матери, профессиональных вредностях у родителей, сроках введения прикорма и реакций на новый вид пищи у ребенка. Врач тщательно анализирует частоту и тяжесть симптомов заболевания, факторы окружающей среды (жилищно-бытовые условия, наличие животных, птиц, рыб в квартире, курение и т. д.), уточняет связь клинических проявлений с определенным сезоном года, местом пребывания ребенка (школа, вне дома); выявляет другие сопутствующие атопические заболевания (пищевая аллергия, аллергический ринит/конъюнктивит, бронхиальная астма). Особое внимание обращают на специфический аллергологический анамнез, который необходимо использовать для дальнейшей коррекции противоаллергической терапии, а также на аллергологический анамнез тех больных, у которых были выявлены позитивные кожные пробы. Врачи могут пользоваться также стандартным аллергологическим опросником.

    Атопию (или IgE-сенсибилизацию) устанавливают на основании клинических симптомов заболевания и положительных кожных проб или повышенного уровня общего или специфических IgE-антител в сыворотке крови больного.

    При назначении детям, страдающим атопическим дерматитом, кожных проб необходимо учитывать следующее:
    в случае обострения заболевания и при локальном применении наружных кортикостероидов применение кожных проб ограничено;
    следует отменить прием антигистаминных препаратов за 3 дня до постановки кожных тестов;
    рекомендуется постановка кожных проб с использованием прик-метода. По мнению зарубежных исследователей, считается ошибочной рекомендация ограничить их постановку у детей до 3 лет. Результаты прик-тестов в значительной степени зависят от используемого экстракта и давления ланцета на кожу;
    атопия считается доказанной при наличии хотя бы одной положительной пробы (средний диаметр папулы > Змм при негативном контроле) или > 2 баллов при серологическом обследовании.

    По положительным результатам аллергологического обследования можно говорить лишь о том, что индивид сенсибилизирован. Эти данные приобретают высокую диагностическую значимость только при сопоставлении с историей болезни и клиническими симптомами. Сравнительный анализ чаще всего подтверждает наличие у больных атопией строгой корреляции между высоким уровнем специфических IgE-антител сыворотки крови и клиникой заболевания. Применительно к атопическому дерматиту результаты кожного аллергологического обследования зависят от возраста ребенка, используемых методов диагностики и степени тяжести заболевания.

    У детей в возрасте до 3-4 лет одним из основных провоцирующих факторов развития атопического дераматита считается пищевая аллергия. В раннем возрасте чаще всего она проявляется кожными и гастроинтестинальными симптомами, крайне редко - респираторными. Основная причина пищевой гиперчувствительности - аллергия на белки коровьего молока, яиц, злаки и орехи. Дети с дермо-респираторным синдромом могут быть сенсибилизированы к ингаляционным аллергенам, и их необходимо обследовать на пылевые клещи, шерсть кошки (чаще всего).

    С возрастом повышается сенсибилизация к ингаляционным аллергенам (клещи домашней пыли, аллергены животных, тараканы), позже - к внежилищным аллергенам (грибки, пыльца). Как правило, высокую частоту сенсибилизации выявляют у детей с атопической астмой и аллергическим ринитом/конъюнктивитом. Однако наболее высокий уровень сывороточного IgE отмечается у больных атопическим дерматитом по сравнению с поллинозом или бронхиальной астмой.

    Типичный сезонный ринит и/или конъюнктивит (весной, летом) можно диагностировать без аллергологического обследования только на основании анамнеза больного. В дальнейшем таким пациентам обязательно проводят аллергологическое обследование с целью уточнения причинно-значимых аллергенов и назначения специфической иммунотерапии.